兒童血液培養(yǎng)病原菌的分布及耐藥性分析

張薇薇，申美靜，吳凱峰

(遵義醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院(遵義市第一人民醫(yī)院)兒童保健科，貴州 遵義)

0 引言

血流感染是病原體及毒素通過各種途徑侵入血液循環(huán)中引起的一種全身性、嚴(yán)重性的一種感染疾病。兒童敗血癥病情比較復(fù)雜、病情發(fā)展較迅速、兒童抵抗力十分低下，所以兒童血流感染的發(fā)病率和死亡率均較高。近年來由于免疫抑制劑的廣泛應(yīng)用、免疫力低下病人不斷升高以及抗菌素大量使用，使血流感染病人數(shù)量不斷增加，病死率也逐年不斷增加，高達(dá)20%-40%[1]。診斷兒童血流感染的最可靠方法是進(jìn)行兒童血液細(xì)菌培養(yǎng)，進(jìn)行兒童血液細(xì)菌培養(yǎng)對控制和治療兒童血流感染具有非常重要作用。

1 實驗資料與方法

1.1 實驗研究對象

收集2019年01月至01日至2019年12月31日在遵義醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院(遵義市第一人民醫(yī)院)住院并進(jìn)行血液培養(yǎng)的兒童病人標(biāo)本共計13906份，其中513份血培養(yǎng)標(biāo)本中培養(yǎng)出病原菌。

1.2 血液培養(yǎng)標(biāo)本采集方法

兒童患者溫度大于38.5℃或寒顫時，遵循無菌操作方式抽取3-5mL肘靜脈血，然后注入含抗生素吸附瓶的兒童血液培養(yǎng)瓶內(nèi)，混勻后立刻送到檢驗科，并放入法國梅里埃的全自動血液培養(yǎng)系統(tǒng)中進(jìn)行培養(yǎng)。

1.3 主要試劑及儀器

購買血平板(BA)；購買不含抗生素巧克力平板；陰性桿菌鑒定卡；酵母菌鑒定卡；陽性球菌鑒定卡；非發(fā)酵桿菌藥敏卡；肺炎鏈球菌藥敏卡；VITEK MS基質(zhì)液；質(zhì)譜分析系統(tǒng)(VITEK MS)；細(xì)菌鑒定及藥敏分析統(tǒng)(VITEK2)；全自動血液培養(yǎng)系統(tǒng)(法國梅里埃3D)；抗生素吸附兒童血培養(yǎng)瓶。

1.4 細(xì)菌培養(yǎng)鑒定及藥物敏感試驗

血培養(yǎng)儀器報警陽性后，將陽性瓶卸載并轉(zhuǎn)種于血平板和不含抗生素巧克力平板上，接種后放于二氧化碳孵育箱中過夜培養(yǎng)，第二天挑取單個菌落用質(zhì)譜分析系統(tǒng)或細(xì)菌鑒定系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)菌的鑒定和藥物敏感試驗。

1.5 室內(nèi)質(zhì)量控制

采用美國菌種貯存中心購買標(biāo)準(zhǔn)菌株，包括鉛黃腸球菌、霍氏腸桿菌、肺炎鏈球菌、葡萄牙念珠菌、糞腸球菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、光滑念珠菌等標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制，標(biāo)準(zhǔn)菌株的選用和判斷標(biāo)準(zhǔn)遵循CLSI(臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會)抗微生物藥物敏感試驗標(biāo)準(zhǔn)文件、法國梅里埃廠家說明書或全國臨床檢驗第四版操作規(guī)程[2-4]的要求。

2 結(jié)果

2.1 病原菌分類

2019年01月至01日至2019年12月31日，共檢測兒童血液培養(yǎng)標(biāo)本13906份，檢測出病原菌513株，陽性率占比3.7%；其中452株為革蘭陽性球菌，所占比率為88.10%；53株為革蘭陰性桿菌，所占比率為10.34%；8份為酵母樣真菌，所占比率為1.56%，病原菌分類及占比數(shù)據(jù)一覽表，見表1。

表1 病原菌分類一覽表

2.2 病原菌的分布

513株陽性菌株中，共檢測出178株人葡萄球菌，所占比率34.69%；132株表皮葡萄球菌，所占比率25.73%；36株溶血葡萄球菌，所占比率7.02%；15株大腸埃希氏菌占比2.93%；15株肺炎鏈球菌，占比2.93%；137株其它細(xì)菌，所占比率26.70%等。兒童血液培養(yǎng)分離病原菌分布構(gòu)成比見表2。

表2 病原菌分布一覽

2.3 藥物敏感結(jié)果

革蘭陽性球菌分離率居首位的是人葡萄球菌，對萬古霉素、利奈唑胺、替加環(huán)素均敏感；對左氧氟沙星敏感率為74.8%；對紅霉素敏感率為19.8%；對青霉素敏感率為2.7%；對苯唑西林的敏感率為90.1%。革蘭陰性桿菌中以大腸桿菌分離率為主，對亞胺培南、厄他培南、美羅培南和頭孢替坦均敏感；對頭孢他啶的敏感率為88.9%；對頭孢吡肟的敏感率為77.8%；對氨芐西林的敏感率為53.3%；對頭孢唑啉的敏感率為63.6%；對頭孢呋辛的敏感率為55.6%。肺炎鏈球菌對萬古霉素、厄他培南、左氧氟沙星、青霉素、利奈唑胺、莫西沙星的敏感率為100%；對紅霉素的敏感性為7.14%；對美羅培南的敏感性為71.4%。

3 討論

根據(jù)此次實驗結(jié)果顯示在我院兒童血液培養(yǎng)標(biāo)本13906份樣本中，全自動血液培養(yǎng)儀器報警陽性瓶數(shù)量為513份，兒童血液培養(yǎng)陽性分離率占比3.7% ，兒童血培養(yǎng)陽性率略低于國內(nèi)外文獻(xiàn)報道陽性率，可能與地域不同、標(biāo)本送檢量、送檢人群、標(biāo)本污染、標(biāo)本采集方法、采集血量的多少和采血時間等因素有關(guān)系[5-6]。在兒童血流感染中分離的病原菌中，革蘭陰性桿菌明顯低于革蘭陽性球菌，凝固酶陰性的葡萄球菌在革蘭陽性球菌中居首位，其中以人葡萄球菌分離率最高，均未分離出對萬古霉素、利奈唑胺和替加環(huán)素耐藥的菌株，對紅霉素和青霉素的耐藥性均大于20%；大腸埃希菌在革蘭陰性桿菌分離中占主要地位，其中大腸埃希菌對亞胺培南、厄他培南、美羅培南、阿米卡星和頭孢替坦的敏感性為100%；肺炎鏈球菌對萬古霉素、利奈唑胺、左氧氟沙星、青霉素和莫西沙星的敏感性均大于90%。

兒童的身體條件較差，機體免疫系統(tǒng)不完善，抵抗力較差，非常容易引起細(xì)菌感染，進(jìn)而引起細(xì)菌進(jìn)入到血循環(huán)中引進(jìn)血流感染，臨床應(yīng)多采集兒童血液標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)，并重視兒童血液培養(yǎng)病原菌的分布情況及耐藥性特點，減少抗生素使用不規(guī)范性以及減少多重耐藥菌株的產(chǎn)生。

綜上所述，我院兒童血液培養(yǎng)病原菌檢測中以革蘭陽性球菌居首位，革蘭陰性桿菌感染次之，酵母樣真菌感染最少。現(xiàn)今，兒童血流感染的病死率和耐藥率逐年增加，臨床醫(yī)生應(yīng)依據(jù)病原菌的分布特點以及病原菌的藥物敏感情況進(jìn)行抗生素的合理化、規(guī)范化選擇，降低病人的死亡率，提高兒童患者血流感染的治療效果。