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    聚精湯加味聯(lián)合山海丹顆粒治療精子DNA碎片率異常男性不育癥臨床研究

    2020-09-29 08:54:46卞廷松盧桂林彭玉霞張?zhí)煊?/span>李前豹徐文潔
    亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥 2020年9期
    關鍵詞:不育癥精液精子

    卞廷松,盧桂林,彭玉霞,張?zhí)煊?,李前豹,徐文潔,?勇

    (1.南京中醫(yī)藥大學附屬常州市中醫(yī)醫(yī)院,江蘇 常州 213003;2.南京中醫(yī)藥大學,江蘇 南京 210023)

    男性不育癥是21世紀影響人類健康的主要問題之一,相關研究表明世界范圍內(nèi)因各種原因所致不育癥夫妻達6000~8000萬對,其中男方原因所致不育占30%~40%[1],而男性不育中精子異常占75.4%[2]。我國男性精液質(zhì)量近年來亦不斷下降,已婚育齡夫婦中無法生育者約占10%~15%,因男方因素所致不育約占55%[3]。精子質(zhì)量為影響男性生育的直接因素,研究表明,精子染色質(zhì)結構的完整性是判斷精子質(zhì)量的有效依據(jù),是影響男性生育能力與子代基因安全性的關鍵因素,男性精子DNA碎片率的增加與胚胎質(zhì)量呈負相關,其不利影響包括降低受精率及胚胎質(zhì)量、降低著床率和妊娠率、增加胎停的風險等[4]。因此有效提高精子DNA的完整性為治療的關鍵所在,目前關于精子DNA損傷的機制尚未明確,臨床醫(yī)學尚無特效治療方法,本研究采用聚精湯加味聯(lián)合山海丹顆粒治療DFI異常不育癥患者,臨床效果顯著,報道如下。

    1 資料和方法

    1.1 一般資料

    選取2019年1月-2019年11月于常州市中醫(yī)醫(yī)院男科門診就診的72例DFI異?;颊咦鳛檠芯繉ο螅瑢⑵潆S機分為實驗組與對照組各36例。實驗組年齡(25±3.1)歲,平均年齡26.05歲;對照組年齡(26±1.8)歲,平均年齡25.58歲。納入標準:①已婚性生活正常夫妻;②未采用避孕措施1年以上未能受孕者;③少、弱、死、畸精等導致的不育;④每次射精量1.5 ~6 mL者;⑤各種免疫性不育者;⑥DFI>15%者?;颊叻仙鲜銮闆r,屬中醫(yī)“腎虛血瘀證”,有婚后不育,并見睪丸偏小、或大小正常而質(zhì)地偏軟,腰膝酸軟,或耳鳴、眩暈神疲,小腹、陰囊及會陰部不適,睪丸抽痛、有射精痛,面部發(fā)暗或面色黧黑,皮膚色素沉著,舌質(zhì)暗伴瘀斑瘀點,脈沉細澀。

    排除標準:①先后天無精者,包括先天性無精者及后天因生殖系統(tǒng)疾病如梗阻等因素所致無精者;②隱睪癥及睪丸發(fā)育欠佳、生殖系統(tǒng)畸形者;③染色體異常者;④生殖道感染者;⑤抗精子抗體陽性者;⑥長期服用降血壓、抗腫瘤、精神類等可能對生精及精液質(zhì)量產(chǎn)生影響的藥物者;⑦存在心腦血管、肝腎功能、造血凝血系統(tǒng)等異常的基礎性疾病者;⑧因女方所致不孕者;⑨依從性較差者;⑩因各種原因所致無法接受或完成治療者。

    1.2 研究方法

    采用開放性隨機藥物對照臨床研究,對兩組治療前后精子活力、密度、DFI進行分析,統(tǒng)計臨床有效率。①精液常規(guī)分析:治療前后(3個月)分別檢查精液常規(guī),禁欲3~5天后采用手淫取精法,將精液放置37 ℃恒溫箱中液化,選用北昂醫(yī)療器械(上海)有限公司全自動精液分析系統(tǒng)分析精液參數(shù);②DFI檢測:精子DNA碎片指數(shù)檢測試劑均從浙江星博生物科技股份有限公司采購,按照DFI檢測標準操作流程SOP進行精子染色質(zhì)結構分析試驗(SCSA)檢測,參考值為0~15%(DFI≤15%提示精子DNA完整性好)。

    1.3 治療方法

    對照組患者口服聚精湯加味治療(方藥組成:生熟地15g,太子參10 g,續(xù)斷10 g,益母草10 g,制黃精15 g,沙苑子15 g,何首烏10 g,茯苓10 g,枸杞子15 g,炒白術15 g,菟絲子15 g。中藥均由常州市中醫(yī)院中藥房提供),1劑/d,早晚各煎煮1次,飯后溫服,每次服用120~150 mL。實驗組予口服聚精湯加味(劑量及服用方法同對照組)聯(lián)合山海丹顆粒(浙江施強制藥有限公司,國藥準字 Z20153023),1次1袋(10 g),早晚飯后沖服,均治療3個月。

    1.4 統(tǒng)計學方法

    2 結果

    2.1 評判標準

    ①精液參數(shù):治療前后精子活力、密度、DFI改善情況;②臨床有效率:治愈:治療期間配偶受孕;顯效:患者妻子雖未受孕,但患者在治療后3個月精液常規(guī)、DFI常規(guī)檢查已正常;有效:患者妻子未受孕,精液檢測雖仍不正常但較前改善;無效:治療前后精液檢測無改善??傆行?%)=治愈率(%)+顯效率(%)+有效率(%);③安全指標:檢測治療前后患者肝腎功能,血、尿常規(guī)。

    2.2 治療結果

    2.2.1 精液參數(shù)對比 治療前兩組患者的精子活力(PR%、PR+NP%)、密度、DFI均無統(tǒng)計學差異(P>0.05),治療后同治療前相比兩組患者精子活力、密度、DFI均有不同程度的改善,但實驗組治療后精液參數(shù)顯著優(yōu)于對照組(P<0.01),見表1。

    2.2.2 臨床有效率對比 對照組治療后5對夫婦懷孕,9例顯效,13例有效,9例無效,總有效率為75.0%;實驗組治療后6對夫婦懷孕,10例顯效,14例有效,6例無效,總有效率為83.33%,經(jīng)治療后臨床有效率實驗組顯著高于對照組(P<0.05),見表2。

    2.2.3 安全性評價 治療過程中所有患者均無明顯不適,治療前后患者肝腎功能,血、尿常規(guī)均正常,表明治療無毒副作用,安全性高。

    表1 兩組治療前后精液參數(shù)比較

    表2 兩組患者治療后臨床有效率比較 [n(%)]

    3 討論

    關于精子DNA損傷所致精子DFI升高的病理機制尚無明確結論,其原因大致包括:①精子產(chǎn)生過程中,受到微量元素、化學毒性物質(zhì)、放射、年齡等因素影響導致細胞凋亡,大量DNA受損的精子未被及時清除致使DFI升高[5];②細胞內(nèi)氧自由基生成量增加或對氧自由基的清除能力減弱,致使細胞進入氧化應激狀態(tài),細胞核與線粒體DNA受損,細胞結構遭到破壞致DFI升高[6];③精子生成、生長過程中魚精蛋白替代細胞核內(nèi)組蛋白時發(fā)生轉化障礙,染色體組裝異常致DFI升高[7]。

    精子DFI異常在中醫(yī)學中無對應病名,因其結果為引起不育,故屬“不育”或“無子”范疇,中醫(yī)認為腎為先天之本,主藏精與生殖,以“腎陽-腎陰-精室-腎子-精竅”為生殖軸,《素問》中提及“丈夫二八,腎氣盛,天癸至……陰陽和,故能有子”。中醫(yī)治療男性不育癥重點在于調(diào)腎之陰陽,補腎填精益氣。由于生活節(jié)奏的加快,生存壓力的增大,使多數(shù)男子因郁致病、氣血不暢,氣滯則血瘀,或飲食所傷,濕熱內(nèi)蘊,客于宗筋,精竅閉阻致精瘀,易形成“本虛標實,腎虛血瘀 ”之證,臨床可表現(xiàn)為睪丸墜脹而痛、精索靜脈曲張、睪丸或附睪結節(jié)、精子異常等。治療中以補腎填精為本,佐以活血化瘀之法,可改善精液質(zhì)量,提高治愈率,臨床療效顯著。

    下丘腦-垂體-性腺軸功能對男性生育起主要調(diào)節(jié)作用,軸功能紊亂可引起男性不育[8]。藥理研究顯示補腎填精類中藥的作用機制為:①調(diào)控下丘腦-垂體-性腺軸功能,改善體內(nèi)激素水平,干預精子產(chǎn)生、生長、儲備過程,改善精液質(zhì)量;②通過改善人體免疫力,提升抗氧化酶活性,從而增強抗氧化、抗氧自由基作用,保障生物膜的完整性,使精子免受氧化應激損傷,同時類激素樣作用可促進睪丸生長發(fā)育及增強附屬性腺分泌功能[9]?;钛鏊幬锛瓤筛纳魄傲邢佟⒕黛o脈等局部血液循環(huán),減輕局部缺氧、缺血、水腫及炎癥等情況,有效抑制纖維化進程;還可改善睪丸、附睪功能,增強機體抗氧化酶活性及抑制活性氧,使精子免受氧化損傷,重新調(diào)節(jié)生精細胞功能,從而促進生精,改善精子質(zhì)量[10-11]。

    聚精湯是徐福松教授根據(jù)“陽化氣,陰成形”理論,結合多年經(jīng)驗,研制成的治療男性不育癥的經(jīng)驗方。徐老依據(jù)“先天生后天,后天養(yǎng)先天”之說,采用“脾腎雙補”法,補腎填精,健脾助運,滋陰重于補陽。聚精湯加味由聚精湯化裁而來,藥物組成:生熟地15 g,太子參10 g,續(xù)斷10 g,益母草10 g,制黃精15 g,沙苑子15 g,何首烏10 g,茯苓10 g,枸杞子15 g,炒白術15 g,菟絲子15 g。方中生熟地、續(xù)斷、沙苑子、何首烏、菟絲子、枸杞子等益腎填精,補腎中之陰精不足;枸杞子在補腎填精的同時,有調(diào)節(jié)免疫,促進睪酮分泌等作用[12];炒白術、制黃精、茯苓健脾填精,脾胃為后天之本,精血同源,化血生精。山海丹顆粒為中成藥,由三七、丹參、何首烏等組成,三七為活血止血之名藥,三七總皂苷可抗炎、抗氧化及改善血管平滑?。缓问诪跛u基蒽醌與各種微量元素,可調(diào)節(jié)血脂,共奏活血通絡之功[13]。諸藥共用,以補腎填精為本,佐以活血化瘀之法,臨床效果顯著。

    既往研究發(fā)現(xiàn)聚精湯聯(lián)合活血藥物可促進核蛋白組型轉換半定量值(以下簡稱為核蛋白)改善,其機制為幫助魚精蛋白替代體細胞類型組蛋白反應的正常發(fā)生[14]。人類精子是高度分化的一種生殖細胞,在精子生產(chǎn)、生長、儲備過程中,魚精蛋白逐漸取代體細胞類型組蛋白且與二硫鍵結合,壓縮精子染色體,這種特殊的結構可保障成熟的精子DNA免受傷害,同時魚精蛋白可抑制DNA轉錄與基因表達,維持精子遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性,但是在精子成熟過程中,開始減速分裂后的精原細胞易受致病因素損傷,導致部分攜帶受損DNA的精子躲避人體內(nèi)精子篩選機制發(fā)育成熟且將缺陷遺傳給子代[15-16]。相關研究表明,核蛋白值與精子DFI值呈顯著正相關,隨著核蛋白值升高,DFI值同步升高,核蛋白異常時會降低精子穩(wěn)定性,造成精子DNA損傷,損傷累積超過一定閾值,會破壞精子遺傳物質(zhì),從而影響精子質(zhì)量[17-18]。本研究中實驗組與對照組經(jīng)治療后均能明顯改善精子活力、密度,降低DNA碎片率,其中實驗組聚精湯加味聯(lián)合山海丹顆粒采用補腎活血之法效果更甚,具有確切的安全性及有效性,其機制可能為使魚精蛋白發(fā)生正常取代反應,同精子DNA結合形成被高度壓縮的精子特異性染色質(zhì),維持精子DNA雙鏈的穩(wěn)定,保障DNA免于損害的同時起到修復作用,從而降低DFI,具體機制有待進一步探究。

    目前關于精子DNA損傷原因與機制的研究較多,但關于精子DNA損傷的預防與修復的研究較少,且臨床醫(yī)學對此尚無特效療法,本研究表明聚精湯加味聯(lián)合山海丹顆粒可改善DFI異常所致男性不育癥患者的DFI值,且安全有效,提示部分中藥可保護與修復精子DNA,因此需要我們加大對中醫(yī)藥保護與修復精子DNA相關機制的研究。

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