抗核抗體及抗核抗體譜與自身免疫性疾病的關(guān)系

馮丹丹，李晶晶

河南科技大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院/河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室，河南洛陽 471000

自身免疫性疾病血清中存在高價(jià)的自身抗體，是臨床診斷自身免疫性疾病的重要參考依據(jù)[1-2]。間接免疫熒光法檢測抗核抗體(ANA)對多種自身免疫性疾病具有臨床診斷價(jià)值[3-4]。自身抗體譜檢測是診斷自身免疫性疾病的標(biāo)準(zhǔn)之一[5]，本研究對1 400例自身免疫性疾病住院患者中368例ANA陽性患者的ANA譜及ANA檢測結(jié)果進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年1-8月在河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室接收的1 400例進(jìn)行ANA譜及ANA檢測的自身免疫性疾病住院患者為研究對象，其中男368例，女1 032例。診斷依據(jù)參照1997 年修訂的國際通用的診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的標(biāo)準(zhǔn)[6]，2015 年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)/歐洲抗風(fēng)濕聯(lián)盟發(fā)表的痛風(fēng)分類標(biāo)準(zhǔn)診斷類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)[7]，2012 年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)發(fā)表的診斷干燥綜合征(SS)的標(biāo)準(zhǔn)[8]等。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)研究通過且所有患者簽署知情同意書，所有研究對象均具有完整的病歷資料且符合診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除合并其他重大疾病者、孕婦、女性月經(jīng)期者，檢測期間發(fā)熱及不能配合者。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集及儲(chǔ)存 受檢者清晨空腹，采集靜脈血2～3 mL，待血標(biāo)本凝固后，3 000 r/min離心5 min立即檢測或分離血清-20 ℃冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2儀器與試劑 采用歐蒙(杭州)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷有限公司生產(chǎn)的ANA檢測試劑盒檢測ANA，利用歐蒙(杭州)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷有限公司提供的ANA譜試劑盒及EURO Blot Master Ⅱ免疫印跡儀檢測ANA譜。

1.2.3方法 本實(shí)驗(yàn)室將抗體滴度分為1∶100、1∶320、1∶1 000；ANA譜檢測采用免疫印跡儀法，嚴(yán)格按SOP進(jìn)行操作，顯色、膜條干燥后儀器系統(tǒng)自動(dòng)判讀結(jié)果，檢測結(jié)果的判讀根據(jù)膜條上抗原標(biāo)志線是否顯色及顯色的深淺進(jìn)行判定。ANA譜包括抗核小體抗體、抗組蛋白抗體(Histon)、抗SM-D1抗體、抗U1-snRNP抗體、抗SS-A/Ro-60抗體、抗SS-A/Ro-52抗體、抗La/SS-B抗體、抗Scl-70抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗著絲粒蛋白B(CENP-B)抗體、抗Jo-1抗體、抗核糖體P蛋白(Rib-P)抗體、抗PM-Scl抗體、抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)、抗線粒體M2(AMA-M2)抗體共15種不同抗體[4]。任何一種抗體陽性即視為ANA譜檢測為陽性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS20.0處理軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1一般資料 1 400例研究對象中ANA陽性368例(26.29%)，其中267例為首診患者，101例為復(fù)查患者。267例ANA陽性首診患者中男91例，女176例；年齡15～83歲，平均(51.4±14.23)歲；根據(jù)系統(tǒng)性自身免疫性疾病分為SLE 41例，RA 87例，混合型結(jié)締組織病(MCTD)31例，硬皮病(PSS)28例，SS 42例，原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)11例，特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)12例，未明確診斷者15例。101例患者經(jīng)首次診斷確診后進(jìn)行為期2周的系統(tǒng)治療，然后復(fù)查血清ANA譜及ANA測定。

2.2ANA陽性的267例首診患者ANA譜分布情況 ANA陽性的267例首診患者中ANA譜陽性者84例(31.5%)。其中SLE患者的抗雙鏈DNA抗體、抗核小體抗體陽性率高,分別占SLE患者的85.4%和87.8%，見表1。結(jié)果顯示，ANA譜的自身抗體中抗雙鏈DNA抗體、抗SS-A/Ro-60抗體、抗SS-A/Ro-52抗體和抗Scl-70抗體均在多種自身免疫性疾病中表達(dá)，其次抗La/SS-B抗體、抗Jo-1抗體、抗Rib-P抗體、抗組蛋白抗體、抗SM-D1抗體和抗U1-snRNP抗體也在多種自身免疫性疾病中表達(dá)。

表1 ANA抗體陽性的267例首診患者ANA譜測定結(jié)果[n(%)]

2.3101例復(fù)查患者的ANA滴度與治療前相比 101例復(fù)查患者治療前ANA滴度分布情況為<1∶100者10例(9.9%)，≥1∶100(33例)、≥1∶320(45例)、≥1∶1 000(13例)者共91例(90.1%)。經(jīng)過2周的治療后復(fù)查結(jié)果顯示，ANA滴度<1∶100者58例(57.4%)，≥1∶100(21例)、≥1∶320(19例)及≥1∶1 000(3例)者共43例(42.6%)。101例患者經(jīng)過2周的治療后，其ANA滴度顯著降低，與治療前相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.4ANA性別差異情況 1 400例自身免疫性疾病患者中，女性患者ANA陽性率26.3%(271/1 032)，男性患者ANA陽性率35.9%(132/368)，女性患者ANA陽性率明顯高于男性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3 討 論

ANA是自身抗體的總稱，與自身免疫性疾病關(guān)系密切，可用于自身免疫性疾病的篩查[7]。目前，自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制尚不完全明確，診斷較為復(fù)雜[8]，其診斷主要依據(jù)臨床表現(xiàn)及自身免疫實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)檢測結(jié)果[9],間接免疫熒光法檢測ANA具有較高的靈敏度和特異度，采用免疫印跡法檢測ANA譜，特異性高，但靈敏度低，兩種檢測方法均具有其局限性，易出現(xiàn)假陰性或假陽性結(jié)果。因此兩種方法聯(lián)合檢測對疾病的診斷具有互補(bǔ)意義。

本研究顯示，ANA譜中抗雙鏈DNA抗體、抗SS-A/Ro-60抗體、抗SS-A/Ro-52抗體和抗Scl-70抗體均在多種自身免疫性疾病中表達(dá)，其次抗La/SS-B抗體、抗Jo-1抗體、抗Rib-P抗體、抗組蛋白抗體、抗SM-D1抗體和抗U1-snRNP抗體也在多種自身免疫性疾病中表達(dá)。不同ANA譜對特定疾病的診斷也具有不同的靈敏度及特異度。因此可根據(jù)ANA譜的表達(dá)特點(diǎn)，對疾病進(jìn)行輔助診斷，進(jìn)一步指導(dǎo)臨床用藥及針對性治療。研究結(jié)果還顯示，101例復(fù)查患者治療前，ANA滴度<1∶100者10例(9.9%)，ANA滴度為≥1∶100、≥1∶320、≥1∶1 000者共91例(90.1%)，經(jīng)過一段時(shí)間的治療后，對患者ANA抗體進(jìn)行復(fù)查，其ANA滴度<1∶100者58例(57.4%)，ANA滴度為≥1∶100、≥1∶320、≥1∶1 000者共43例(42.6%)，與治療前相比，其ANA滴度顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。因此ANA滴度對自身免疫性疾病的治療及判斷病情轉(zhuǎn)歸具有指導(dǎo)作用，結(jié)合臨床資料及隨訪綜合分析，ANA滴度對反映病情具有很好的參考價(jià)值。

本研究還顯示1 400例自身免疫性疾病患者中，女性患者ANA陽性率明顯高于男性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。有研究表明，性激素以多種不同方式對人體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生影響[10]。

綜上所述，本研究證實(shí)血清中ANA及ANA譜對自身免疫性疾病的診斷和治療具有很好的指導(dǎo)意義。