水產(chǎn)養(yǎng)殖動物病害檢測和藥敏試驗分析

2019 年筆者通過全市病害測報點進行水產(chǎn)養(yǎng)殖病害檢測及上報工作，針對發(fā)病樣品進行采樣檢測、病原菌株分離和鑒定，并將鑒定出的部分菌株用常用抗菌藥物開展了藥物敏感性試驗，旨在及時準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)、預(yù)防水產(chǎn)養(yǎng)殖病害，通過科學(xué)實驗數(shù)據(jù)分析為科學(xué)合理藥物使用提供指導(dǎo)依據(jù)，確保養(yǎng)殖水產(chǎn)品質(zhì)量安全。

一、病害檢測總體情況

2019 年常熟市池塘養(yǎng)殖面積共計9.68 萬畝，其中河蟹、青蝦養(yǎng)殖面積8.62萬畝，占比89%，常規(guī)魚養(yǎng)殖面積0.46 萬畝，占比5.3%，其他還包括南美白對蝦、澳洲淡水龍蝦、鱖魚等養(yǎng)殖品種。全市共設(shè)立10 個水生動物病害測報點，總測報面積4 744畝，檢測品種包括河蟹、青蝦、青魚、鳙魚、草魚、鯽魚、鱖魚、鱸魚、小龍蝦等，共檢測樣本58 個，其中寄生蟲病樣2 個、細菌性病害病樣36 個，由真菌、肝膽綜合征、水質(zhì)惡化等其他原因引起的病害樣本12個(其中多原因并發(fā)癥病樣6個)，具體情況見表1。

二、細菌性病原分離鑒定及藥敏試驗

1.試驗材料

(1)菌株來源：對全市10個病害測報點發(fā)病樣品進行致病菌分離，魚類分離部位為血液、心臟、腎臟、肝臟，蝦蟹類分離部位為心臟、肝臟、鰓絲、腸道，共計檢測發(fā)病樣品50 個，分離純化菌株42株。

(2)試驗藥品：營養(yǎng)瓊脂購于北京陸橋技術(shù)股份有限公司，腸桿菌和其他非苛養(yǎng)革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒(英文名API 20E)、非苛養(yǎng)非腸道革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒(英文名API 20NE)購于梅里埃診斷產(chǎn)品(上海嘉合)有限公司。動物用藥敏分析試劑板購于南京菲恩醫(yī)療科技有限公司。

2.試驗方法

細菌分離鑒定和藥物敏感性試驗在市水產(chǎn)站病害檢測無菌室進行，實驗操作遵循梅里埃API-20E和API-20NE試劑條鑒定及南京菲恩動物用藥敏分析試劑板操作規(guī)程。將試驗菌株先進行細菌濃度配比，再按照產(chǎn)品說明書進行操作和結(jié)果判定。

3.試驗結(jié)果

(1)細菌鑒定結(jié)果：42 株菌株共計鑒定菌株13 種，蝦蟹分離出的病原微生物主要有嗜水氣單胞菌、殺鮭氣單胞菌、淺黃假單胞菌、美洲愛文菌、陰溝腸桿菌，魚類分離出的病原微生物主要有嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、溶藻弧菌等。

(2)藥敏試驗結(jié)果：對已鑒定的10株病原微生物用8 個品種的藥物進行敏感性試驗，8 種藥物分別是恩諾沙星、硫酸新霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、鹽酸多西環(huán)素、氟甲喹、磺胺間甲氧嘧啶鈉、磺胺甲噁唑＋甲氧芐啶，得出8種藥物對不同致病菌的最低抑制濃度(MIC)，具體結(jié)果見表2。

三、討論與分析

2019 年試驗分離到的細菌菌株共計42 株，13 種，其中溫和氣單胞菌和嗜水氣單胞菌占比最高，分別為37.8%和16.2%。溫和氣單胞菌和嗜水氣單胞菌是水生動物常見致病菌，在魚類中最為常見。3月在草魚、鯽魚、鳙魚等發(fā)病魚體內(nèi)檢出比例較高，6月開始在病蝦、病蟹體內(nèi)檢出，導(dǎo)致水生動物外部感染出現(xiàn)腫脹、腐爛，內(nèi)部引起腸炎、細菌性敗血癥，造成較多死亡。

表1 水產(chǎn)養(yǎng)殖動物病害檢測情況匯總

表2 水產(chǎn)養(yǎng)殖動物細菌性藥物敏感性檢測結(jié)果統(tǒng)計

藥敏試驗結(jié)果表明，目前本地區(qū)抑菌效果最好的藥物是恩諾沙星，對所有試驗菌株均具有較好的抑制效果，硫酸新霉素也具有廣泛的抑制效果，鹽酸多西環(huán)素、氟苯尼考粉、甲砜霉素、磺胺間甲氧嘧啶鈉、磺胺甲噁唑＋甲氧芐啶對大部分細菌抑制效果較好，氟甲喹抑制效果較差。

病害防控要堅持“以防為主、防治結(jié)合”，在養(yǎng)殖前期應(yīng)做好干塘清淤清塘工作，養(yǎng)殖過程中及時進行殺蟲消毒，定期調(diào)水改底，減少有害病原微生物的生長；同時注意投喂高質(zhì)量餌料，定期拌服復(fù)合維生素等增強體質(zhì)，減少病害發(fā)生。對于出現(xiàn)患病的養(yǎng)殖池塘不可盲目濫用藥物，建議在有條件的地方從患病水產(chǎn)品體中分離致病菌，在完成藥物敏感性檢測的基礎(chǔ)上選擇合適的藥物，定量拌飼料投喂，與此同時進行池塘消毒。有條件的地區(qū)應(yīng)著力建立正確的合理用藥機制，指導(dǎo)養(yǎng)殖戶合理選擇抗菌藥物的種類和適宜的使用濃度，從而減少養(yǎng)殖用藥、降低生產(chǎn)損失，確保養(yǎng)殖水產(chǎn)品的質(zhì)量安全。