徐青松 徐勁松 駢躍斌 楊杰 劉晶
摘要 ? ?隨著食用菌產(chǎn)業(yè)的迅猛發(fā)展,食用菌技術(shù)不斷更新,香菇液體菌種栽培也逐漸被菇農(nóng)認(rèn)識,并逐步推廣。香菇液體菌種具有制種快、活力強(qiáng)、純度高、周期短、污染率低、風(fēng)險(xiǎn)率低等優(yōu)點(diǎn)。本文介紹了香菇液體菌種在生產(chǎn)上的應(yīng)用,并總結(jié)了其優(yōu)勢,以期為液體菌種的應(yīng)用提供參考。
關(guān)鍵詞 ? ?香菇;液體菌種;優(yōu)勢;應(yīng)用
中圖分類號 ? ?S646.12 ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼 ? ?A
文章編號 ? 1007-5739(2020)16-0062-02
隨著人們生活水平的提高,我國食用菌產(chǎn)業(yè)迅猛發(fā)展,食用菌栽培技術(shù)推陳出新,食用菌液體菌種也逐步被使用和推廣。液體菌種是指在液體培養(yǎng)基中接入菌種,經(jīng)過高溫、振蕩,使菌絲體在液體培養(yǎng)基內(nèi)產(chǎn)生,并且在短時(shí)間內(nèi)大量生長、繁殖,可直接使用的菌種。在工業(yè)上,這種方法稱之為“深層培養(yǎng)”或“深層發(fā)酵”。早在1960年上海植物生理研究所孫美聿等人就液體菌種發(fā)酵進(jìn)行了研究;1979年上海師范學(xué)院楊慶堯教授開展了香菇、金針菇液體菌種栽培試驗(yàn)研究。20世紀(jì)80年代以來,大量研究人員對食用菌深度發(fā)酵、液體菌種、發(fā)酵設(shè)備進(jìn)行了深入研究,有利于液體菌種的廣泛推廣。但我國食用菌液體菌種栽培技術(shù)因受傳統(tǒng)栽培技術(shù)的影響,一度受阻。放眼國外,早在20世紀(jì)中期,微生物技術(shù)廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、食品方面,從而推動(dòng)了液體菌種在食用菌上的應(yīng)用發(fā)展。1948年美國科學(xué)家Homfeld等人成功地將液體菌種應(yīng)用在蘑菇的栽培上,從此食用菌液體菌種栽培與研究進(jìn)入了新時(shí)代,歐美等國也在20世紀(jì)50—60年代提前步入了液體菌種栽培食用菌時(shí)代,并逐步廣泛進(jìn)行工廠化栽培。近些年,隨著食用菌需求量的擴(kuò)大,食用菌技術(shù)的發(fā)展也逐漸加快,產(chǎn)業(yè)鏈、工廠化、液體菌種形式多樣的生產(chǎn)方式層出不窮,便捷高效的生產(chǎn)方式符合當(dāng)前的生產(chǎn)需要。
通過走訪調(diào)查,我國食用菌產(chǎn)業(yè)較分散,以小農(nóng)種植戶為主,而且大多以傳統(tǒng)栽培模式為主,對液體菌種栽培技術(shù)不能完全接受,相比西歐、美國、日本等國家工廠化栽培、液體發(fā)酵技術(shù)普遍使用形成鮮明的對比,所以探索適合我國國情的液體菌種發(fā)展之路是當(dāng)務(wù)之急。
在北方除了傳統(tǒng)小麥、玉米、雜糧之外,種植食用菌也是農(nóng)民致富的一項(xiàng)保障。傳統(tǒng)的食用菌種植方法具有一定的局限性,影響其發(fā)展,液體菌種栽培方法可以彌補(bǔ)其不足。香菇是北方最常見的菇種,也是人們最喜愛的蔬菜,為此,本文以香菇液體菌種為例來進(jìn)行闡述研究。
1 ? ?液體菌種的應(yīng)用
1.1 ? ?菌種選擇
選擇品種優(yōu)良、適合香菇液體培養(yǎng)的菌種作為母種。在無菌室內(nèi)用接種鏟從香菇母種上切取0.5 m2的菌塊放到斜面培養(yǎng)基上,25 ℃條件下培養(yǎng)12 d,挑選潔白、無污染菌絲、健壯且生產(chǎn)均勻的菌種。
1.2 ? ?種子液的制作(發(fā)酵制作)
取500 mL的三角瓶,裝250 mL的培養(yǎng)液在高溫100~120 ℃環(huán)境下滅菌30 min,冷卻后備用。選上述長勢健壯、質(zhì)量好的斜面菌種,在無菌室內(nèi)切取0.5 m2的菌塊3~4塊接入三角瓶中,再用2層封口貼封口,置于120 r/min的搖床上振蕩10 d,培養(yǎng)液澄清、無異味,三角瓶內(nèi)會產(chǎn)生大量直徑在2 cm大小、均勻的菌絲球,即可作為菌種接種生長。如果要大面積生產(chǎn),就要準(zhǔn)備大容量(如500 L)的液體發(fā)酵罐用于制作種子液,主要用玉米面和黃豆面作為種子培養(yǎng)液的主要原料。
1.3 ? ?菌袋選擇
選用普通香菇料袋(通常為寬20 cm、長50 cm的5絲聚乙烯或聚丙烯折袋),采用裝袋機(jī)裝袋,采用窩口封口,插棒占菌袋長度的2/3。窩口插棒也可以采用插棒機(jī)實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化,省時(shí)省力減少誤差。
1.4 ? ?滅菌方法
香菇料袋在120~130 ℃的高溫條件下下滅菌3 h,或在100 ℃常壓條件下滅菌8~10 h。滅菌完成后需搬運(yùn)到無菌環(huán)境中,待冷卻至25 ℃時(shí)開始接種[1]。如果達(dá)不到無菌環(huán)境,接種前需要用石灰或消毒霧器進(jìn)行消毒,以免菌袋發(fā)生次生污染。
1.5 ? ?接種
接種前,應(yīng)使用臭氧滅菌器對接種室進(jìn)行有效處理,然后提前30 min將紫外線燈、接種線風(fēng)機(jī)打開,嚴(yán)格遵照無菌原則進(jìn)行接種。接種后借助滾軸將菌包運(yùn)輸?shù)浇臃N室外,再運(yùn)到培養(yǎng)室。不具備工廠化、大批量生產(chǎn)條件的,可在接種室進(jìn)行接種,須進(jìn)行臭氧滅菌,并購買負(fù)離子風(fēng)機(jī),創(chuàng)造無菌環(huán)境,防止污染。
如果一次接10 000包需要500 L菌種,還需配置500 mL三角瓶容器以及小型高壓鍋,在無菌超凈工作臺或無菌室進(jìn)行接種。
1.6 ? ?接種后管理
1.6.1 ? ?溫濕度管理。料袋培養(yǎng)環(huán)境在20~25 ℃,料袋溫度在23~26 ℃之間,空氣濕度60%~70%,遮光培養(yǎng)。料袋中培養(yǎng)料含水量以70%~90%為宜。
1.6.2 ? ?出菇管理。菌袋采用立式栽培法,把有孔的一頭朝上,這樣有利于補(bǔ)水時(shí)存水,管理與固體接種方法一致。
2 ? ?液體菌種的優(yōu)勢
2.1 ? ?制種快
對于液體菌種而言,其培養(yǎng)罐中菌體細(xì)胞在酸堿度、溫度、氧氣、碳氮比較佳的狀態(tài)下生長,菌絲能夠以最快的速度分裂,并滋生出大規(guī)模的菌絲球[2]。液體菌種培養(yǎng)菌體細(xì)胞繁殖速率是固態(tài)培養(yǎng)的5~7倍。
2.2 ? ?活力強(qiáng)