液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定河豚毒素標(biāo)準(zhǔn)品

李春青　付志茹　高麗娜　時(shí)文博　陳永平

摘 要：河鲀毒素（TTX）是河鲀魚類體內(nèi)合成的一種有毒的生物堿，是目前人類發(fā)現(xiàn)的自然界中毒性最大的神經(jīng)毒素之一。本文在3家公司的質(zhì)譜儀上分別建立了測(cè)定河豚毒素標(biāo)準(zhǔn)品的儀器方法，可為用不同公司生產(chǎn)的儀器測(cè)定河豚毒素提供參考。

關(guān)鍵詞：河豚毒素;液質(zhì)聯(lián)用;TTX;參數(shù);檢測(cè)

河鲀毒素（TTX）是鲀魚等魚類體內(nèi)的一種有神經(jīng)毒性的生物堿。河鲀毒素?zé)岱€(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性都很好，一般的腌漬、日曬和烹飪都不能破壞其化學(xué)結(jié)構(gòu)。目前，諸多檢測(cè)機(jī)構(gòu)開展了對(duì)河豚毒素的檢測(cè)工作[1]。然而，各個(gè)儀器廠商生產(chǎn)的儀器在質(zhì)譜參數(shù)方面有一定差別，使得某些檢測(cè)方法通用性不強(qiáng)，需要重新優(yōu)化質(zhì)譜參數(shù)。本文在3個(gè)不同品牌的液質(zhì)上分別建立了測(cè)定河豚毒素標(biāo)準(zhǔn)品的儀器方法，希望可為檢測(cè)人員提供參考。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 質(zhì)譜儀

AB Sciex 4000質(zhì)譜、Thermo TSQ質(zhì)譜、Waters Premier XE質(zhì)譜。

1.2 液相色譜條件

①色譜柱：島津Shim-pack C8色譜柱，75 mm×2.0 mm，2.2 ?m;②進(jìn)樣量：2 ?L;③柱溫：40 ℃;④流動(dòng)相：A.2 mmol/L醋酸銨溶液;B.乙腈;梯度洗脫程序見表1[2]。

1.3 AB 4000質(zhì)譜條件

①離子化模式：大氣壓電噴霧離子源（ESI），正離子模式;②噴霧電壓IS：5 500 V;③加熱溫度TEM：400 ℃;④霧化氣GS1：55 psi;⑤輔助加熱氣GS2：55 psi;⑥去簇電壓DP：100 V;⑦射入電壓EP：10.8 V;⑧碰撞室射出電壓CXP：6.9 V;⑨掃描模式：選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM），母離子、子離子和碰撞能量見表2。

1.4 Thermo TSQ質(zhì)譜條件

①離子源：電噴霧源（ESI）;②掃描模式：正離子掃描;③噴霧電壓（Spray voltage）：4 800 V;④鞘氣流量（Shealth gas pressure）：12 L/min;⑤輔助氣流量（Aux valve flow）：2 L/min;⑥離子傳輸管溫度（Capillary temperature）：350 ℃;⑦源內(nèi)碰撞誘導(dǎo)解離電壓（Source CID）：10 V;⑧掃描模式：選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式，母離子、子離子和碰撞能量見表2;⑨碰撞氣壓力：氬氣，1.5 mTorr。

1.5 Waters Premier XE質(zhì)譜條件

①電噴霧離子源，正離子掃描（ESI+）;②檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）;③毛細(xì)管電壓：3 000 V;④離子源溫度：110 ℃;⑤脫溶劑氣溫度：350 ℃;⑥錐孔氣流量：50 L/h;⑦脫溶劑氣流量：600 L/h;⑧錐孔電壓、碰撞能量、分析物母離子及子離子等條件如表2所示。

1.6 河豚毒素標(biāo)準(zhǔn)曲線

3臺(tái)儀器在標(biāo)準(zhǔn)品濃度為10～120 ng/ml條件下，測(cè)得的標(biāo)準(zhǔn)曲線如表3所示。由相關(guān)系數(shù)可知，該上述儀器條件滿足實(shí)驗(yàn)所需。

2 比較與討論

采取高溫高電壓的方式進(jìn)行離子化。各個(gè)儀器參數(shù)的區(qū)別主要體現(xiàn)在各種輔助氣體和電壓的名稱及數(shù)值上。這就使得某些方法或文獻(xiàn)中的儀器參數(shù)通用性不強(qiáng)。希望本文所做工作可為檢測(cè)人員提供一定參考。

參考文獻(xiàn)

[1]孫博倫，王旭峰，李來(lái)好，等.多壁碳納米管固相萃取-超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定織紋螺中河豚毒素[J].南方水產(chǎn)科學(xué)，2018，14（5）：103-108.

[2]中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì).GB 5009.206-2016水產(chǎn)品中河豚毒素的測(cè)定[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2016.

作者簡(jiǎn)介：李春青（1981—），男，天津人，本科，高級(jí)工程師。研究方向：獸藥殘留檢測(cè)和水產(chǎn)品質(zhì)量安全。