★ 周鵬 王章偉 王振 劉芳芳 張功俊 周舟 劉地發(fā)*(創(chuàng)新天然藥物與中藥注射劑國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/江西青峰藥業(yè)有限公司 江西 贛州 341000)
穿心蓮藥材為爵床科植物穿心蓮Andrographispaniculata(Burm.f.)Nees的地上干燥部分。穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯和新穿心蓮內(nèi)酯等二萜類內(nèi)酯化合物是穿心蓮藥材的主要活性成分,具有清熱解毒,涼血,消腫功效。用于感冒發(fā)熱,咽喉腫痛,口舌生瘡,頓咳勞嗽,泄瀉痢疾,熱淋澀痛,癰腫瘡瘍,蛇蟲咬傷等疾病的治療[1]。
有文獻(xiàn)報(bào)道[2-5],不同施肥量對藥材質(zhì)量和產(chǎn)量的影響較大,既不能多施肥,也不能少施肥,需根據(jù)基地土壤的情況及不同生長期的需求,確定最佳施肥用量,有助于發(fā)揮最佳的肥效,既要保障藥材的質(zhì)量,也要提高藥材的產(chǎn)量。
作為喜炎平注射液的原藥材,穿心蓮藥材質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響喜炎平注射液質(zhì)量的優(yōu)劣。為了確保喜炎平注射液的質(zhì)量在源頭可控,在國家中醫(yī)藥管理局中藥標(biāo)準(zhǔn)化項(xiàng)目“喜炎平注射液標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)”項(xiàng)目(ZYBZH-C-JX-41)的支持下,筆者在廣東湛江地區(qū)開展了穿心蓮藥材規(guī)范化種植研究工作,前期研究確定了粵西地區(qū)穿心蓮規(guī)范化種植的最佳播種期[6],本研究基于產(chǎn)地大田種植技術(shù),通過考察不同復(fù)合肥施用量對穿心蓮增產(chǎn)及經(jīng)濟(jì)效益增收的影響情況,確定復(fù)合肥最佳施用量,達(dá)到合理施肥、經(jīng)濟(jì)用肥的目的,為廣東湛江地區(qū)穿心蓮規(guī)范化種植合理施肥提供理論支持,為實(shí)現(xiàn)穿心蓮藥用植物資源的可持續(xù)利用提供參考。
穿心蓮內(nèi)酯對照品(中國食品藥品檢定研究院,批號:110797-201609);脫水穿心蓮內(nèi)酯對照品(中國食品藥品檢定研究院,批號:110854-201509);穿心蓮種子(產(chǎn)地:廣西貴港橋圩鎮(zhèn),千粒重:1.3713g,發(fā)芽率86.67%,凈度95.45%),生物有機(jī)肥(茂名市名富生物科技有限公司,其總養(yǎng)分5.0%以上,有機(jī)質(zhì)45%以上);尿素(中海石油化學(xué)股份有限公司,總氮46.4%以上);復(fù)合肥(挪威雅苒國際有限公司,N∶P∶K比例為15∶15∶15的硫酸鉀型復(fù)合肥,總養(yǎng)分45%以上);甲醇為色譜純,水為純化水,其余試劑均為分析純。穿心蓮藥材樣本采集于廣東湛江實(shí)驗(yàn)基地,經(jīng)江西中醫(yī)藥大學(xué)葛菲教授鑒定為爵床科植物穿心蓮Andrographispaniculata(Burm.f.)Nees的干燥地上部分。
Waters e2695高效液相色譜系統(tǒng);XS105DU/ML204T電子天平(梅特勒-托利多科技有限公司);KQ-300DE數(shù)控超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司,250W,33KHz)。
2.1 試驗(yàn)基地概況 穿心蓮種植實(shí)驗(yàn)基地(在廣東湛江),地處北回歸線以南的低緯地區(qū),屬熱帶北緣季風(fēng)氣候,終年受海洋氣候調(diào)節(jié),冬無嚴(yán)寒,夏無酷暑,年平均氣溫為22.7~23.5℃,年平均雨量1 395.5~1 723.1 mm,年平均日照時(shí)數(shù)1 714.8~ 2 038.2 h。4月—9月為多雨季節(jié),8月雨量最多,10月—次年3月雨量較少,常有旱情出現(xiàn)。夏秋之間熱帶風(fēng)暴和臺風(fēng)較為頻繁[7]。土壤類型多為紅壤土、黑壤土、砂土等[7],有機(jī)質(zhì)為7.8 mg/kg(檢測單位:廣東省綠色產(chǎn)品認(rèn)證檢測中心),肥力中等以上。
2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法 試驗(yàn)區(qū)按照要求完成整地備耕后,結(jié)合當(dāng)?shù)卮筇锓N植技術(shù),一次性定量施用生物有機(jī)肥(基肥)0.75 kg/m2。試驗(yàn)區(qū)播種日期為4月2日,播種方式為機(jī)械播種(參數(shù)設(shè)置如下:行距25 cm,畦距40 cm,每畦地播種4行,畦寬120 cm),播種量0.59 g/m2,每個(gè)試驗(yàn)組播種面積666.7 m2。根據(jù)穿心蓮不同生長期需肥情況,結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道[8]分次定量施用氮肥0.052 5 kg/m2,不同實(shí)驗(yàn)組分5次施用相同比例不同量的復(fù)合肥,見表1。各試驗(yàn)組中耕除草、排灌、病蟲害防治等田間管理措施同當(dāng)?shù)卮筇锓N植技術(shù)。
表1 復(fù)合肥施用量計(jì)劃表 kg/m2
2.3 測產(chǎn)取樣方法 為保證測定的準(zhǔn)確性必須科學(xué)的使用取點(diǎn)方法,取點(diǎn)要力求做到合理,具有足夠的代表性、真實(shí)性,不應(yīng)有任何主觀偏見。為了確保田間取點(diǎn)不出現(xiàn)人為錯(cuò)誤,本次采取交叉法(梅花點(diǎn))取點(diǎn),地頭、周邊保護(hù)行、缺苗斷壟的地方因植株生長特殊,不具有代表性,應(yīng)避免取點(diǎn)。每個(gè)試驗(yàn)組取5個(gè)點(diǎn),每個(gè)取樣點(diǎn)1 m2左右,定期調(diào)查、記錄穿心蓮相關(guān)生長量,包括穿心蓮株高、分支數(shù)等,并于播種后穿心蓮進(jìn)入開花期(140天左右)開展測產(chǎn)取樣工作,記錄穿心蓮株高、分支數(shù)、鮮重、干重等參數(shù)。換算畝產(chǎn)量(畝產(chǎn)量=取樣點(diǎn)樣本干重平均值(kg)/樣本采集面積(m2)×666.67 m2),計(jì)算每個(gè)試驗(yàn)組平均值。
2.4 檢測方法
2.4.1 含量測定 穿心蓮藥材中穿心蓮內(nèi)酯及脫水穿心蓮內(nèi)酯含量測定,按《中國藥典》2015版(一部)“穿心蓮”項(xiàng)下“含量測定”方法進(jìn)行測定[1],具體方法如下:
2.4.1.1 對照品溶液的制備 取穿心蓮內(nèi)酯對照品與脫水穿心蓮內(nèi)酯對照品各10mg,精密稱定,置同一100mL棕色瓶中,加甲醇使溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得混合對照品溶液。
2.4.1.2 供試品溶液的制備 取2.2項(xiàng)下測產(chǎn)樣品,粉碎,取本品粉末(過四號篩)0.5 g,精密稱定重量,精密加入40%甲醇25 mL,稱定重量,浸泡1 h,超聲處理(功率250W,33KHz)30 min,放冷,再稱定重量,用40%甲醇補(bǔ)足減失重量,搖勻,濾過。精密量取續(xù)濾液10 mL,置中性氧化鋁柱(200~300目,5g,內(nèi)徑1.5 cm)上,用甲醇15 mL洗脫,收集全部洗脫液,置50 mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,過濾,續(xù)濾液作為供試品溶液。
2.4.1.3 色譜條件 色譜柱:Ultimate?XB- C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動相:甲醇∶水(52∶48);檢測波長:穿心蓮內(nèi)酯為225 nm,脫水穿心蓮內(nèi)酯為254 nm;流速0.8 mL/min;柱溫30℃;進(jìn)樣量5 μL。理論板數(shù)按穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)算均應(yīng)不低于6 000,相鄰色譜峰分離度應(yīng)大于1.5,對照品及供試品色譜圖見圖1。
圖1 混合對照品225nm(A)、混合對照品254nm(B)、供試品225nm(C)、供試品254nm(D)HPLC色譜圖
2.4.2 總灰分 穿心蓮藥材總灰分測定,按《中國藥典》2015版(四部)通則2302“灰分測定法”項(xiàng)下“總灰分測定法”進(jìn)行測定[9]。
2.5 結(jié)果與分析
2.5.1 不同復(fù)合肥用量對穿心蓮產(chǎn)量的影響 根據(jù)表2結(jié)果可知,在固定基肥、氮肥施用量的基礎(chǔ)上,復(fù)合肥施用量對穿心蓮畝產(chǎn)量有較大的影響。隨著施肥量的增加,穿心蓮畝產(chǎn)量呈現(xiàn)遞增趨勢,增產(chǎn)率為2.01%~13.22%。相對于對照實(shí)驗(yàn)組,實(shí)驗(yàn)組四畝產(chǎn)量增產(chǎn)59.42 kg,實(shí)驗(yàn)組二畝增產(chǎn)57.75 kg,實(shí)驗(yàn)組三畝增產(chǎn)53.97 kg,三組增產(chǎn)量基本相同;隨著施肥量的進(jìn)一步加大,穿心蓮畝產(chǎn)量降低,推測可能是施肥過多,抑制了穿心蓮生長,造成減產(chǎn)。根據(jù)穿心蓮藥材畝產(chǎn)量,穿心蓮規(guī)范化種植過程中,在固定氮肥施用量的基礎(chǔ)上,復(fù)合肥施用量為0.045~0.075 kg/m2(30~50 kg/畝)時(shí)增產(chǎn)效果明顯。
表2 不同復(fù)合肥用量穿心蓮產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)結(jié)果(n=5)
2.5.2 不同復(fù)合肥用量對穿心蓮質(zhì)量的影響 根據(jù)表3結(jié)果可知,在固定基肥、氮肥施用量的基礎(chǔ)上,復(fù)合肥施用量對穿心蓮內(nèi)酯及脫水穿心蓮內(nèi)酯含量有一定的影響,但影響并無規(guī)律性,各實(shí)驗(yàn)組差異不明顯,說明復(fù)合肥施用量不是影響藥材含量差異的關(guān)鍵因素。
根據(jù)表3測定結(jié)果可知,在固定基肥、氮肥施用量的基礎(chǔ)上,復(fù)合肥施用量對總灰分有一定的影響。隨著施用復(fù)合肥量的增加,藥材中總灰分整體呈現(xiàn)增加趨勢,表明藥材中的無機(jī)成分隨著復(fù)合肥施用量的增加而升高,因此,在研究過程中需累積總灰分的數(shù)據(jù),為內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)制定提供重要的依據(jù)。
表3 不同復(fù)合肥用量穿心蓮質(zhì)量統(tǒng)計(jì)結(jié)果 %
2.5.3 不同復(fù)合肥用量對經(jīng)濟(jì)效益的影響 根據(jù)表4經(jīng)濟(jì)效益測算可知,在固定基肥、氮肥施用量的基礎(chǔ)上,隨著復(fù)合肥施用量的增加,每畝投入的成本呈線性遞增趨勢,施肥量越多,每畝投入的成本越高;結(jié)合畝產(chǎn)量及穿心蓮藥材市場價(jià)格可知,隨著施肥量的增加,每畝凈收益增加額呈先增加后降低的趨勢,在復(fù)合肥施用量為0.045 kg/m2(30kg/畝)時(shí),凈收益增加額最大為350.00元。說明在施用基肥、氮肥的基礎(chǔ)上,合理施用復(fù)合肥是提高肥料使用效益,增加經(jīng)濟(jì)效益的重要途徑。因此,根據(jù)經(jīng)濟(jì)效益指標(biāo)判斷,在穿心蓮規(guī)范化種植過程中,復(fù)合肥施用量以0.045 kg/m2(30 kg/畝)為宜。
表4 不同復(fù)合肥施用量經(jīng)濟(jì)效益測算表 元/畝
表5 不同復(fù)合肥施用量實(shí)驗(yàn)結(jié)果匯總
本研究結(jié)果表明不同復(fù)合肥施用量對穿心蓮藥材產(chǎn)量及效益有較大影響,對穿心蓮藥材質(zhì)量影響不明顯。在相同播種期、播種量、田間管理?xiàng)l件下,隨著復(fù)合肥施用量的增加,穿心蓮畝產(chǎn)量及經(jīng)濟(jì)效益呈先增后減趨勢。在施肥量0.075 kg/m2(50 kg/畝)時(shí),穿心蓮藥材畝產(chǎn)量最高為509.42 kg/畝;在施肥量0.045 kg/m2(30 kg/畝)時(shí),穿心蓮內(nèi)酯畝產(chǎn)量最高為24.37 kg/畝;在施肥量0.045 kg/m2(30 kg/畝)時(shí)凈收益增加額最大為350.00元/畝。綜合考慮種植戶、采購商兩個(gè)角度,穿心蓮藥材畝產(chǎn)量、穿心蓮內(nèi)酯畝產(chǎn)量、凈收益增加額三個(gè)維度,廣東湛江地區(qū)穿心蓮規(guī)范化種植復(fù)合肥的合理追施量為0.045 kg/m2(30 kg/畝)時(shí),種植戶可獲得的收益最高。
合理施肥是實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)、高質(zhì)、低成本、環(huán)保的一個(gè)重要措施。過度施肥不但達(dá)不到增產(chǎn)的效果,反而會降低藥材質(zhì)量,還會影響生態(tài)環(huán)境。本研究在固定有機(jī)肥和氮肥用量的基礎(chǔ)上,探索不同復(fù)合肥施用量對穿心蓮藥材增產(chǎn)及效益增收的影響,初步確定了廣東湛江地區(qū)穿心蓮規(guī)范化種植復(fù)合肥的合理追施量為0.045 kg/m2(30 kg/畝),既能生產(chǎn)出高質(zhì)高產(chǎn)的藥材,也能以最小的投入獲得最好的經(jīng)濟(jì)效益,為穿心蓮藥材規(guī)范化種植提供技術(shù)支持,為指導(dǎo)種植戶科學(xué)種植和提高種植戶收入提供科學(xué)的依據(jù)。藥材種植除與基地選擇、播種期、施肥量有密切關(guān)系外,還受施肥的方式、施肥的種類、種植方式、種植密度、氣候環(huán)境、采收期等因素的影響。因此,為了種植出高質(zhì)高產(chǎn)的穿心蓮藥材,今后還需要繼續(xù)探索相關(guān)因子對穿心蓮藥材質(zhì)量、產(chǎn)量的影響。
江西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)2020年4期