柴 艷, 李琦華, 賈俊靜, 張文杰, 魯瓊芳, 陳 濤, 師正鵬, 梁建平
(1.芒市科技成果轉(zhuǎn)化服務(wù)中心,云南德宏678400;2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,省動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)重點(diǎn)試驗(yàn)室,云南昆明 650201;3.濰坊六和飼料有限公司臨朐分公司,山東濰坊262609;4.芒市畜牧站,云南德宏 678400;5.德宏州畜牧站,云南德宏 678400;6.德宏州情報(bào)所,云南德宏 678400)
白術(shù)多糖(PAM)是植物多糖中的一種,為菊科多年生草本植物,在我國(guó)的南方地區(qū)廣泛種植,長(zhǎng)期以來主要作為中草藥配方的成分被利用,其用量居大宗常用中藥材之首。藥理研究表明PAM具有以下作用:(1)提高淋巴細(xì)胞增殖和抗體的產(chǎn)生、提高細(xì)胞免疫功能。(2)提高細(xì)胞過氧化物歧化酶(SOD)活性,抑制紅細(xì)胞自氧化溶血,直接清除自由基(呂圭源等,1996)。(3)增強(qiáng)家兔離體小腸平滑肌自發(fā)性收縮,使其收縮幅度加大(馬允慰,1982);能明顯促進(jìn)小鼠小腸蛋白質(zhì)的合成;對(duì)應(yīng)激性潰瘍,有顯著抑制作用(馬曉松等,1995)。 (4)具有抗菌消炎作用,對(duì)傷寒桿菌、甲型副傷寒桿菌、福氏痢疾桿菌等有抑制作用。PAM能使小鼠TH細(xì)胞明顯增加,提高TH/Ts比值,糾正T細(xì)胞亞群分布紊亂狀態(tài),可使低下的IL-2水平顯著提高,并能增加T淋巴細(xì)胞表面IL-2R的基因表達(dá)。這有可能是PAM有增強(qiáng)免疫和調(diào)節(jié)免疫作用的重要機(jī)制之一(余上才,1994)。此外,白術(shù)還有抗血凝、擴(kuò)張血管、防護(hù)放射線損害等作用,是國(guó)家中醫(yī)管理局公布的中醫(yī)防治“非典”處方中的重要藥材之一(余上才,1994)。本研究以白術(shù)多糖作為一種添加劑,添加至早期斷奶仔豬料中,研究其對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能及腸道組織形態(tài)的影響。
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及設(shè)計(jì) 采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì),從昆明和牧牧業(yè)有限公司豬場(chǎng)選擇胎次、體重(7.5 kg左右)相近、健康狀況良好的三元雜交(DLY)仔豬,公母各半,共60頭,按處理隨機(jī)分為5組,每個(gè)處理12頭,分為3個(gè)重復(fù)(欄),每個(gè)重復(fù)4頭。
1.2 飼料原料及其日糧水平 試驗(yàn)用白術(shù)多糖由華南農(nóng)業(yè)大學(xué)提供,試驗(yàn)日糧原料由昆明云嶺廣大種禽飼料有限公司提供。白術(shù)多糖以3個(gè)不同劑量在預(yù)混料添加工序中分別均勻添加至飼料中。試驗(yàn)日糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平見表1??股亟M中添加的抗生素為1:5的硫酸粘桿菌素和桿菌肽鋅,除抗生素組以外,其他試驗(yàn)組中均未添加任何藥物和抗生素。
1.3 飼養(yǎng)管理 飼養(yǎng)試驗(yàn)在統(tǒng)一條件下進(jìn)行,試驗(yàn)豬按體重相近原則隨機(jī)分配到各個(gè)處理中,且全部飼養(yǎng)在同一棟朝向相同的豬舍內(nèi)。試驗(yàn)的前10 d,采用相同功率的紅外燈人工補(bǔ)溫,后20 d采用自然溫度。試驗(yàn)前對(duì)豬舍進(jìn)行統(tǒng)一清洗、消毒,試驗(yàn)豬用耳牌編號(hào),同時(shí)按常規(guī)免疫程序免疫,并做好疾病控制。整個(gè)試驗(yàn)期采用自由采食和飲水的飼養(yǎng)管理方式。
1.4 生長(zhǎng)性能的測(cè)定 在預(yù)飼期開始和結(jié)束及正試期結(jié)束時(shí)清晨空腹各欄逐頭稱重,以欄為單位記錄采食量及腹瀉頭數(shù),并計(jì)算平均日增重、平均日采食量、料重比和腹瀉率。
料重比=飼料消耗量/增重;
腹瀉率/%=(試驗(yàn)期內(nèi)該組飼養(yǎng)日腹瀉豬數(shù)/該期此組飼養(yǎng)總豬數(shù))×100。
1.5 腸道組織切片的制作與觀察
1.5.1 腸道組織切片的制作 腸道組織切片的制作參照劉惠和李麗立等(2008)組織切片的制備方法并對(duì)其做了一些改進(jìn)。
1.5.2 腸道組織切片的觀察 在低倍鏡下觀測(cè)切片,選擇典型視野。在400倍鏡下觀測(cè)視野中所有完整絨毛,記錄最長(zhǎng)絨毛的長(zhǎng)度和最深隱窩的深度,并計(jì)算兩者比值。
1.6 數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。
2.1 不同處理斷奶仔豬平均日增重的比較 由表2可見,各處理組間平均日增重存在一定的差異,但統(tǒng)計(jì)結(jié)果差異不顯著(P>0.05)。
表2 不同處理斷奶仔豬平均日增重的比較分析kg
2.2 不同處理斷奶仔豬日采食量和料肉比的比較 由表3可知,0.1%PAM處理組的日采食量顯著低于對(duì)照組、抗生素組、0.15%PAM組和0.05%PAM 組 (P<0.05), 分別降低 9.17%、8.22%、8.22%和12.94%。其中0.15%PAM組和抗生素處理組的日采食量相同,都是0.572 kg。0.1%PAM處理組的料重比與0.05%PAM處理組相比差異顯著 (P<0.05)。0.1%PAM處理組的料肉比較0.05%PAM組低13.05%。
表3 不同處理斷奶仔豬日采食量和料肉比的比較分析
2.3 不同處理斷奶仔豬腹瀉率及腹瀉頻率的比較 從表4可以看出,各處理間仔豬的腹瀉率存在一定的差異,但沒有顯著性差異(P>0.05)。
表4 不同處理斷奶仔豬腹瀉率的比較分析%
2.4 不同處理斷奶仔豬小腸絨毛高度的比較分析 由表5可見,在十二指腸中0.1%PAM組絨毛高度顯著高于 (P<0.05)對(duì)照組、抗生素組、0.05%PAM組、0.15%PAM組,分別比其高33.38%、13.48%、17.07%、14.16%; 在空腸段中0.1%PAM處理組絨毛高度與對(duì)照組、抗生素組、0.05%PAM組和0.15%PAM處理組相比差異顯著(P<0.05), 分別提高了 23.45%和 16.38%、24.86%和22.19%;在回腸中各組絨毛高度差異不顯著(P > 0.05)。
2.5 不同處理斷奶仔豬小腸隱窩深度的比較分析 由表6可知,在十二指腸中0.1%PAM組隱窩深度與對(duì)照組、抗生素組、0.05%PAM組、0.15%PAM組相比差異性顯著(P<0.05),分別降低了27.27%、27.16%、14.77%、0.76%; 回腸中 0.1%PAM組隱窩深度與對(duì)照組相比差異性顯著 (P<0.05),其隱窩深度比對(duì)照組低13.26;在空腸中0.1%PAM組隱窩深度與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05),隱窩深度比其低12.38%。
表5 不同處理斷奶仔豬小腸絨毛高度的比較分析 μm
表6 不同處理斷奶仔豬小腸隱窩深度的比較分析 μm
2.6 不同處理斷奶仔豬小腸絨毛高度/隱窩深度的比較分析 由表7可見,在十二指腸中0.1%PAM組絨毛高度/隱窩深度與對(duì)照組、抗生素組、0.05%PAM組、0.15%PAM組相比差異性顯著(P< 0.05), 分 別 提 高 39.64%、21.09%、21.09%、26.02%;在空腸中0.1%PAM組絨毛高度/隱窩深度與對(duì)照組、抗生素組、0.05%PAM組、0.15%PAM組相比差異性顯著(P<0.05),分別提高34.45%、33.33%、33.33% 、33.33%?;啬c中各組絨毛高度/隱窩深度相比差異性不顯著(P>0.05)。
表7 不同處理斷奶仔豬小腸絨毛高度/隱窩深度的比較分析
3.1 不同白術(shù)多糖添加水平對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的影響 本試驗(yàn)結(jié)果表明,在日糧中添加0.1%劑量的白術(shù)粗多糖不僅能夠提高仔豬的平均日增重,還能提高飼料報(bào)酬。本試驗(yàn)中各處理組間平均日增重存在一定的差異,但統(tǒng)計(jì)結(jié)果差異不顯著(P>0.05),0.1%PAM處理組平均日增重最高。對(duì)于日采食量本試驗(yàn)中0.1%PAM處理組顯著低于對(duì)照組、抗生素組、0.15%PAM組和0.05%PAM組(P<0.05);對(duì)于料肉比本試驗(yàn)中0.1%PAM組最低。從已報(bào)道的研究結(jié)果來看,關(guān)于多糖對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響報(bào)道不一,林斌等(2000)采用白術(shù)、黃芪、黨參、茯苓等中草藥組方作為飼料添加劑飼喂仔豬,斷奶后14 d增重比對(duì)照組提高15.4%。金淑英等(2001)對(duì)28日齡斷奶仔豬飼喂含1%酵母多糖顆粒料,結(jié)果表明料肉比較對(duì)照組差異顯著。但也有研究表明日糧中添加多糖對(duì)生長(zhǎng)性能無顯著影響,魏鳳仙等(2006)認(rèn)為,基礎(chǔ)日糧中添加500 mg/kg黃芪多糖不影響生長(zhǎng)豬的生產(chǎn)性能(P≥0.05),但有一定提高生產(chǎn)性能的趨勢(shì)。
3.2 不同白術(shù)多糖添加水平對(duì)仔豬腹瀉率的影響 本研究中白術(shù)多糖對(duì)斷奶仔豬的腹瀉率沒有顯著性的影響,但是添加0.1%的白術(shù)多糖可以降低仔豬腹瀉率。近年來,對(duì)于多糖能夠提高斷奶仔豬免疫功能,降低腹瀉率的報(bào)道很多。胡倉(cāng)云等(2007)研究黃芪多糖對(duì)斷奶仔豬腹瀉和促生長(zhǎng)的效果試驗(yàn)中表明,黃芪多糖能夠顯著降低斷奶仔豬的腹瀉率。祁鶴民等(2008)報(bào)道,黃芪多糖對(duì)仔豬“三痢”的效果有顯著作用。崔錦鵬等(2001)研究也發(fā)現(xiàn),復(fù)方中草藥(黨參、白術(shù)、黃芩、板蘭根、蒲公英等)能有效殺滅大腸桿菌和沙門氏菌。趙銀麗等 (2006)在黃芩抗雞大腸桿菌作用的研究中指出,黃芩可顯著降低雞腸道中大腸桿菌數(shù)量,降低家禽的發(fā)病率。喻育才(2007)在黃芪粗提物對(duì)乳仔豬抗腹瀉作用及生長(zhǎng)性能影響的研究結(jié)果表明,黃芪粗提物能有效的降低斷奶仔豬腹瀉率。李鳳玲(2008)在黃芪多糖(APS)對(duì)斷奶仔豬抗病力的影響研究中發(fā)現(xiàn),黃芪多糖(APS)能有效降低斷奶仔豬腹瀉率和腹瀉頻率。所有報(bào)道與本試驗(yàn)研究結(jié)果相似,但本試驗(yàn)研究結(jié)果表明添加0.1%的白術(shù)多糖能最為有效地降低仔豬腹瀉率。
3.3 不同白術(shù)多糖添加水平對(duì)仔豬小腸絨毛高度和隱窩深度的影響 辜玉紅等(2003)報(bào)道,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收主要在動(dòng)物腸道中進(jìn)行,腸道健康與否將直接影響動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的攝取,特別對(duì)幼齡動(dòng)物而言,腸黏膜發(fā)育不完全將影響其生長(zhǎng)、發(fā)育、免疫功能等。斷奶應(yīng)激和飼料抗原引發(fā)的過敏反應(yīng)可引起不同程度的絨毛變短、隱窩加深以及絨毛高度與隱窩深度的比值下降 (陳代文等,1996)。未斷奶仔豬隨著日齡增大,隱窩深度降低,絨毛高度增加,仔豬斷奶后則表現(xiàn)為隱窩深度增加,而絨毛長(zhǎng)度變短(張宏福等,2002;Jacobs等,1986)。腸道黏膜上皮絨毛長(zhǎng)度變短,隱窩深度增加意味著絨毛吸收細(xì)胞減少,分泌細(xì)胞增多,腸道黏膜萎縮,造成吸收能力下降,未被消化吸收的物質(zhì)不僅使腸道中滲透壓升高,引起滲透性腹瀉,而且使腸道中大腸桿菌等腐敗菌大量繁殖(Li等,1991)。絨毛長(zhǎng)度和隱窩深度反映小腸的功能狀態(tài),絨毛變短使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力降低,隱窩深度反映小腸上皮更新速度,更新過程減慢,則隱窩變淺。隱窩變淺表明腸上皮細(xì)胞成熟率上升,分泌功能增強(qiáng)(成令忠,1994)。
本研究表明,在飼料中添加0.1%的白術(shù)多糖與對(duì)照組和抗生素組相比可以顯著提高 (P<0.05)十二指腸段和空腸段的絨毛高度,與對(duì)照組相比顯著降低十二指腸段、空腸、回腸段隱窩深度。從已報(bào)道的研究結(jié)果來看,關(guān)于多糖對(duì)斷奶仔豬小腸絨毛高度和隱窩深度的影響報(bào)道不一。陳清華等(2007)在飼料中添加牛膝多糖,試驗(yàn)結(jié)果表明與對(duì)照組和抗生素組相比,添加0.1%的牛膝多糖能夠顯著提高十二指腸、回腸和空腸絨毛長(zhǎng)度及顯著降低十二指腸隱窩深度,這與本試驗(yàn)研究結(jié)果相似。說明白術(shù)多糖在改善小腸前段腸道對(duì)養(yǎng)分的利用和吸收功能比后段好。劉惠等(2008)研究結(jié)果表明,添加0.6%的白術(shù)多糖對(duì)斷奶仔豬十二指腸、空腸、回腸絨毛高度和隱窩深度均沒有顯著影響,但回腸和空腸的絨毛高度均比對(duì)照組高。而采用白術(shù)、黃柏、黨參、蒼術(shù)、陳皮、山楂、馬齒莧粉7種中草藥作為飼料添加劑飼喂仔豬,結(jié)果表明,添加0.6%的復(fù)合多糖能顯著提高十二指腸的絨毛高度,對(duì)空腸和回腸的絨毛高沒有顯著改善;添加0.6%的復(fù)合多糖和0.6%的白術(shù)多糖均對(duì)十二指腸、空腸和回腸隱窩深度沒有顯著影響。
3.4 不同白術(shù)多糖添加水平對(duì)仔豬小腸絨毛高度/隱窩深度比值的影響 小腸黏膜絨毛高度與隱窩深度的比值是決定仔豬消化吸收功能的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。比值大說明腸內(nèi)膜面積較大,消化吸收能力較強(qiáng);比值小,則說明腸內(nèi)膜變態(tài)反應(yīng)大,消化吸收能力差。
本研究表明,在飼料中添加0.1%的白術(shù)多糖與對(duì)照組和抗生素組相比可以顯著提高仔豬十二指腸和空腸絨毛高度/隱窩深度的比值,但對(duì)回腸段的小腸絨毛高度/隱窩深度的比值沒有顯著性影響。劉惠等(2008)研究結(jié)果表明,添加0.6%的白術(shù)多糖和0.6%的復(fù)合多糖對(duì)斷奶仔豬十二指腸、空腸和回腸段的小腸絨毛高度/隱窩深度的比值沒有顯著性影響,但在十二指腸和回腸段中0.6%的白術(shù)多糖和0.6%的復(fù)合多糖處理組的小腸絨毛高度/隱窩深度的比值均比對(duì)照組和抗生素處理組有所提高。本研究仔豬生長(zhǎng)性能、腹瀉率、腸道組織形態(tài)結(jié)果與以上的報(bào)道結(jié)果有不相一致的地方,導(dǎo)致的原因可能與多糖的種類、來源、有效成分的含量、添加量、日糧組成、試驗(yàn)條件、選擇不同的試驗(yàn)動(dòng)物等有關(guān)。具體情況有待進(jìn)一步研究。
本試驗(yàn)結(jié)果表明,日糧中添加0.10%白術(shù)多糖可以提高斷奶仔豬生產(chǎn)性能,并能通過提高小腸絨毛高度與隱窩深度的比值改善腸道消化功能。