淡水水體中含細(xì)菌水樣保存時(shí)間研究

姜永偉

摘要 ? ?本文研究了國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)對(duì)含細(xì)菌水樣保存時(shí)間的規(guī)定，4 ℃和10 ℃條件下開展了低、中、高3個(gè)濃度水樣連續(xù)24 h條件試驗(yàn)。結(jié)果表明，4 ℃和10 ℃條件下，24 h內(nèi)測(cè)定細(xì)菌總數(shù)的結(jié)果在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上無顯著性差異;4 ℃條件下，24 h內(nèi)中濃度水樣細(xì)菌總數(shù)計(jì)數(shù)結(jié)果在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上無顯著性差異;低濃度和高濃度水樣有顯著性差異。建議水樣的保存時(shí)間不宜超過6 h。

關(guān)鍵詞 ? ?含細(xì)菌水樣;保存時(shí)間;條件試驗(yàn);淡水水體

中圖分類號(hào) ? ?X832 ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 ? ?A

文章編號(hào) ? 1007-5739（2020）15-0182-02 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）

Abstract ? ?The domestic and international standards for the preservation time of water samples containing bacteria were studied. The 24 h continuous condition test of water samples with low， medium and high concentrations were carried out at 4 ℃ and 10 ℃. The results showed that there was no significant difference in the total bacteria in 24 hours between 4 ℃ and 10 ℃. At 4 ℃，there was no significant difference in the total bacteria in the medium concentration samples within 24 hours， but there were significant differences between low concentration and high concentration samples. It is suggested that the preservation time of water sample should not exceed 6 hours.

Key words ? ?water sample containing bacteria; preservation time; condition test; fresh water

《水質(zhì) 細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定 平皿計(jì)數(shù)法》（HJ 1000—2018）[1]中規(guī)定，細(xì)菌總數(shù)是指36 ℃培養(yǎng)48 h，樣品在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上所生長(zhǎng)的需氧菌和兼性厭氧菌菌落總數(shù)。在水環(huán)境微生物檢測(cè)中，由于細(xì)菌繁殖速度快，含細(xì)菌的水樣保存時(shí)間限制成為遠(yuǎn)距離運(yùn)輸難以克服的困難。

國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)對(duì)于水樣的保存時(shí)間多規(guī)定在6 h以內(nèi)（表1），個(gè)別標(biāo)準(zhǔn)如 《水質(zhì)-大腸桿菌和大腸菌群的計(jì)數(shù)-最大可能數(shù)法》（ISO 9308-2—2012）[2]將時(shí)間延長(zhǎng)至18 h。為驗(yàn)證細(xì)菌樣品的最大保存時(shí)間，本文選取低、中、高3個(gè)濃度水樣，在4 ℃和10 ℃保存溫度下，開展了1次/h、連續(xù)24 h的條件試驗(yàn)。

1 ? ?試驗(yàn)方法

就近采集低濃度、中濃度和高濃度3個(gè)濃度水樣，充分混勻后分裝于一系列樣品瓶?jī)?nèi)，然后分別放置在4 ℃和10 ℃冰箱中冷藏保存，每小時(shí)取1瓶水樣，混勻后用平皿計(jì)數(shù)法在無菌操作間中接種并培養(yǎng)48 h后，計(jì)數(shù)平皿上生長(zhǎng)的細(xì)菌菌落總數(shù)。

2 ? ?結(jié)果與分析

48 h平皿上生長(zhǎng)的細(xì)菌菌落總數(shù)結(jié)果見表2。同時(shí)，將以上結(jié)果經(jīng)對(duì)數(shù)處理后進(jìn)行配對(duì)T檢驗(yàn)，結(jié)果見表3。

由表3可見，在4 ℃和10 ℃條件下，低、中、高3種濃度下24 h內(nèi)測(cè)定細(xì)菌總數(shù)的結(jié)果在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上無顯著性差異（P=0.334、P=0.611、P=0.297）。

在4 ℃保存條件下，選取低、中、高3種濃度細(xì)菌總數(shù)結(jié)果差異最大的不同時(shí)間段的值經(jīng)對(duì)數(shù)處理后進(jìn)行配對(duì)T檢驗(yàn)，結(jié)果見表4。

結(jié)果表明，4 ℃條件下，24 h內(nèi)中濃度水樣細(xì)菌總數(shù)計(jì)數(shù)結(jié)果在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上無顯著性差異（P=0.163）;低濃度和高濃度水樣有顯著性差異（P=0.000、P=0.001）。

3 ? ?結(jié)論與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，4 ℃和10 ℃條件下，24 h內(nèi)測(cè)定細(xì)菌總數(shù)無顯著差異;本試驗(yàn)中，4 ℃條件下，中濃度水樣低溫保存24 h后無顯著差異，但是基于日常檢測(cè)中水樣濃度的未知性和歷史數(shù)據(jù)的延續(xù)性（國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)含細(xì)菌水樣的保存時(shí)間均為6 h），建議水樣保存時(shí)間不宜超過6 h[9-10]。

4 ? ?參考文獻(xiàn)

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