蒙藥阿給鎮(zhèn)痛作用的研究

薛焱 王同智

【摘 要】 目的：研究蒙藥阿給水提取物的鎮(zhèn)痛作用。方法： 將50只小鼠隨機(jī)分為5組，即模型對(duì)照組、阿司匹林組（0.04g/kg）、阿給水提取物高、中、低劑量組（生藥60.0、30.0、15.0g/kg），灌胃給藥1次/d，連續(xù)給藥7 d，采用乙酸扭體法記錄各組小鼠出現(xiàn)扭體反應(yīng)的潛伏期及15、 內(nèi)各小鼠扭體次數(shù);另取50只雌性小鼠，同法分組、給藥采用熱板法測(cè)定小鼠給藥前及給藥30、45、60、90 min后的痛閾值。結(jié)果：與模型組相比，阿給提取物可顯著減少小鼠15 min內(nèi)扭體次數(shù)，延長(zhǎng)給藥15、30、60和90 min后的小鼠痛閾值（P<0.05）。結(jié)論：阿給水提取物具有明顯的鎮(zhèn)痛作用。

【關(guān)鍵詞】 蒙藥;冷蒿;提取物;鎮(zhèn)痛

【中圖分類(lèi)號(hào)】R285.5 ? 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A ? ?【文章編號(hào)】1007-8517（2020）7-0020-03

Abstract：Objective To investigate the analgesic effects of mongolian medicine Agi water extract.Methods Fifty mice were randomly divided into model group（water），positive control group（aspirin，0.04 g/kg），high -dose，medium-dose and low-dose groups（60.0，30.0，15.0g / kg） of water extract from Artemisia frigida.They were given relevant medicine intragastrically，once a day，for consecutive 7 d.The latency of writhing response and the number of writhing in each group were recorded by acetic acid stretching experiment.The pain threshold of mice before administration and 15，30，60，90 min after administration was measured by hot plate method.Result Compared with the model group， Agi water extract decreased the number of writhing in mice within 15 min，and extended pain thresholds of mice 15，30，60，90 min after medication（P<0.05）.Conclusion Agi water extract had obvious analgesic effect.

Keywords：Mongolian Medicine;Artemisia Frigida;Extract;Analgesic Effects

蒙藥材阿給，即菊科蒿屬多年生小半灌木冷蒿（Artemisia frigida Willd.），又名小白蒿、菟毛蒿，在中國(guó)集中分布在內(nèi)蒙古[1]。阿給全草入蒙藥，味苦，性涼、澀、燥、有止血、祛風(fēng)、消腫的功效，主治各種出血、關(guān)節(jié)腫脹、腎熱、月經(jīng)不調(diào)、瘡癰[2]。冷蒿也可全草入中藥，主要治療治黃疸型肝炎、膽囊炎、小便不利、皮膚瘙癢、濕疹、蛔蟲(chóng)病和蟯蟲(chóng)病。然而，文獻(xiàn)中沒(méi)有記載阿給的鎮(zhèn)痛作用，其機(jī)制尚不清楚，為更科學(xué)地開(kāi)發(fā)冷蒿的藥用價(jià)值，本實(shí)驗(yàn)對(duì)阿給水提取濃縮后，得到阿給提取物，然后采用乙酸致小鼠扭體反應(yīng)和電熱板法急性疼痛模型對(duì)提取物進(jìn)行鎮(zhèn)痛作用的研究。

1 材料

1.1 試驗(yàn)藥物、試劑 蒙藥材阿給采自內(nèi)蒙古烏蘭察布市四子王旗（地理位置為41°52′39″N，111°07′25″E，海拔1370m）。地上部分采回后于室外曬干，室溫下貯藏備用。

阿司匹林片（石藥集團(tuán)歐意藥業(yè)有限公司，批號(hào)：017150275）。乙酸為分析純。

1.2 動(dòng)物 健康昆明種小白鼠，體重（18±2）g，由內(nèi)蒙古大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供，清潔級(jí)，許可證號(hào)：SCXK（蒙）2002-0001。

1.3 儀器 電子天平（精密科學(xué)儀器有限公司），智能熱板儀（成都泰盟軟件公司）。

2 試驗(yàn)方法

2.1 阿給提取物的制備 將冷蒿的地上部分粉碎成粗粉。稱取粗粉10.0g，置于250mL量瓶中，加入100mL蒸餾水，煎煮1.5h，共2次，趁熱抽濾并用蒸餾水清洗濾渣及容器2～3次，合并濾液，減壓濃縮至約5mL，用蒸餾水轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中并定容至刻度，得1∶ 1藥液，濃度為1g生藥/mL（即100g/kg）的阿給水提物供試品。

2.2 小鼠乙酸扭體實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)小鼠50只，隨機(jī)分為5組，分別為模型對(duì)照組、阿司匹林組（0.04g/kg）、阿給水提取物高、中、低劑量組（生藥60.0、30.0、15.0g/kg）。灌胃給藥1次/d，連續(xù)給藥7 d，末次給藥后30 min，腹腔注射0.6%冰乙酸溶液（現(xiàn)配現(xiàn)用）0.2 mL/只致痛，觀察并記錄各組小鼠出現(xiàn)扭體反應(yīng)的潛伏期及15 min 內(nèi)各小鼠扭體（扭體表現(xiàn)為腹部收縮內(nèi)凹，同時(shí)伴有軀干扭曲、臀部抬高和后肢伸展等特征）的次數(shù)，計(jì)算鎮(zhèn)痛率。

鎮(zhèn)痛率（%）=（模型組平均扭體次數(shù)-給藥組平均扭體次數(shù)）/模型組平均扭體次數(shù)×100%

2.3 小鼠電熱板法實(shí)驗(yàn) 用智能熱板儀[（溫度55±0.5）℃]篩選兩次痛閥平均值大于5s而低于30s的雌性小鼠50只，分組、給藥同2.2，每天灌胃給藥1次，連續(xù)7次。于末次給藥后第15、30、60、90min記錄其被放入熱板至出現(xiàn)舔后足的反應(yīng)時(shí)間（s）作為痛閾值，觀察各組間藥物對(duì)動(dòng)物痛閾值的影響。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS24.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有數(shù)據(jù)以（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 阿給水提取物對(duì)乙酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響 腹腔注射乙酸后，小鼠呈現(xiàn)較明顯的扭體反應(yīng)，阿司匹林組痛組與模型對(duì)照組比較，扭體潛伏期延長(zhǎng)、扭體次數(shù)降低，差異顯著（P<0.01）;阿給水提取物組對(duì)扭體潛伏期也體現(xiàn)出良好的延長(zhǎng)作用，扭體次數(shù)明顯下降，且具有一定的量效關(guān)系，與模型對(duì)照組比較小鼠15 min內(nèi)扭體次數(shù)差異顯著（P<0.05、P<0.01）;扭體抑制率高、中劑量組較高。見(jiàn)表1。

3.2 阿給水提取物對(duì)小鼠電熱板刺激的鎮(zhèn)痛作用 給藥前，各組小鼠的痛閾值差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與正常對(duì)照組比較，陽(yáng)性藥物阿司匹林組給藥后能明顯延長(zhǎng)小鼠的痛閾值，差異顯著（P<0.01）。阿給水提取物低、中、高劑量組在給藥后均能不同程度地延長(zhǎng)小鼠對(duì)熱板刺激的疼痛反應(yīng)潛伏期閾值。給藥15、30 min后，各組小鼠痛閾值均明顯延長(zhǎng)，且高、中劑量阿給水提取物作用更明顯（P<0.01）;給藥60、90 min后，高、中劑量阿給水提取物能顯著延長(zhǎng)小鼠的痛閾值（P<0.05）。見(jiàn)表2。

4 討論

疼痛是機(jī)體受到環(huán)境刺激后發(fā)生的一種病理、生理過(guò)程，其既是一種防御性反應(yīng)也是多種疾病的表現(xiàn)癥狀之一。阿司匹林是經(jīng)典的非甾體抗炎藥，也是目前世界上應(yīng)用最廣泛的鎮(zhèn)痛藥，通常認(rèn)為它是一種外周鎮(zhèn)痛藥[3-4]，也可作用于下視丘而產(chǎn)生中樞鎮(zhèn)痛作用[5]，故在考察阿給水提取物的鎮(zhèn)痛作用時(shí)以其作為陽(yáng)性對(duì)照藥。

本研究在鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)中選用物理刺激的熱板法和化學(xué)刺激的扭體法。乙酸扭體實(shí)驗(yàn)是經(jīng)典的鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，是篩選弱鎮(zhèn)痛藥的一種敏感、簡(jiǎn)便、重復(fù)性好的方法，是評(píng)價(jià)和篩選鎮(zhèn)痛藥的常用模型[6]。小鼠在乙酸刺激下，腹痛過(guò)程扭體明顯，容易觀察，從實(shí)驗(yàn)計(jì)算所得抑制率顯示鎮(zhèn)痛作用明顯，阿給水提取物低、中、高3 種劑量均表明阿給水提取物良好的鎮(zhèn)痛效果。熱板法致痛是由于熱刺激足部的感覺(jué)神經(jīng)末梢而使機(jī)體產(chǎn)生痛覺(jué)，類(lèi)似于急性銳痛[7]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明， 阿給水提取物減少扭體反應(yīng)次數(shù)，能延長(zhǎng)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的潛伏期，阿給水提取物低、中、高劑量組在給藥后均能不同程度地延長(zhǎng)小鼠對(duì)熱板刺激的痛閾值，說(shuō)明其具有良好的鎮(zhèn)痛作用，而其更深入的鎮(zhèn)痛機(jī)理有待進(jìn)一步研究。參考文獻(xiàn)

[1]布日額，阿拉騰圖亞，包金泉，等.蒙藥阿給的生藥學(xué)研究[J].中國(guó)民族醫(yī)學(xué)雜志，1998，4 （增刊）：53.

[2]崔箭，唐麗，藍(lán)蓉，等.蒙藥阿給炭治療支氣管擴(kuò)張咯血臨床觀察[J].中央民族大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2006，15（2）：150-155.

[3]余姍.解熱鎮(zhèn)痛藥的臨床應(yīng)用與不良反應(yīng)分析[J].中國(guó)處方藥，2018，16（1），46-47.

[4]劉文洲，滕有明，譚志鑫，等.楊梅水提液鎮(zhèn)痛抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2010，19（6）：47-48.

[5]張其楷.阿司匹林對(duì)健康人的中樞鎮(zhèn)痛作用[J].國(guó)外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊(cè)，1992（3）：180.

[6]諸葛明麗，蔣偉哲，肖萍，等.巖黃連直腸栓抗炎鎮(zhèn)痛作用實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2019，28（9）：11-13.

[7]Cruz LA，Díaz MA，Gupta MP，et al.Assessment of the antinociceptive and anti-inflammatory activities of the stem methanol extract of Diplotropis purpurea[J].Pharm Biol.，2019，57（1）：432-436.

（收稿日期： 編輯：程鵬飛）