一例黃顙魚腹水癥的診治

唐 鵬 王 均 賀 揚(yáng) 李 煜 唐 梟 蒲森婷 石桉寧

(內(nèi)江師范學(xué)院，“長江上游魚類資源保護(hù)與利用”四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 內(nèi)江 641100)

2019年6月，四川內(nèi)江一土池養(yǎng)殖的黃顙魚(已達(dá)上市規(guī)格)出現(xiàn)群體性死亡，死亡率20%～30%。瀕死魚出現(xiàn)離群、塘邊游動、腹部膨大，部分魚眼球出血、尾部和下頜部充血、出血等癥狀。經(jīng)實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌鑒定和人工感染實(shí)驗(yàn)，最后確定引起此次黃顙魚發(fā)病的主要病原為殺魚愛德華氏菌。

一、養(yǎng)殖條件

養(yǎng)殖場位于四川內(nèi)江，養(yǎng)殖面積約180畝，其中30畝主養(yǎng)黃顙魚，套養(yǎng)花白鰱。2019年初放入大規(guī)格魚苗(購于眉山)，發(fā)病時已經(jīng)達(dá)到上市規(guī)格，養(yǎng)殖量為1000～1500千克/畝。發(fā)病時水溫(23±2)℃，簡易試劑盒測得養(yǎng)殖水體水質(zhì)指標(biāo)如下：溶氧3.0～4.0毫克/升，pH7.0～8.2，亞硝酸鹽0.45毫克/升，氨氮0.3毫克/升。

二、發(fā)病情況

2019年5月中旬開始發(fā)病，患病魚食欲減退，離群在塘邊游動，部分魚懸浮于水中，受驚嚇時反應(yīng)遲緩；大體癥狀表現(xiàn)為腹部膨大，部分魚眼球出血，鰓絲腫脹、出血，下頜和尾柄充血。發(fā)病初期每天死亡量50～100尾，高峰期達(dá)到300尾左右。發(fā)病后，使用聚維酮碘進(jìn)行消毒，先后拌飼投喂多西環(huán)素等常用抗菌藥物1周左右，效果不明顯，仍有魚死亡。

三、疾病診斷

1.解剖觀察

將瀕死黃顙魚解剖，發(fā)現(xiàn)腹腔內(nèi)有大量膠狀淡黃色或血紅色腹水，肝臟、腎臟和脾臟腫大、出血，并伴有少量出血點(diǎn)，腸道嚴(yán)重出血，胃部膨大，腸腔內(nèi)充滿氣體或透明液體。

2.病原檢測

寄生蟲檢測結(jié)果顯示，在鰓部、腸道和體表未檢測到寄生蟲。提取病魚的肝臟、腎臟和組織DNA進(jìn)行疑似病毒核酸檢測，斑點(diǎn)叉尾病毒(ChannelCatfishVirus，CCV)檢測結(jié)果為陰性。無菌條件下，采集病魚肝臟、腎臟和脾臟進(jìn)行細(xì)菌接種，在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)后分離到一株革蘭氏陰性短桿菌。將優(yōu)勢菌株使用天根公司細(xì)菌DNA提取試劑盒提取基因組DNA，采用通用引物進(jìn)行16S rRNA基因和gyrB基因PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物送生工生物工程(上海)股份有限公司測序，通過NCBI比對和系統(tǒng)發(fā)育樹分析，最后確定分離細(xì)菌為殺魚愛德華氏菌。按照科赫法則，選用無病無傷健康黃顙魚暫養(yǎng)1周，然后人工感染殺魚愛德華氏菌，復(fù)制出與自然發(fā)病魚相似的癥狀，最后確定引起此次疾病的病原為殺魚愛德華氏菌。

3.病情分析

根據(jù)現(xiàn)場調(diào)查、水質(zhì)檢測和病原鑒定分析，推測引起此次黃顙魚發(fā)病的原因包括以下幾個方面：其一，養(yǎng)殖密度較高，底質(zhì)較差，而黃顙魚屬于底棲魚類，耐低氧能力一般。據(jù)養(yǎng)殖戶介紹，2017－2019年，雖然每月均有換水，但從未使用過改底劑，池塘底部有大量殘餌、糞便，導(dǎo)致底質(zhì)惡化，黃顙魚處于長期缺氧狀態(tài)。其二，黃顙魚冬季采食量偏少，體質(zhì)也有所下降，初春開始逐漸增加投餌，由于胃腸道功能還沒有完全恢復(fù)正常，大量攝食必然加重胃腸道負(fù)荷，導(dǎo)致胃腸道受損，引發(fā)腸炎；而且，大量高蛋白質(zhì)食物在消化代謝過程中加重黃顙魚肝腎負(fù)擔(dān)，導(dǎo)致肝腎受損，最終使得水鈉代謝失衡，出現(xiàn)腹水的癥狀。另外，因其所投餌料為浮性顆粒飼料，攝食魚搶食劇烈，投喂點(diǎn)較為集中，黃顙魚的堅(jiān)硬鰭條可能導(dǎo)致互相劃傷，而消毒又不及時，為疾病的暴發(fā)打開門戶。其三，春末夏初，內(nèi)江溫度變化大，白天溫度有時可高達(dá)30℃，多為晴熱天氣，夜間有時出現(xiàn)雷陣雨，冷熱驟變對魚體產(chǎn)生應(yīng)激。加上長期投餌，水中積蓄的有機(jī)物的量超過池塘承載量，氨氮和亞硝酸鹽的超標(biāo)導(dǎo)致魚體免疫力下降，引起疾病暴發(fā)。

四、疾病治療

對分離出的殺魚愛德華氏菌進(jìn)行培養(yǎng)，通過紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，分離菌株對氟苯尼考、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、諾氟沙星以及氧氟沙星敏感，對多西環(huán)素、鏈霉素、克拉霉素、卡那霉素及多粘菌素B中介，對其他抗生素均耐藥。根據(jù)藥敏結(jié)果制定以下治療方案：按每千克魚體重計(jì)算，恩諾沙星30毫克/千克(10%有效含量)、三黃粉0.5克/千克、板藍(lán)根4克/千克、水產(chǎn)用多維5克/千克，拌餌投喂，連用5天；同時全池潑灑聚維酮碘消毒，保障充足溶氧。4天后黃顙魚死亡量減少，5天后未出現(xiàn)死亡，1周后黃顙魚腹水癥狀消失。

五、討論與總結(jié)

殺魚愛德華氏菌是2013年從遲緩愛德華氏菌中分離出的新亞種，還未見引起黃顙魚發(fā)病的報道。據(jù)報道，魚類感染遲緩愛德華氏菌后會引起敗血癥、爛身、內(nèi)臟組織的壞死、腸炎、腹水等病癥，最終導(dǎo)致養(yǎng)殖品種大規(guī)模死亡。此次黃顙魚疾病暴發(fā)癥狀與遲緩愛德華氏菌引起的病癥有相似之處，其危害性不亞于遲緩愛德華氏菌。養(yǎng)殖過程中存在著同病不同菌的現(xiàn)象，兩者在治療方案上不能同一而論，兩者雖都為愛德華氏菌屬，但其各自所具有的耐藥性卻可能不相同，養(yǎng)殖過程中應(yīng)根據(jù)病原菌的特性選擇其敏感的藥物進(jìn)行治療。如多西環(huán)素在水產(chǎn)養(yǎng)殖中是常用抗生素，對大多數(shù)病原菌有殺滅作用，但此次分離的菌株對多西環(huán)素卻為中介，達(dá)不到治療目的，反而會造成耐藥性。

水產(chǎn)動物發(fā)病往往是多因素造成的，此次黃顙魚感染殺魚愛德華氏菌暴發(fā)腹水癥，其中高蛋白質(zhì)飼料的大量投喂是主要誘因之一，水質(zhì)惡化、溫度不穩(wěn)定等加劇了疾病發(fā)生的可能，另外沒有定期殺滅水體里的有害病原，最終導(dǎo)致黃顙魚腹水癥的暴發(fā)。水產(chǎn)動物疾病重在預(yù)防，要每半個月進(jìn)行1次消毒；平時養(yǎng)殖過程中，飼料應(yīng)添加免疫增強(qiáng)劑，提高魚體自身免疫力，從而降低病害發(fā)生率。本次黃顙魚疾病的治療方案中，采用恩諾沙星為主要治療藥物，輔以中藥制劑和維生素，避免了單一用藥的局限性。