腫瘤標(biāo)志物GSTP1、CYFRA21-1及SCC-Ag對非小細(xì)胞肺癌的預(yù)后評估價(jià)值

劉亞杰，馬曉波

（華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院 1.檢驗(yàn)科，2.病案科，河北 唐山 063000）

肺癌的發(fā)病率及病死率均較高，其中非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）約占85%[1]。近年來NSCLC 的診療方法不斷提高，但由于缺少典型臨床表現(xiàn)，相當(dāng)一部分NSCLC 患者就診時(shí)已經(jīng)是晚期，5年生存率僅為15%左右，預(yù)后不佳[2]。低劑量螺旋CT 是目前主要的肺癌檢查手段，但由于輻射原因部分患者對該類檢查存在抵觸[3]。近年來的研究發(fā)現(xiàn)了多種NSCLC 的腫瘤標(biāo)志物，例如GSTP1、CYFRA21-1、SCC-Ag 等對NSCLC 具有一定的診斷價(jià)值[4-6]。但這些標(biāo)志物與NSCLC 患者預(yù)后的關(guān)系尚不十分清楚，因此本研究旨在探討腫瘤標(biāo)志物GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 對NSCLC 的預(yù)后評估價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年6月—2018年6月華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院收治的600 例NSCLC 患者作為實(shí)驗(yàn)組。其中，男性397 例，女性203 例；年齡34～87 歲，平均（63.52±12.61）歲；病理類型：腺癌441 例，鱗癌107 例，腺鱗癌37 例，大細(xì)胞癌15 例；臨床分期：Ⅰ期36 例，Ⅱ期127 例，Ⅲ期224 例，Ⅳ期213 例。所有患者經(jīng)病理檢查確診為原發(fā)性NSCLC，且有治療前的腫瘤標(biāo)志物檢測數(shù)據(jù)。另根據(jù)臨床特征匹配同期200 例本院健康體檢者作為對照組。其中，男性128例，女性72例；年齡35～86 歲，平均（62.83±11.57）歲。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

分別抽取實(shí)驗(yàn)組和對照組患者晨起空腹外周靜脈血4～5 ml，室溫靜置30 min，3 000 r/min 離心15 min，分離上層血清，于1 h 內(nèi)檢測。應(yīng)用德國羅氏公司的601 型全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀和配套試劑盒，采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法分別檢測GSTP1、CYFRA21-1 水平。應(yīng)用美國伯樂公司的酶標(biāo)儀和法國CIS 國際生物公司生產(chǎn)的試劑盒對GSTP1、CYFRA21-1 進(jìn)行生物素標(biāo)記。將生物素標(biāo)記的GSTP1、CYFRA21-1 分別與待測的各組血清樣本共同孵育，再與親和素標(biāo)記的磁微粒共同孵育，用蠕動(dòng)泵將反應(yīng)液吸入流動(dòng)室，磁微粒由磁鐵吸附到電極表面，加入三丙胺，電機(jī)加電壓，啟動(dòng)電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，由光電倍增管測量光的強(qiáng)度，光強(qiáng)度與濃度呈線性關(guān)系，即可算出各組血清樣本中GSTP1、CYFRA21-1 水平。采用ELISA 法檢測SCC-Ag 水平。使用抗SCC-Ag 單克隆抗體包被反應(yīng)板，分別加入各組待測血清樣本反應(yīng)，再加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗SCC-Ag 單克隆抗體，如血清中存在SCC-Ag，則會(huì)形成復(fù)合物，加入顯色劑發(fā)生顯色反應(yīng)。上述所有操作按照相應(yīng)試劑盒說明書進(jìn)行。3 種腫瘤標(biāo)志物的正常值分別為：GSTP1 ≤10 ng/ml、CYFRA21-1 ≤4 ng/ml、SCC-Ag ≤1.5 ng/ml[7]。

1.3 預(yù)后評估

對所有患者隨訪1年，記錄隨訪期間患者的生存時(shí)間。將患者分為生存時(shí)間＜1年和生存時(shí)間≥1年，分析GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平與患者生存時(shí)間的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較用t檢驗(yàn)或方差分析，進(jìn)一步兩兩比較用LSD-t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較用χ2檢驗(yàn)；繪制ROC 曲線，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清腫瘤標(biāo)志物比較

兩組血清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），實(shí)驗(yàn)組高于對照組。見表1。

2.2 患者臨床病理特征與血清GSTP1、CYFRA21-1、SCC-Ag 水平的關(guān)系

不同性別、年齡及是否吸煙患者的血清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。不同病理類型患者GSTP1水平比較，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），肺腺癌患者血清GSTP1 水平高于肺鱗癌、肺腺鱗癌和大細(xì)胞肺癌患者（P＜0.05），大細(xì)胞肺癌患者和肺腺鱗癌患者血清GSTP1 水平高于肺鱗癌患者（P＜0.05）。不同病理類型患者CYFRA21-1和SCC-Ag 水平比較，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；肺鱗癌患者血清CYFRA21-1和SCC-Ag 水平高于肺腺癌、肺腺鱗癌和大細(xì)胞肺癌患者（P＜0.05），肺腺鱗癌患者血清CYFRA21-1 和SCC-Ag 水平高于大細(xì)胞肺癌和肺腺癌患者（P＜0.05），大細(xì)胞肺癌患者血清CYFRA21-1 和SCC-Ag 水平與肺腺癌患者相近（P＞0.05）。不同臨床分期患者血清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平比較，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），Ⅰ、Ⅱ期患者血清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平低于Ⅲ、Ⅳ期患者（P＜0.05），Ⅲ期患者血清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平低于Ⅳ期患者（P＜0.05），血清腫瘤標(biāo)志物水平隨分期升高逐漸上升。見表2。

表1 兩組血清腫瘤標(biāo)志物比較 （ng/ml，±s）

表1 兩組血清腫瘤標(biāo)志物比較 （ng/ml，±s）

組別 n GSTP1 CYFRA21-1 SCC-Ag實(shí)驗(yàn)組 600 38.64±17.53 8.07±3.26 4.24±2.16對照組 200 3.58±1.41 1.49±0.35 0.82±0.58 t 值 28.242 28.478 22.119 P 值 0.000 0.000 0.000

表2 患者臨床病理特征與血清GSTP1、CYFRA21-1、SCC-Ag 水平的關(guān)系 （ng/ml，±s）

表2 患者臨床病理特征與血清GSTP1、CYFRA21-1、SCC-Ag 水平的關(guān)系 （ng/ml，±s）

臨床病理特征 n GSTP1 t/F 值 P 值 CYFRA21-1 t/F 值 P 值 SCC-Ag t/F 值 P 值性別男397 39.12±14.31 1.200 0.115 8.13±1.53 1.479 0.070 4.18±1.25 1.578 0.088女203 37.70±12.45 7.95±1.14 4.36±1.23年齡＜60 歲 226 38.18±11.26 0.738 0.231 7.90±2.27 1.379 0.084 4.06±1.99 1.623 0.053≥60 歲 374 38.92±12.53 8.17±2.41 4.35±2.32吸煙是293 38.85±12.15 0.379 0.353 8.12±1.19 0.980 0.164 4.22±1.18 0.393 0.347否307 38.44±14.24 8.02±1.27 4.26±1.31病理類型肺腺癌 441 45.36±8.07 6.27±2.82 3.15±2.04肺鱗癌 107 18.42±6.24 15.01±3.26 8.60±2.72肺腺鱗癌 37 23.11±7.18 10.22±3.73 5.09±1.76大細(xì)胞肺癌 15 23.62±7.04 6.18±2.03 3.06±1.14臨床分期Ⅰ期 36 5.81±2.15 15.088 0.000 11.573 0.000 2.14±2.67 1.42±1.56Ⅱ期 127 16.82±4.73 3.75±2.64 1.94±1.83Ⅲ期 224 41.53±10.65 8.31±3.32 4.47±2.01 17.237 0.000 14.228 0.000 8.921 0.000 13.560 0.000Ⅳ期 213 54.16±16.39 11.49±5.92 5.84±2.28

2.3 血清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 與患者生存時(shí)間的關(guān)系

生存時(shí)間＜1年與≥1年患者的血清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），生存時(shí)間＜1年患者GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平較高。見表3。

表3 血清GSTP1、CYFRA21-1、SCC-Ag 水平與患者生存時(shí)間的關(guān)系 （ng/ml，±s）

表3 血清GSTP1、CYFRA21-1、SCC-Ag 水平與患者生存時(shí)間的關(guān)系 （ng/ml，±s）

指標(biāo) 生存時(shí)間＜1年 生存時(shí)間≥1年 t 值 P 值GSTP1 57.39±21.05 22.45±13.28 23.876 0.000 CYFRA21-1 13.31±5.26 3.55±2.13 28.956 0.000 SCC-Ag 6.02±2.92 2.70±0.46 18.757 0.000

2.4 GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 預(yù)測NSCLC 患者1年內(nèi)死亡的ROC 曲線

ROC 曲線結(jié)果顯示，GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 預(yù)測NSCLC 患者1年內(nèi)死亡的AUC 分別為0.573（P=0.378），0.591（P=0.279） 和0.653（P=0.069），但3 者聯(lián)合預(yù)測1年內(nèi)死亡的AUC 為0.668（P=0.045），其敏感性為93.92%（95% CI：0.817，0.980），特異性為50.00%（95% CI：0.424，0.609）。見圖1。

圖1 血清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 預(yù)測NSCLC 患者1年內(nèi)死亡的ROC 曲線

3 討論

NSCLC 的早期癥狀較為隱匿，導(dǎo)致早期臨床檢出率較低，多數(shù)患者就診時(shí)已處中晚期，5年存活率較低[8]。近年來，盡管NSCLC 的臨床治療規(guī)范己逐步完善，也開始出現(xiàn)新的靶向藥物，但缺少敏感靶點(diǎn)的NSCLC 患者總體療效并不理想，一般預(yù)后較差[9-10]。

腫瘤標(biāo)志物是指特具有征性、高表達(dá)于惡性腫瘤細(xì)胞、由惡性腫瘤細(xì)胞異常產(chǎn)生的物質(zhì)或是宿主對腫瘤的刺激反應(yīng)而產(chǎn)生的物質(zhì)，能反映腫瘤發(fā)生、發(fā)展，監(jiān)測腫瘤對治療的反應(yīng)[11]。GSTP1 是GST 家族成員之一，在大腸癌、胃癌、乳腺癌、喉癌、卵巢癌及肺癌等腫瘤組織中表達(dá)異常，是一種常見的腫瘤相關(guān)因子，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及抗藥性關(guān)系密切[12-13]。CYFRA21-1 是CYK-19 的可溶性片段，當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，CYK-19 釋放增加，經(jīng)蛋白酶降解后，大量細(xì)胞角蛋白片段釋放入血液，導(dǎo)致血清CYFRA21-1 水平升高[14]。目前，CYFRA21-1 被認(rèn)為是主要用于檢測肺癌的腫瘤標(biāo)志物，其水平顯著升高提示腫瘤為晚期或預(yù)后差，但其水平正?；蜉p微升高，并不能排除腫瘤的存在[15]。最近有學(xué)者提出，血清CYFRA21-1水平的升高早于臨床癥狀和影像學(xué)表現(xiàn)[16]。SCC-Ag對宮頸鱗癌、肺鱗癌、頭頸部鱗癌等鱗狀上皮細(xì)胞癌的治療監(jiān)測和復(fù)發(fā)監(jiān)測有重要臨床意義[17-18]。有研究顯示，在腫瘤臨床診斷、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移癥狀和體征出現(xiàn)前7 個(gè)月即出現(xiàn)SCC-Ag 升高[19]。另有研究顯示，SCCAg 聯(lián)合GSTP1 對診斷有互補(bǔ)作用，但不能作為肺腺癌與肺鱗癌的鑒別診斷依據(jù)[20]。

本研究結(jié)果顯示，肺腺癌患者血清GSTP1 水平明顯高于肺鱗癌和肺腺鱗癌患者，肺鱗癌患者血清CYFRA21-1 和SCC-Ag 水平高于肺腺癌和肺腺鱗癌患 者；血 清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水 平隨臨床分期升高而升高。本研究結(jié)果表明，GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平與患者生存時(shí)間有關(guān)，即GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平越高，患者生存時(shí)間≥1年的可能性越低。ROC 曲線結(jié)果顯示，GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 聯(lián)合檢測可以預(yù)測患者1年內(nèi)死亡可能性，提示聯(lián)合檢測腫瘤標(biāo)志物對NSCLC 的預(yù)后評估具有一定的應(yīng)用價(jià)值。然而，由于觀察時(shí)間所限，3 種腫瘤標(biāo)志物具體含量與患者生存時(shí)間的關(guān)系有待進(jìn)一步探討。

綜上所述，腫瘤標(biāo)志物GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 對NSCLC 的預(yù)后評估具有一定的應(yīng)用價(jià)值。