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      血清ASM與GPx水平檢測(cè)與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎膝關(guān)節(jié)病變的相關(guān)性研究

      2020-09-14 06:50:06馬飛艷
      關(guān)鍵詞:髕上期組活動(dòng)期

      王 娟,馬飛艷, 樊 萍

      (1.陜西省森工醫(yī)院檢驗(yàn)科,西安 710300; 2.咸陽市婦幼保健院檢驗(yàn)科,陜西咸陽 712000;3.咸陽市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,陜西咸陽 712000)

      類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA) 是一種以關(guān)節(jié)滑囊組織增生及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)為特征的慢性自身免疫性疾病。研究發(fā)現(xiàn),RA 病因比較復(fù)雜,如果早期診斷治療能緩解病情,降低致殘率[1]。近年來的研究表明,酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase,ASM)和谷胱甘肽過氧化酶(glutathione peroxidase,GPx)可能與RA 的發(fā)生發(fā)展有關(guān)[2-3]。本研究通過分析58 例RA 膝關(guān)節(jié)病變患者血清ASM 和GPx 水平的變化,旨在評(píng)價(jià)兩指標(biāo)在RA 中的應(yīng)用價(jià)值,并為RA 的診斷和治療提供依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1 研究對(duì)象 選擇2016年3月~2019年3月于咸陽市第一人民醫(yī)院、陜西省森工醫(yī)院和咸陽市婦幼保健院就診的58 例RA 膝關(guān)節(jié)病變患者作為研究對(duì)象。RA 確診均符合2010年中國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)修定的RA 診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。依據(jù)疾病活動(dòng)評(píng)分28 (disease activity score 28,DAS28)將RA 患者分為緩解期組和活動(dòng)期組。緩解期組納入25 例患者,男性8 例,女性17 例,平均年齡53.50±12.47 歲?;顒?dòng)期組納入33 例患者,男性11 例,女性22 例,平均年齡54.12±11.67 歲。排除標(biāo)準(zhǔn):并發(fā)關(guān)節(jié)退行性病變、糖尿病、血友病、白血病及銀屑病等其他可引起關(guān)節(jié)病變的自身免疫性疾病患者。選擇30 例同期體檢健康者作為對(duì)照組,男性10 例,女性20 例,平均年齡52.33±11.39 歲。各組研究對(duì)象的年齡及性別比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)咸陽市第一人民醫(yī)院、陜西省森工醫(yī)院和咸陽市婦幼保健院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn),并得到所有研究對(duì)象的知情同意。

      1.2 試劑與儀器 ASM 試劑盒購(gòu)于上海北滬生物科技有限公司,GPx 試劑由北京方程生物科技有限公司提供,抗環(huán)瓜氨酸抗體(anti-cyclic peptidecontaining citrulline,Anti-CCP)試劑由上海美康生物股份有限公司提供。類風(fēng)濕因子(rheumatoid factor,RF)試劑由廣州科方生物技術(shù)股份有限公司提供。RF 與Anti-CCP 水平采用日立7600 全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè),膝關(guān)節(jié)超聲檢查采用飛利浦IU22 型彩色多普勒超聲診斷儀,探頭頻率為12~18 MHz。

      1.3 方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清ASM和GPx 水平,Anti-CCP 與RF 水平檢測(cè)采用乳膠增強(qiáng)免疫比濁法。應(yīng)用超聲檢查評(píng)價(jià)RA 患者膝關(guān)節(jié)的病理變化,陽性判斷標(biāo)準(zhǔn):Anti-CCP>45 U/ml, RF>15 IU/ml。

      1.3.1 標(biāo)本采集:所有研究對(duì)象于清晨空腹?fàn)顟B(tài)被抽取靜脈血5ml,室溫靜置30min 后3 000r/min 離心10min,分離血清,于-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

      1.3.2 超聲檢查:檢查者取仰臥位,屈膝,充分暴露膝關(guān)節(jié)。應(yīng)用超聲診斷儀在肌肉骨骼模式下測(cè)量髕上囊滑膜厚度和髕上囊積液深度。

      1.3.3 DAS28 評(píng)分[5]: 以28 個(gè)關(guān)節(jié)的疾病活動(dòng)狀況進(jìn)行計(jì)分,包括雙手掌指關(guān)節(jié)(10 個(gè)),雙手近端指間關(guān)節(jié)(10 個(gè)),雙腕關(guān)節(jié)(2 個(gè)),雙肘關(guān)節(jié)(2個(gè)),雙肩關(guān)節(jié)(2 個(gè)),雙膝關(guān)節(jié)(2 個(gè))。依據(jù)壓痛關(guān)節(jié)數(shù)、腫脹關(guān)節(jié)數(shù)及紅細(xì)胞沉降率計(jì)算DAS28評(píng)分。DAS28 ≤2.6 分的患者被納入緩解期組,DAS28>2.6 分的患者被納入活動(dòng)期組。

      1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 研究資料采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。所有資料均呈正態(tài)分布。ASM,GPx,Anti-CCP 和RF 水平以及年齡、髕上囊滑膜厚度和髕上囊積液深度的組間比較采用單因素方差分析。以上資料多組間的兩兩比較采用SNK-q 檢驗(yàn)分析,性別的組間比較采用卡方檢驗(yàn),相關(guān)性分析采用Pearson 法。P < 0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

      2 結(jié)果

      2.1 RA 患者血清RF 和Anti-CCP 水平分析 見表1。緩解期組和活動(dòng)期組的RF 和Anti-CCP 水平與對(duì)照組比較明顯增高,活動(dòng)期組的RF 和Anti-CCP水平與緩解期組比較明顯增高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

      2.2 RA 患者超聲檢查分析 見表2。緩解期組和活動(dòng)期組的髕上囊滑膜厚度和髕上囊積液深度與對(duì)照組比較明顯增高,活動(dòng)期組的髕上囊滑膜厚度和髕上囊積液深度與緩解期組比較明顯增高,差異均 有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

      表1 RA 患者血清RF,Anti-CCP 水平 (±s)

      表1 RA 患者血清RF,Anti-CCP 水平 (±s)

      檢測(cè)指標(biāo) 對(duì)照組(n=30) 緩解期組(n=25) 活動(dòng)期組(n=33) F P RF(IU/ml) 6.39±2.16 48.23±5.37 113.89±13.56 64.33 0.000 Anti-CCP(U/ml) 12.23±2.73 83.58±16.72 154.63±27.91 53.21 0.000

      表2 RA 患者超聲檢查分析(±s,cm)

      表2 RA 患者超聲檢查分析(±s,cm)

      檢測(cè)指標(biāo) 對(duì)照組(n=30) 緩解期組(n=25) 活動(dòng)期組(n=33) F P髕上囊滑膜厚度 0.11±0.02 0.30±0.07 0.53±0.13 99.15 0.000髕上囊積液深度 0.21±0.03 0.42±0.08 0.65±0.11 85.23 0.000

      2.3 RA 患者血清ASM 和GPx 水平分析 見表3。緩解期組和活動(dòng)期組的GPx 水平與對(duì)照組比較顯著降低,活動(dòng)期組的GPx 水平與緩解期組比較顯著降低,緩解期組和活動(dòng)期組的ASM 水平與對(duì)照組比較顯著增高,活動(dòng)期組ASM 水平與緩解期組比較顯著增高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

      表3 RA 患者血清ASM 和GPx 水平分析(±s)

      表3 RA 患者血清ASM 和GPx 水平分析(±s)

      檢測(cè)指標(biāo) 對(duì)照組(n=30) 緩解期組(n=25) 活動(dòng)期組(n=33) F P ASM(nmol/L) 21.35±6.61 72.30±13.49 123.67±19.26 79.15 0.000 GPx(U/mL) 93.26±13.07 65.13±11.29 41.07±8.65 68.23 0.000

      2.4 Pearson 線性相關(guān)分析 緩解期組和活動(dòng)期組的GPx 水平分別與RF,Anti-CCP 水平、髕上囊滑膜厚度及髕上囊積液深度呈負(fù)相關(guān)性(r緩解期組=?0.832,?0.829,?0.813,?0.809,均P<0.01;r活動(dòng)期組=?0.851,?0.836,?0.827,?0.815, 均P<0.01)。緩解期組和活動(dòng)期組的ASM 水平分別與RF 和Anti-CCP 水平、髕上囊滑膜厚度及髕上囊積液深度有正相關(guān)性(r緩解期組=0.820,0.811,0.789,0.793,均P <0.0 1),(r活動(dòng)期組= 0.837,0.825,0.807,0.817,均P<0.01)。

      3 討論

      研究發(fā)現(xiàn),RA 的發(fā)病機(jī)制可能與機(jī)體的氧化應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)。抗氧化能力減弱,會(huì)造成機(jī)體產(chǎn)生過量的氧自由基,進(jìn)而破壞軟骨細(xì)胞,導(dǎo)致滑膜與骨質(zhì)受損[3]。相關(guān)研究表明高頻超聲檢查能夠反映RA 患者關(guān)節(jié)的病理變化[6]。本研究結(jié)果顯示RA患者膝關(guān)節(jié)髕上囊滑膜厚度及髕上囊積液深度明顯高于對(duì)照組,其中活動(dòng)期組增高更顯著。進(jìn)一步的分析顯示RA 患者血清RF 和Anti-CCP 水平的變化趨勢(shì)與超聲檢查的結(jié)果相符。提示超聲檢查兩參數(shù)及RF,Anti-CCP 可作為RA 患者病情監(jiān)測(cè)的常用指標(biāo)。研究表明,GPx 可清除人體內(nèi)過多的氧自由基。GPx 水平增高,會(huì)導(dǎo)致機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)增強(qiáng)[7]。ZHAO 等[3]建立小鼠RA 模型研究GPx 與RA 的相關(guān)性,研究顯示,小鼠血清GPx 水平顯著降低。應(yīng)用鵝絨堿加氨基葡萄糖治療后血清GPx 水平明顯增高。DATALAY 等[8]的研究顯示RA 患者血液中性粒細(xì)胞中GPx 的活性明顯降低。應(yīng)用甲氨蝶呤治療后GPx 水平明顯增高。本研究的分析結(jié)果顯示,GPx 水平與RF,Anti-CCP 水平、髕上囊滑膜厚度和髕上囊積液深度呈負(fù)相關(guān)性。提示GPx 可能與RA 的病情進(jìn)展有關(guān)。進(jìn)一步研究顯示,RA 患者血清GPx 水平明顯降低,其中活動(dòng)期組降低更顯著。提示GPx 可能與RA 的病理過程有關(guān),且GPx 水平越低,RA 患者的疾病活動(dòng)性越嚴(yán)重。

      相關(guān)研究顯示,在小鼠單核巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)的炎性反應(yīng)中,ASM 的蛋白表達(dá)明顯增高。然而,在給予ASM 的抑制劑丙咪嗪治療后,ASM 的蛋白表達(dá)被顯著抑制[9]。BECKMANN 等[10]對(duì)小鼠關(guān)節(jié)炎實(shí)驗(yàn)?zāi)P偷难芯匡@示,抑制ASM 活性可減輕關(guān)節(jié)腫脹,降低關(guān)節(jié)腔內(nèi)促炎細(xì)胞因子的水平。CHUNG 等[2]研究發(fā)現(xiàn),RA 患者血清ASM 的活性顯著增高,接受特異性腫瘤壞死因子-α 阻斷治療后,患者血清ASM 活性顯著降低。提示ASM可能通過促進(jìn)機(jī)體的炎性反應(yīng)參與RA 的病理過程。本研究結(jié)果顯示RA 患者血清ASM 水平分別與RF,Anti-CCP 水平、髕上囊滑膜厚度和髕上囊積液深度呈正相關(guān)性。進(jìn)一步研究顯示RA 患者血清ASM 水平明顯增高,其中活動(dòng)期組增高更顯著。表明ASM 可能與RA 的病變進(jìn)展有關(guān),ASM 水平增高對(duì)RA 的病變進(jìn)展有促進(jìn)作用。

      綜上所述,ASM 和GPx 與RA 的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。檢測(cè)血清ASM 和GPx 水平可評(píng)價(jià)RA 的病情進(jìn)展并為RA 的診治提供依據(jù)。

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