高鹽短期攝食對小鼠出血時間、凝血時間、空腹血糖影響的實(shí)驗研究

陳良廣，楊 想，黃利娟，李耀強(qiáng)，楊建鋒，王彩冰

(1.右江民族醫(yī)學(xué)院2015級臨床醫(yī)學(xué)本科生，廣西 百色 533000；2.右江民族醫(yī)學(xué)院2016級臨床醫(yī)學(xué)本科生，廣西 百色 533000；3.右江民族醫(yī)學(xué)院應(yīng)用生理研究室，廣西 百色 533000)

世界衛(wèi)生組織建議每天鹽攝入量不超過5 g，但在中國五分之四被調(diào)查群體中的每天平均攝入鹽量為12.5 g，可見我國大部分人處在高鹽攝食狀態(tài)[1]。據(jù)文獻(xiàn)報道，長期高鹽攝食危害心、肝、腎，造成血壓升高，加重中風(fēng)的危險[2-3]。經(jīng)檢索，高鹽攝食對止血系統(tǒng)和凝血系統(tǒng)的影響尚未發(fā)現(xiàn)有文獻(xiàn)報道。本課題組建立高鹽攝食小鼠模型，觀察短期高鹽攝食對機(jī)體小鼠出血時間(Bleeding time，BT)、凝血時間(Coagulation time，CT)和空腹血糖(Fasting blood glucose，F(xiàn)BG)的影響，并與止血藥物酚磺乙胺的量[4]按體表面積換算成小鼠用量給大鼠灌胃作比較分析，探索短期高鹽攝食對機(jī)體止血系統(tǒng)和凝血系統(tǒng)及糖代謝的影響。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗動物：健康昆明小鼠(KM小鼠)40只，體質(zhì)量20～25 g，雌雄各半，由右江民族醫(yī)學(xué)院動物中心提供(實(shí)驗動物生產(chǎn)許可證：SCXK桂2017-0003；實(shí)驗動物使用許可證：SCXK桂2017-0004)，分籠飼養(yǎng)，日照12 h，室溫20～25℃，濕度50%～60%。

1.2藥品、試劑及器械：酚磺乙胺注射液(遂成藥業(yè)股份有限公司，批號：41801281)；0.9%NaCl注射液(青州堯王制藥有限公司，批號：2219040201)；海藻碘鹽(江西晶昊鹽化有限公司，批號：GB2721)；小鼠飼料(北京科澳協(xié)力飼料有限公司，批號：20190513)；羅康全TM活力型血糖檢測儀(德國羅氏診斷有限公司，型號：Accu-Chek Active)；羅康全活力型血糖測試紙(德國羅氏診斷有限公司，批號：23470633)。

1.3高鹽飼料的制備過程：取180 g和360 g海藻碘鹽分別加入6 kg的小鼠飼料混勻用少量蒸餾水?dāng)嚢?，捏成手指頭大小的飼料條在陽光下曬干，分別制成3%和6%的高鹽小鼠飼料。

1.4動物分組、給藥、喂養(yǎng)：取KM小鼠40只，按FBG值隨機(jī)分四組：正常對照組、3%高鹽組、6%高鹽組均給予0.9%NaCl注射液灌胃，酚磺乙胺組給予30 mg/ml酚磺乙胺溶液灌胃，灌胃量按小鼠體質(zhì)量10 ml/kg計算，1次/d；正常對照組和酚磺乙胺組給小鼠飼料喂養(yǎng)，3%高鹽組和6%高鹽組分別給予3%和6%的高鹽小鼠飼料喂養(yǎng)，各組小鼠自由飲水；連續(xù)4周。

1.5小鼠BT和CT的檢測：末次灌胃前禁食12 h、禁水2 h，末次灌胃30 min橫剪小鼠尾端約0.5 cm，每10秒用濾紙吸血一次，計算血液自行流出到自行停止的時間為小鼠BT。測定BT后擠出尾部一滴血拭去，再次擠出另一滴鮮血滴放玻片上，每10秒用清潔針頭從血滴邊緣向內(nèi)輕挑1次，直至挑起血絲為止，計算血滴放玻片到挑起血絲的時間為小鼠CT。

1.6小鼠FBG的檢測：在檢測BT后，將血糖測試紙安放在血糖檢測儀的檢測區(qū)域，從小鼠尾端擠出血液滴放在血糖測試區(qū)域，記錄血糖檢測儀顯示的血糖濃度值。

2 結(jié)果

2.1各組小鼠BT、CT的結(jié)果比較：酚磺乙胺組的BT、CT均明顯短于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，3%高鹽組和6%高鹽組的BT、CT均明顯長于正常對照組和酚磺乙胺組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，6%高鹽組的BT明顯長于3%高鹽組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.2各組小鼠FBG的結(jié)果比較：各組小鼠實(shí)驗前及實(shí)驗后的FBG兩兩比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 各組小鼠BT、CT、FBG的結(jié)果比較

3 討論

臨床上，檢測BT、CT來判斷機(jī)體止血系統(tǒng)和凝血系統(tǒng)是否正常，檢測FBG來判斷機(jī)體對糖代謝及利用的情況。血小板參與了生理性止血和血液凝固的過程，酚磺乙胺是通過增加血小板數(shù)量和功能發(fā)揮止血和凝血作用的[4-5]。

本實(shí)驗結(jié)果顯示，酚磺乙胺組的BT、CT均明顯短于正常對照組，說明本研究用的小鼠對止血藥有正常的反應(yīng)，小鼠能夠用于檢測止血系統(tǒng)和凝血系統(tǒng)的研究；3%高鹽組和6%高鹽組的BT、CT均明顯長于正常對照組和酚磺乙胺組，6%高鹽組的BT明顯長于3%高鹽組，說明短期高鹽攝食使生理性止血時間和凝血時間延長；各組小鼠實(shí)驗前及實(shí)驗后的FBG兩兩比較無顯著性差異，說明短期高鹽攝食對機(jī)體的糖代謝與利用未造成明顯影響。

長期高鹽攝食對心、肝、腎功能有影響，并導(dǎo)致血壓升高和加重腦缺血，因此有必要控制鹽的攝入[3,6]。從本實(shí)驗的結(jié)果表明，短期高鹽攝食可延長BT、CT，提示手術(shù)、外傷、造血功能障礙的患者不要高鹽攝食；而對于易導(dǎo)致高凝狀態(tài)的機(jī)體(如血栓、血小板增多癥患者)，能否短期高鹽攝食作為輔助治療手段，有待于研究。

臨床常用于止血藥物的酚磺乙胺能增加血小板數(shù)量和增強(qiáng)功能而發(fā)揮作用，而高鹽攝食是否能降低血小板途徑發(fā)揮延長BT、CT的作用有待于今后的進(jìn)一步研究。