海洋橈足類作為生物活餌料的研究進展

程浩楠，王淑紅，程方平

（1.集美大學水產(chǎn)學院，觀賞水族福建省高校工程研究中心，福建廈門 361021；2.中國科學院海洋研究所海洋生態(tài)與環(huán)境科學重點實驗室，山東青島 266071）

橈足類是海洋中常見的后生動物（Metazoa）［1］，隸屬于節(jié)肢動物門（Arthropoda），甲殼動物亞門（Subphylurm Crustaceans），顎足綱（Maxillopoda），橈足亞綱（Copepoda），是一種體型較小的甲殼動物。目前已經(jīng)記錄的橈足類大約有11 500種［2－3］，占浮游生物總量的70%以上［4］，其成體大小通常在1～5 mm之間。與傳統(tǒng)生物活餌料輪蟲和豐年蟲不同，橈足類富含二十碳五烯酸（EPA，C20∶5n 3）、二十二碳六烯酸（DHA，C22∶6n 3）、游離氨基酸和一些其他必需微量營養(yǎng)素以及消化酶［5－6］，這些成分尤其是不飽和脂肪酸是很多海洋生物特別是海洋魚類早期幼體正常發(fā)育的重要保證。橈足類特殊的游泳方式還有助于誘發(fā)幼魚強烈的攝食反應［7－9］。體型較小的橈足類無節(jié)幼蟲可作為石斑魚科（Epinephelinae）、笛鯛科（Lutjanidae）［10－11］以及銹紅刺尻魚（Centropygeferrugata）［12］等小型海水神仙魚的開口餌料。這些產(chǎn)浮性卵的海水魚仔魚，開口時口裂通常小于傳統(tǒng)生物活餌料［12－14］，有些種類雖然可以攝食一些較小的傳統(tǒng)生物活餌料（如：超小型輪蟲、俄羅斯小鹵蟲等），但無法很好地消化吸收［15］，而橈足類可作為這些種類的優(yōu)質(zhì)活餌，提高其幼體存活率。

因此，本文針對目前橈足類作為生物活餌料的研究進展，從種類選擇、藻類餌料供應、培養(yǎng)條件（溫度、鹽度和光照）等方面進行了綜述，以期為后續(xù)開發(fā)橈足類高密度集約培養(yǎng)技術(shù)提供參考。

1 橈足類養(yǎng)殖發(fā)展面臨的問題

1.1 目標養(yǎng)殖種的篩選

魚類生產(chǎn)性育苗過程中需要大量且穩(wěn)定的生物活餌料供應，盡管橈足類具有諸多優(yōu)點，但其作為活餌料在海水魚類養(yǎng)殖生產(chǎn)中的使用仍然不太普遍。主要原因在于：一、橈足類高密度培養(yǎng)難度大，人工飼育條件下繁殖力較低［1］；二、活體橈足類的保存和運輸困難；三、對于餌料生物，滯育卵將大大降低保種、運輸?shù)碾y度，然而僅有近岸生活的少數(shù)橈足類種類產(chǎn)生滯育卵［16］，滯育卵的產(chǎn)生條件、數(shù)量以及保存和孵化條件等都遠未及鹵蟲卵成熟，致使橈足類用于生物活餌料具有很大局限性。因此，目前所利用的橈足類基本源自野生捕撈或蝦塘粗放培養(yǎng)，極少有穩(wěn)定的純種培養(yǎng)。

然而，野外捕撈不僅難以保證餌料的質(zhì)量和規(guī)格，還有可能引入對魚類幼體不利的種類。研究發(fā)現(xiàn)，有的畸異水蚤（Anomaloceraspp.）會捕食箭蟲和幼魚；一種歪水蚤（Tortanusspp.）可捕食體長在16～21 mm的鯡（Clupeapallassi）幼魚；有些劍水蚤（Cyclopsspp.）能咬破魚卵卵膜，進入卵的內(nèi)部，用口器吞噬胚體，有時在一個卵內(nèi)可以發(fā)現(xiàn)數(shù)只劍水蚤，導致魚卵孵化率極大降低，給養(yǎng)殖生產(chǎn)造成損失［17］。因此，充分了解不同種類橈足類的生物學特性、篩選具有人工培養(yǎng)潛力的橈足類種類非常必要。

1.2 發(fā)展集約養(yǎng)殖技術(shù)

發(fā)展橈足類集約化培養(yǎng)技術(shù)，是橈足類作為生物活餌料應用的關(guān)鍵。橈足類集約化培養(yǎng)是指通過人工設備模擬自然界環(huán)境，進行連續(xù)、高密度的橈足類培養(yǎng)，產(chǎn)出種類、質(zhì)量和數(shù)量都可控的橈足類，保障魚類育苗生產(chǎn)的穩(wěn)定性。海洋橈足類集約化培養(yǎng)對于解決開口餌料粒徑極小的魚類人工繁育問題具有重要意義，如胄刺尻魚（Centropygeloriculus）等小型海水神仙魚，其人工繁育的瓶頸即為缺乏合適的橈足類無節(jié)幼蟲作為開口餌料。對于提升其他海洋生物苗種質(zhì)量，制備富含不飽和脂肪酸的橈足類冰鮮餌料也具有廣闊的開發(fā)前景。然而，目前橈足類集約養(yǎng)殖技術(shù)尚處于起步階段，幾十年來，僅有一些零星報道，尚無大規(guī)模成功運用先例。

2 橈足類人工繁育研究進展

2.1 種類選擇

中國水域分布的橈足類可分為9個目：哲水蚤目（Calanoida）、劍水蚤目（Cyclopida）、猛水蚤目（Harpacticoida）、寬足水蚤目（Platycopioida）、怪水蚤目（Monstrilloida）、管口虱目（Siphonostomatoida）、鞘口水蚤目（Poecilostomatoida）、摩門虱目（Mormonilloida）和小虱目（Misophrioida）［18］。其中哲水蚤類完全營浮游生活；劍水蚤大部分營浮游生活，少數(shù)則營寄生或共棲生活；猛水蚤主要營底棲生活，僅有很少的種類及幼體營浮游生活。后6個目則完全營寄生或階段性寄生生活［17］。

自然界中，橈足類廣泛分布于不同的海域及半咸水的河口，由于生活習性及地理區(qū)域不同，橈足類形成了不同的生態(tài)類群（ecological group）。我國四大海區(qū)（南海、東海、渤海、黃海）每個海區(qū)的優(yōu)勢生態(tài)類群不盡相同。例如，低溫低鹽類群的真刺唇角水蚤（Labidoceraeuchaeta）和雙刺紡錘水蚤（Acartiabifilosa）等分布在近岸低鹽海域；角錨哲水蚤（Rhincalanuscornutus）和篩哲水蚤（Undinuladarwinii）等外海高溫高鹽類群分布在南海和受暖流影響的東海區(qū)以及臺灣海峽。此外，還有中華哲水蚤（Calanussinicus）和小擬哲水蚤（Paracalaunsparvus）等一些廣溫廣鹽性的種類，季節(jié)性地分布于各個海域［17］。

綜合分析不同水文環(huán)境海域的橈足類優(yōu)勢種類及環(huán)境因子，可以篩選一些橈足類進行人工培養(yǎng)，探索并優(yōu)化其培養(yǎng)條件。同時，還需要考慮橈足類的生態(tài)學特征，分析最適合的培養(yǎng)條件，如營浮游還是底棲生活、食性、產(chǎn)卵行為、個體大小以及抗逆性等，以完善大規(guī)模人工養(yǎng)殖技術(shù)。在生產(chǎn)過程中，還應根據(jù)養(yǎng)殖對象對生物餌料的具體需求進行定向選擇。例如，強額孔雀水蚤（Parvocalanuscrassirostris）的無節(jié)幼蟲體長僅為80μm左右，可作為某些口裂較小幼魚的開口餌料。

目前，用于人工活餌料培養(yǎng)的橈足類主要涉及哲水蚤目、劍水蚤目及猛水蚤目中的種類。它們大多營自由生活，分布廣泛，抗逆性較強。具有大規(guī)模培養(yǎng)潛力的橈足類在自然界中一般為近岸分布，對于溫度和鹽度變化具有較高的耐受力，其食性偏向于植食性和雜食性，便于人工飼喂。主要為中小型橈足類，具有較短的生活史，可以達到較高的培養(yǎng)密度。紡錘水蚤屬、胸刺水蚤屬、擬哲水蚤科、偽鏢水蚤屬和個別猛水蚤都有大規(guī)模人工培養(yǎng)的成功范例（表1）。

2.2 人工繁育橈足類的優(yōu)化：馴化和選育

自然界的橈足類種群引進室內(nèi)培養(yǎng)后，生存環(huán)境發(fā)生變化，必然導致一些個體產(chǎn)生應激反應，出現(xiàn)活力和繁殖力下降等一系列降低產(chǎn)量和質(zhì)量的不利現(xiàn)象，因此就需要對新引入人工繁育體系的橈足類進行馴化。馴化是在實驗誘導下，使某個物種原有遺傳性的行為、形態(tài)或者生理特性發(fā)生改變的過程［19－20］。馴化過程中，一些種類只需要在人工條件下連續(xù)培養(yǎng)幾個世代即可提升其繁殖力和環(huán)境耐受力，不需要選育。然而馴化也有可能導致一些良性性狀丟失，特別是在家系遺傳留存過少和近親交配時［21－22］。此外，馴化的缺點也可能會產(chǎn)生世代累積效應［23］。

表1 具有大規(guī)模培養(yǎng)潛力的橈足類Tab.1 Several kinds of potential copepod species for mass culture

相比魚蝦等大型水產(chǎn)動物，橈足類的世代周期較短。在人工選擇壓力下，通過一定時間的選育可以大大改善人工繁育橈足類的種質(zhì)資源，為大規(guī)模培養(yǎng)提供更優(yōu)質(zhì)的苗種，提高產(chǎn)品品質(zhì)。目前，僅有少量對橈足類進行人工選育的報道。ALAJMI等［24］對比了在實驗室連續(xù)培養(yǎng)約80個世代的強額孔雀水蚤與野生種群，發(fā)現(xiàn)實驗室培養(yǎng)的種群繁殖力和攝食率都遠高于野生種，同時死亡率也遠低于野生種。ALAJMI等［25］將強額孔雀水蚤同一子代中產(chǎn)卵量在前30%的雌性個體挑出，在連續(xù)選育5個世代后，第5代雌性的產(chǎn)卵量對比隨機交配的子代顯著提高20.5%。但LEE等［26］對矮小擬鏢水蚤（Paracyclopinanana）進行選育后，實驗種群的繁殖力卻未出現(xiàn)明顯提升。

雖然不同種類橈足類選育效果不同，但在實際生產(chǎn)過程中非常有必要進行選育以提高種質(zhì)。在人工繁育過程中，可以通過正向選育強化優(yōu)良性狀，也可以補充野生群體以避免因近親繁殖而導致的不良性狀的累積。對于短世代周期的橈足類，科學的選育實驗設計將非常有利于定向選育。

2.3 橈足類培養(yǎng)條件的優(yōu)化

2.3.1 餌料供應

合適的餌料供應是決定橈足類生長、繁殖和自身生理狀態(tài)的關(guān)鍵因素。濾食性橈足類通常以單胞藻為餌料，投喂的單胞藻主要包括金藻、硅藻和綠藻等。捕食性橈足類則需要投放一些小型浮游動物，如原生動物和甲殼動物的早期幼蟲［17］，也可用輪蟲、酵母菌、蝦片等配合飼料投喂。

在選擇藻類作為橈足類餌料時需考慮不同橈足類不同發(fā)育時期的適口性，選擇大小合適的藻類作為餌料。李捷等［45］分別單獨使用4種不同粒徑的藻以及混合藻對中華哲水蚤（Calanus sinicus）和雙刺紡錘水蚤（Acartiabifilosa）進行投喂實驗。結(jié)果表明，4個單種餌料中粒徑較大的兩種能夠保證橈足類幼體有著較高的存活率，但由于粒徑過大不適于無節(jié)幼蟲攝食，導致無節(jié)幼蟲在開口期出現(xiàn)較高的死亡率。上述研究表明，在養(yǎng)殖過程中，應根據(jù)投喂對象的發(fā)育特點提供適宜的餌料，還可進行多種不同大小的藻類混合喂養(yǎng)。

單胞藻的營養(yǎng)成分對于橈足類大規(guī)模培養(yǎng)非常重要［28］。繁殖力是橈足類養(yǎng)殖過程中影響種群補充維持養(yǎng)殖密度的關(guān)鍵參數(shù)，餌料種類以及投喂?jié)舛仁怯绊憳镒泐惙敝沉Φ南葲Q條件。CAMUS等［28］用大溪地等鞭金藻（Isochrysissp.）、周氏扁藻（Tetraselmischuii）、巴夫藻（Pavlovasp.）和牟氏角毛藻（Chaetocerosmuelleri）4種藻，設計了10組不同的餌料配比，投喂擬矮隆水蚤（Bestiolinasimilis），觀察了不同藻類配比投喂3 d后的繁殖力。結(jié)果表明：金藻、扁藻、巴夫藻（比例為1∶1∶1）喂養(yǎng)的6只雌性個體產(chǎn)卵總數(shù)最多，與其他幾種配比喂養(yǎng)的雌性橈足類有顯著差異，說明不同的單胞藻餌料配比顯著影響橈足類的繁殖力。

餌料濃度對于橈足類的繁殖力也有較大影響。KLINE和LAIDLEY［46］分別用密度為100×103、200×103、300×103、400×103、500×103個·mL－1的牟氏角毛藻和等鞭藻（Tisochrysis lutea）（1∶1）的混合餌料投喂種群密度為4個·mL－1的強額孔雀水蚤，結(jié)果表明不同餌料濃度對強額孔雀水蚤的存活率無顯著影響，但是用密度為500×103個·mL－1藻液投喂的橈足類，其繁殖力幾乎高出用密度為100×103個·mL－1藻液投喂的6倍。

值得關(guān)注的是，雖然“硅藻—橈足類—魚類”被認為是海洋生態(tài)系統(tǒng)中的經(jīng)典食物鏈而備受重視［47］，但近20年以來，現(xiàn)場和實驗室研究都表明高濃度硅藻對橈足類的產(chǎn)卵和孵化過程具有抑制作用［48－50］。BAN等［51］對37種橈足類 硅藻組合進行實驗分析，發(fā)現(xiàn)高濃度硅藻（103～105個·mL－1）在36種組合都存在對產(chǎn)卵率（7種組合）、孵化率（11種組合）或二者同時（18種組合）的抑制效應。UYE［52］使用2種微藻投喂太平洋哲水蚤（Calanuspacificus），投喂微小原甲藻（Prorocentrumminium）的對照組整個實驗期間卵成功孵化的概率約為96.6%，投喂一種硅藻（Cheatocerosdifficilis）的試驗組前5 d卵的孵化率大于84.0%，7 d后孵化率驟降到低于27.3%；IANORA等［53］的實驗表明，給克氏紡錘水蚤（Acartia clausi）投 喂 圓 海 鏈 藻（Thalassiosira rotula）后，其產(chǎn)卵量和壽命都低于投喂微小原甲藻的一半。李捷等［54］的研究也發(fā)現(xiàn)與球等鞭金藻（Isochrysis glbana）相比，三角褐指藻（Phaeodactylumtricornutum）對中華哲水蚤的產(chǎn)卵和孵化存在明顯的抑制作用。上述研究使得硅藻作為橈足類主要且高效食物來源的地位受到質(zhì)疑，在人工培養(yǎng)條件下可以使用其他類群的藻類代替硅藻，或者按照一定比例將其他類群藻類與硅藻混合喂養(yǎng)，減輕過多硅藻帶來的負面影響［55］。

藻類作為餌料，其質(zhì)量也影響到橈足類作為生物活餌料的質(zhì)量，橈足類身體成分中的一些氨基酸和脂肪酸與其食用藻類中這些物質(zhì)的含量呈現(xiàn)一定的相關(guān)性。有研究表明，給中華哲水蚤投喂DHA占總脂肪酸含量30.22%的中肋骨條藻（Skeletonemacostatum）28 d后，DHA含量較自然水體中的提升了約10%；若投喂DHA含量只有0.58%的海洋原甲藻（Prorocentrum micans），其DHA含量只提升約3%［56］。在直接使用10 mmol·L－1的L 賴氨酸、L 亮氨酸、L 異亮氨酸、L 纈氨酸溶液分別對巴拿馬異劍水蚤（Apocyclops panamensis）強化3 h后，其體內(nèi)對應氨基酸含量都有至少2倍以上的提升［57］。因此，通過合理選擇微藻餌料或人工添加營養(yǎng)素可以有效提升橈足類體內(nèi)一些營養(yǎng)成分的含量。

2.3.2 培養(yǎng)溫度

溫度是影響橈足類分布的重要制約因素，同時也是橈足類生長的重要影響因素。溫度對于不同種類橈足類的影響不盡相同，從而決定了它們在自然界中的時空分布模式及生活史［58］，可參考橈足類在自然界中的分布和生態(tài)習性以初步確定其人工繁育的溫度范圍。如紐氏偽哲水蚤（Pseudocalanusnewmani）作為冷水種橈足類，水體中的種群數(shù)量在溫度較高的季節(jié)極低，到了冬季才會大量繁殖，根據(jù)LEE等［59］的研究，20℃是紐氏偽哲水蚤的溫度上限，胚胎發(fā)育以及產(chǎn)卵率均受到抑制。橈足幼體2期（copepoditeⅡ）后其體長隨著溫度的降低而增加，但是其生長速率在15℃以內(nèi)隨著溫度的上升線性增加。而MILIONE和ZENG［30］對熱帶哲水蚤新津紡錘水蚤（A.sinjiensis）的研究表明，在10℃、15℃、20℃、25℃、28℃、30℃的不同溫度中培養(yǎng)，隨著溫度的升高新津紡錘水蚤的種群增長和孵化率都顯著提高，在30℃的時候達到最高，這與冷水種紐氏偽哲水蚤的情況大相徑庭。HOLSTE和PECK［33］的研究表明，在22.9℃時，以隱藻（Rhodomonassp.）培養(yǎng)的湯氏紡錘水蚤（A.tonsa）平均每只雌性每天可產(chǎn)出50個卵，隨著溫度升高單個雌性每日平均產(chǎn)卵量隨之下降，在34℃時由于雌性全部死亡，產(chǎn)卵量為0。

溫度還會對橈足類種群結(jié)構(gòu)產(chǎn)生一定影響，NOGUEIRA等［60］的研究表明，在17℃時紡錘水蚤（A.grani）的種群中有70%是無節(jié)幼蟲，在28℃時無節(jié)幼蟲只占種群的5%左右。由此可見，進行人工培養(yǎng)時，應根據(jù)所選種類的生物學特點以及培養(yǎng)的目標，確認最佳培養(yǎng)溫度。

2.3.3 鹽度

鹽度作為大規(guī)模培養(yǎng)的另外一個重要環(huán)境參數(shù)，也對橈足類有著一定的影響和制約作用。OHS等［61］研究了鹽度為10、15、20、25、30、35的培養(yǎng)環(huán)境中對偽鏢水蚤（Pseudodiaptomus pelagicus）生理過程及生活史，發(fā)現(xiàn)鹽度在35和10時無節(jié)幼蟲存活率分別為59.0%和81.0%，且隨著鹽度的改變，其種群首次性成熟的時間也隨之改變，在鹽度為15～30時首次性成熟時間為6.3 d左右，鹽度為10時則需約7.5 d，差異較明顯［61］。MILIONE和ZENG［30］的研究發(fā)現(xiàn)在15～50鹽度范圍內(nèi)，新津紡錘水蚤在30鹽度下具有最高的種群密度增長率。HOLSTE等［33］研究發(fā)現(xiàn)當鹽度為0時，湯氏紡錘水蚤卵的孵化率只有11.4%，在鹽度為25時孵化率達到峰值84.5%，且在鹽度增加至34時孵化率幾乎不變。不同地區(qū)的天然海水鹽度有所差異，在培養(yǎng)不同橈足類時可根據(jù)該種類適應鹽度及時進行調(diào)整，也可嘗試進行適當?shù)柠}度馴化。

2.3.4 光照

在自然界中，光照通過周期和強度影響橈足類餌料的生長和自身節(jié)律，進而影響橈足類種群密度增長。一個完整的光周期為24 h，在全球尺度上，一天24 h中白天和黑夜的占比有較大差異。光照時間對于大多數(shù)橈足類賴以為生的微藻生長起著至關(guān)重要的作用，而培養(yǎng)系統(tǒng)中微藻的數(shù)量又可能成為制約橈足類種群密度增長的因素。然而，人工飼養(yǎng)條件下通常會給予足量或者過量的微藻餌料并且隨時補充，這就使光周期間接影響橈足類的作用減弱或消失。

但目前室內(nèi)實驗證明，光譜、光強和周期對橈足類攝食率、產(chǎn)卵率、孵化率、發(fā)育過程等方面也有重要影響。CAMUS和ZENG［29］在光照強度為1 250 lux的條件下，研究了光周期（light∶dark）為0 h∶24 h、6 h∶18 h、12 h∶12 h、18 h∶6 h、24 h∶0 h的條件下新津紡錘水蚤的產(chǎn)卵率、孵化率、無節(jié)幼蟲發(fā)育等一系列參數(shù)的變化。發(fā)現(xiàn)在為期8 d的產(chǎn)卵監(jiān)測中，具有較長光照時間的兩組（24 h∶0 h，18 h∶6 h）具有最高的產(chǎn)卵量和孵化率，且從卵發(fā)育至各個時期的時間均明顯縮短。不同波長的光照也會影響橈足類攝食，TAO等［62］發(fā)現(xiàn)中華哲水蚤在紅、橙、黃光下的排糞率顯著高于黑暗條件下，且連續(xù)9 d的產(chǎn)卵實驗中，在強度分別為0.78 mW·m－2、1.58 mW·m－2、2.53 mW·m－2的全光譜照射下的產(chǎn)卵率始終高于黑暗條件下，但在光照強度為2.53 mW·m－2時，表現(xiàn)出較低的孵化率。還有研究發(fā)現(xiàn)光周期還能誘 導 橈 足 類 產(chǎn) 滯 育 卵［63－66］，CHINNERY和WILLIAMS［64］發(fā)現(xiàn)在光周期（light∶dark）為13 h∶11 h、12 h∶12 h時，雙刺紡錘水蚤卵中滯育卵的比例分別為90%和10%，兩者差異顯著。HAIRSTON和KEARNS［67］發(fā)現(xiàn)在光照時長從11.75 h提高到13.25 h時，所產(chǎn)卵的滯育百分比從8.7%上升到98.0%。因此，光照條件對橈足類的生理活動和繁殖過程的影響是復雜的，其機理可應用到橈足類人工繁育方面。

2.3.5 培養(yǎng)密度

種群密度是人工培養(yǎng)過程中最重要的養(yǎng)殖參數(shù)之一。自然界中橈足類作為一個重要的次級生產(chǎn)者，其種群的增長受到食物、捕食者和生存空間等各種因素的限制，常常處于較低水平。在人工養(yǎng)殖條件下，食物、溫鹽等條件優(yōu)化之后，不同種類種群密度能達到的峰值也不盡相同。比起其他傳統(tǒng)生物活餌料，輪蟲（Brachinousspp.）在常規(guī)培養(yǎng)方式下的密度通常只能維持在100～200個·mL－1，但在新研發(fā)的培養(yǎng)技術(shù)下其培養(yǎng)密度可以達到16萬個·mL－1［68］。然而受種種制約，橈足類很難開發(fā)高密度人工培養(yǎng)技術(shù)，這也是它作為生物活餌料的最大瓶頸。

橈足類的攝食方式分為濾食、攝食碎屑和捕食等3種方式，在高密度培養(yǎng)下橈足類個體之間的競爭與天然環(huán)境相比更為激烈。在人工飼養(yǎng)條件下常常觀察到它們攝食同種幼體的現(xiàn)象，如：湯氏紡錘水蚤［29］、海島哲水蚤（Calanus helgolandicus）［69－71］、長 角 寬 水 蚤（Temora Longicornis）［72］和 虎 斑 猛 水 蚤（Tigriopus fulvus）［73］都有攝食無節(jié)幼蟲的現(xiàn)象，進而影響種群的補充。這可能是橈足類培養(yǎng)中種群密度無法持續(xù)升高的重要因素。OHMAN和HIRCHE［74］發(fā)現(xiàn)飛馬哲水蚤（Calanusfinmarchicus）雌性密度在達到16 000個·m－2時卵具有較高的死亡率，且觀察到這種哲水蚤會攝食自己的卵和與卵粒徑相似的浮游生物。

橈足類繁殖率在種群密度增長到一定程度時不再升高甚至降低，還可能跟內(nèi)源性自動調(diào)節(jié)有關(guān)。有報道認為，雖然濾食性的強額孔雀水蚤在培養(yǎng)到一定密度時也會產(chǎn)生種群數(shù)量負增長，但目前并沒有該種類會攝食幼體的直接證據(jù)［46］，該研究的結(jié)果顯示，強額孔雀水蚤在培養(yǎng)密度為2～8個·mL－1時，平均每個個體產(chǎn)生無節(jié)幼蟲和卵的數(shù)目在3 d內(nèi)持續(xù)下降。當密度達到8個·mL－1時，其個體幾乎喪失繁殖力。同一研究還顯示，每日收取強額孔雀水蚤卵和幼體的組，繁殖率明顯高于3天收取一次的組，此現(xiàn)象可能就與強額孔雀水蚤攝食其卵和幼體有關(guān)，具體機制尚需進一步研究。

因此，在培育過程中，對于濾食性種類應注意做好成體和幼體的分離工作，盡量減少同類殘食現(xiàn)象。同時應關(guān)注橈足類培養(yǎng)密度，通過馴化、選育逐步提高其密度，以提高單位水體的餌料產(chǎn)出。

2.3.6 培養(yǎng)環(huán)境水質(zhì)影響

人工培養(yǎng)環(huán)境相對自然水體體積較小，進行養(yǎng)殖活動時常常積累一定水平的污染物，如含氮、碳、磷、硫等的代謝廢物。這些代謝產(chǎn)物在氧氣充足的條件下對水生生物的影響程度不大，但是當其濃度較高達到閾值時，則會產(chǎn)生毒害作用。如氮以分子氨態(tài)或亞硝酸鹽氨態(tài)存在且達到一定濃度時，就會對養(yǎng)殖水生生物產(chǎn)生很強的神經(jīng)性毒害［75］。目前有關(guān)此類污染物對于橈足類存活率影響方面的報道較少，現(xiàn)有報道觀點不盡一致。KLINE等［46］發(fā)現(xiàn)強額孔雀水蚤培養(yǎng)水體中的N NH3濃度從0提升至0.4 mg·L－1后，對其無節(jié)幼蟲存活率沒有影響。KURIHARA和ISHIMATSU［76］的研究發(fā)現(xiàn)，在水中CO2濃度為2 000 mg·L－1時，馬紡錘水蚤（Acartiatsuensis）的存活率、幼體發(fā)育及體長等均與CO2濃度為380 mg·L－1時無顯著差異，但卵的孵化率卻比后者降低約10%～18%，差異顯著，這可能是CO2改變了養(yǎng)殖水體的酸堿度所致的［77］。

水中溶解氧（DO）的降低也會對橈足類產(chǎn)生影響，LUTZ等［78］的研究發(fā)現(xiàn)哈默胸刺水蚤（Centropageshamatus）的卵在DO＜0.03 mg·L－1的海水中孵化會受到抑制，但移入海水（0.13 mg·L－1＞DO＞0.03 mg·L－1）11 d后的孵化率能達到4%～87%，但前5 d卵的孵化率為0%，說明溶解氧較低會導致卵發(fā)育遲緩。湯氏紡錘水蚤的卵在0.13 mg·L－1＞DO＞0.09 mg·L－1的水中孵化率低于10%，在DO＜0.09 mg·L－1水中孵化率為0%。

水體中的顆粒有機碳和溶解有機碳也可能對橈足類產(chǎn)生影響。有機碳可能引起整個養(yǎng)殖環(huán)境的微生物菌群發(fā)生失衡［79－81］，從而影響到橈足類的生理生態(tài)活動。在餌料投喂過量的水體中，原生動物容易出現(xiàn)暴發(fā)，一些原生動物如鐘蟲（Vorticellaspp.）等可能會粘附在橈足類體表，導致橈足類的死亡［82］。因此在橈足類大規(guī)模培養(yǎng)時應注意水質(zhì)的監(jiān)測與維護。

2.4 產(chǎn)滯育卵的橈足類用于人工繁育的潛在優(yōu)勢

在溫度較高或較低以及食物不充足、光周期、鹽度或者其他一些條件改變較大時，部分橈足類會產(chǎn)生滯育卵［16］，目前報道的約有51個種可以產(chǎn)出滯育卵，它們分別來自紡錘水蚤科、胸刺水蚤科、角水蚤科、寬水蚤科和歪水蚤科等［83］。MARCUS和MURRAY［84］將實驗室產(chǎn)出的小批哈默胸刺水蚤的滯育卵孵化，并成功用于數(shù)種魚類的育苗。但目前滯育卵的研究大多只停留在實驗室階段，將橈足類滯育卵應用于水產(chǎn)養(yǎng)殖中的實例較少。探索自然條件下橈足類卵的滯育條件，以及通過人工手段誘導一些在水產(chǎn)養(yǎng)殖中具有潛力的橈足類產(chǎn)生滯育卵，具有重要的研究意義和實際應用價值。滯育卵易于保存、運輸，可大大降低橈足類作為活餌料保種、運輸、交易的難度。

3 橈足類集約化培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展

橈足類集約化培養(yǎng)能將養(yǎng)殖效率最大化，早在20世紀末一些學者［7，85－86］就曾報道過橈足類循環(huán)水培養(yǎng)系統(tǒng)，但其構(gòu)成都較為簡單，都是由養(yǎng)殖和過濾等基本單元組成。徐東暉［87］根據(jù)培養(yǎng)系統(tǒng)的自動化程度和水體養(yǎng)殖方式，將橈足類集約化培養(yǎng)系統(tǒng)分為：

1）開放式非自動化培養(yǎng)系統(tǒng)，采用敞口容器設計的用于培養(yǎng)猛水蚤Tisbeholothuriae的非自動化裝置，培養(yǎng)密度可達115.8個·mL－1［88］；

2）封閉式非自動化培養(yǎng)系統(tǒng)，采用封閉的200～450 L水箱連續(xù)培養(yǎng)了約70個世代的湯氏紡錘水蚤，成體密度維持在50～100個·L－1［89］；

3）封閉循環(huán)式非自動化培養(yǎng)系統(tǒng)，采用封閉水箱的自動化培養(yǎng)裝置連續(xù)培養(yǎng)猛水蚤Amphiascoidesatopus，可日產(chǎn)橈足類干重約5 g［85］，國內(nèi)學者［90］也研發(fā)出了一款橈足類循環(huán)水養(yǎng)殖設備，在61 d的培養(yǎng)周期中，該裝置可以使中華哲水蚤的成體數(shù)量由2～3個·L－1穩(wěn)定至19.7個·L－1，產(chǎn)卵量由14.7個·L－1穩(wěn)定至85.7個·L－1，而且可以分離卵和成體，防止卵被誤食；

4）封閉循環(huán)式自動化培養(yǎng)系統(tǒng)，首先是一些簡單的自動化設備組成的封閉循環(huán)培養(yǎng)系統(tǒng)，連續(xù)培養(yǎng)猛水蚤，最高日產(chǎn)無節(jié)幼蟲約8×105個［7］。后續(xù)出現(xiàn)了一款大型橈足類自動連續(xù)培養(yǎng)設備，其中引入了大量的自動化控制設計，通過電磁閥和液位開關(guān)自動完成幼體收集和水循環(huán)過程［91］。此套系統(tǒng)優(yōu)點在于其自動化程度很高，可減少大量人力投入，但缺點在于其中未加入溫控裝置，導致其生產(chǎn)過程穩(wěn)定性不夠。CAROTENUTO等［92］則在循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中加入了溫度控制系統(tǒng)，使得整套系統(tǒng)的生產(chǎn)穩(wěn)定性大大增加。

集約化、自動化的養(yǎng)殖設備能夠通過可控的系統(tǒng)使養(yǎng)殖水體得到有效凈化，提高整個系統(tǒng)連續(xù)產(chǎn)出的能力，同時可以定時定量收集需要的不同發(fā)育階段的橈足類幼蟲或卵，相較于傳統(tǒng)養(yǎng)殖模式能夠大大提高養(yǎng)殖效率，增加生產(chǎn)的穩(wěn)定性，是橈足類集約化培養(yǎng)中不可或缺的一環(huán)，具有很好的應用前景。

4 小結(jié)

橈足類作為多種海洋生物幼體的天然開口餌料，具有體型小、富含不飽和脂肪酸、易消化等諸多優(yōu)點，但目前少有集約化穩(wěn)定供應，限制了其在生產(chǎn)中的應用。橈足類對餌料需求高，多數(shù)橈足類必須使用新鮮的微藻喂養(yǎng)；養(yǎng)殖密度難以提升，產(chǎn)量低；種群控制機制不明確，人工培養(yǎng)不能穩(wěn)定供應等因素是制約橈足類集約化培養(yǎng)技術(shù)發(fā)展的主要原因。培養(yǎng)種類的選擇、培養(yǎng)條件的探索和優(yōu)化，以及自動化和智能化集約培養(yǎng)設備的研發(fā)應是今后主要的研究方向。