川芎嗪聯(lián)合順鉑對老年肺癌病人基質(zhì)細胞衍生因子-1、凋亡抑制蛋白因子與基質(zhì)金屬蛋白酶表達的影響

王定勇，鄧斌，鄧英國，曹莉，宋珊

作者單位：1攀鋼集團總醫(yī)院密地院區(qū)呼吸內(nèi)科，四川 攀枝花617000；2川北醫(yī)學院附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科，四川 南充637000

肺癌是一種發(fā)病率和死亡率較高的疾病，隨著人口老齡化，老年肺癌的發(fā)病率呈上升趨勢［1-2］。化療是治療老年肺癌常用的方法，能夠有效殺滅腫瘤細胞，延長病人生命。順鉑是臨床中應用較多的化療藥物，對肺腺癌、肺鱗癌具有良好的殺滅效果［3］。川芎嗪（Tetramethylpyrazine，TMP）是川芎中的有效成分，相關(guān)研究顯示，川芎嗪對腫瘤血管的生長具有抑制作用，具有抗腫瘤作用［4］。凋亡抑制蛋白因子（Livin）具有抑制細胞凋亡的作用，在腫瘤組織中表達量較高［5］?；|(zhì)細胞衍生因子-1（Stromal cell derived factor-1，SDF-1）是趨化因子蛋白家族成員之一，參與腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移［6］?；|(zhì)金屬蛋白酶（Matrix metalloproteinases，MMPs）能夠降解細胞外基質(zhì)中的蛋白成分，在腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要作用［7］。本次研究探索川芎嗪聯(lián)合順鉑治療老年肺癌的臨床效果以及對SDF-1、Livin、MMPs等的影響，報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料選取攀鋼集團總醫(yī)院密地院區(qū)2016年6月至2018年6月收治的老年肺癌病人140例，采用隨機數(shù)字表法分為觀察組和對照組，每組各70例。兩組病人性別、年齡、病理類型、疾病分期、體質(zhì)量指數(shù)等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表1。本研究符合《世界醫(yī)學協(xié)會赫爾辛基宣言》相關(guān)要求。

1.2排納標準納入標準：①符合《中國原發(fā)性肺癌診療規(guī)范（2015年版）》中原發(fā)性肺癌的診斷標準［8］；②年齡范圍為60～80歲；③對本次研究知情同意。排除標準：①伴隨心、腦、腎等重要臟器功能衰竭；②對本次研究所用藥物過敏；③生存預期不足3個月；④治療依從性差，不能完成治療療程。

1.3治療方法對照組采用傳統(tǒng)的NP化療方案：重酒石酸長春瑞濱注射液（德國Pierre Fabre Medicament，注冊證號H20080497）25～30 mg∕m2，靜脈滴注，1次∕周；順鉑注射液（澳大利亞Hospira Australia Pty Ltd，注冊證號H20090521）120 mg∕m2，治療首日及第29天靜脈滴注，每4周為1個治療周期，共進行4個周期治療。觀察組在對照組基礎(chǔ)上聯(lián)合使用鹽酸川芎嗪氯化鈉注射液（珠海聯(lián)邦制藥股份有限公司中山分公司，生產(chǎn)批號：H20020608），靜脈滴注，每天1次，每次80 mg。兩組病人首次接受化療前7 d均每天1次肌內(nèi)注射維生素B121 000 mg，并口服葉酸400 mg，每天1次?；熎陂g檢測病人一般生命體征、肝腎功能、血常規(guī)等指標，檢測病人不良反應的發(fā)生，并進行對癥治療。

1.4觀察指標

1.4.1 療效評價 病人接受化療4個周期后根據(jù)實體瘤療效評價標準（RECIST）評估治療效果［9］：完全緩解（CR）：腫瘤完全消失，部分緩解（PR）：腫瘤較治療前縮小50%以上，疾病穩(wěn)定（SD）：腫瘤治療后減少超過25%不超過50%，疾病進展（PD）：治療后腫瘤增大25%及以上或有新病灶出現(xiàn)。SD、PR病人視為治療有效。

1.4.2 生活質(zhì)量 治療前和治療后對病人采用肺癌病人生活質(zhì)量量表QLQ-LC13進行生活質(zhì)量評估，評估內(nèi)容包括肺癌臨床癥狀以及治療后不良反應等13項內(nèi)容，根據(jù)量表規(guī)則計算得分。

1.4.3 肺癌組織SDF-1、Livin和MMPs表達 治療前和治療后采集所有病人肺癌組織，TRIZOL法提取肺癌組織總RNA，采用cDNA合成試劑盒（roche）將mRNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，采用實時熒光定量PCR儀檢測SDF-1、Livin ɑ、Livin β、MMP-2和MMP-9mRNA表達情況，CT值以GAPDH作為內(nèi)參進行校準。內(nèi)參GAPDH及目的基因SDF-1、Livinɑ、Livinβ、MMP-2和MMP-9引物序列及聚合酶鏈式反應（PCR）條件見表2。

1.4.4 不良反應 監(jiān)測兩組病人轉(zhuǎn)氨酶升高，轉(zhuǎn)氨酶升高，血小板、白細胞下降，消化道癥狀，皮疹等發(fā)生情況。

1.5統(tǒng)計學方法所有數(shù)據(jù)均采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件分析，計數(shù)資料以例和百分數(shù)（%）表示，組間對比分析采用χ2檢驗進行；計量資料采用±s表示，所有數(shù)據(jù)均符合正態(tài)分布，組間對比分析采用獨立樣本t檢驗。等級資料采用秩和檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

表1 老年肺癌140例觀察組和對照組一般資料比較

表2 肺癌組織聚合酶鏈式反應（PCR）引物列表

2 結(jié)果

2.1兩組臨床療效比較所有病人均完成4個周期以上治療，對照組臨床總有效率為45.7%，觀察組臨床總有效率為61.4%，兩組治療有效率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表3。

表3 老年肺癌140例觀察組和對照組治療效果比較∕例（%）

2.2兩組治療前后生活質(zhì)量評分比較治療前兩組生活質(zhì)量評分差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；治療后兩組生活質(zhì)量評分均高于治療前，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；治療后觀察組生活質(zhì)量評分高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表4。

表4 老年肺癌140例兩組治療前后QLQ-LC13量表評分比較∕（分，±s）

表4 老年肺癌140例兩組治療前后QLQ-LC13量表評分比較∕（分，±s）

組別對照組觀察組t值P值例數(shù)70 70治療前12.08±2.31 11.86±2.45 0.547 0.586治療后14.19±3.32 23.46±4.21 14.466 0.000 t值4.365 19.925 P值0.000 0.000

2.3兩組治療前后肺癌組織SDF-1、Livin和MMPs表達比較治療前兩組SDF-1、Livinα、Livin β、MMP-2、MMP-9比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；治療后兩組各項指標均較治療前降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；治療后觀察組各項指標均低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表5。

2.4兩組不良反應發(fā)生率比較觀察組40（57.1%）例出現(xiàn)不良反應，對照組51（72.9%）例出現(xiàn)不良反應，觀察組不良反應發(fā)生率明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（χ2＝4.272，P＝0.039），見表6。

3 討論

肺癌是一種高發(fā)病率和死亡率的疾病，隨著老齡化的發(fā)展，老年肺癌發(fā)病率呈上升趨勢。老年肺癌病人體質(zhì)較弱，疾病惡性程度較高，并且易出現(xiàn)復發(fā)及轉(zhuǎn)移。目前治療老年肺癌主要目的是控制

表5 老年肺癌140例兩組治療前后肺癌組織SDF-1、livin和MMPs表達比較∕± s

表5 老年肺癌140例兩組治療前后肺癌組織SDF-1、livin和MMPs表達比較∕± s

注：與本組治療前相比，a P＜0.05

指標SDF-1治療前治療后Livinɑ治療前治療后Livinβ治療前治療后MMP-2治療前治療后MMP-9治療前治療后對照組（n＝70）0.982±0.563 0.864±0.424a 0.221±0.202 0.184±0.135a 0.153±0.117 0.122±0.108a 1.648±0.834 1.458±0.760a 0.445±0.106 0.352±0.165a觀察組（n＝70）0.977±0.516 0.727±0.438a 0.214±0.187 0.137±0.126a 0.146±0.120 0.098±0.091a 1.636±0.827 1.234±0.715a 0.440±0.112 0.281±0.183a t值0.055 1.880 0.213 2.129 0.349 1.422 0.085 1.796 0.271 2.411 P值0.956 0.031 0.416 0.017 0.364 0.157 0.466 0.037 0.393 0.009

表6 老年肺癌140例兩組不良反應發(fā)生率比較∕例（%）

腫瘤增長，改善病人生活質(zhì)量，延長生存期［10］?；熓悄壳芭R床上治療肺癌的主要方式之一，能夠有效控制腫瘤增長，延長病人生存時間，提高病人生活質(zhì)量。順鉑是治療肺癌常用的化療藥物，但是老年病人由于身體耐受能力下降，病人接受順鉑治療容易出現(xiàn)骨髓抑制、神經(jīng)毒性、消化道癥狀等不良反應［11］。川芎嗪是中藥川芎的有效成分，具有一定血管活性，多用于治療心腦血管疾病。研究表明，川芎嗪具有抗炎、抑制腫瘤細胞活性等作用［12］。本次研究中，對照組病人采用順鉑進行化療，觀察組在對照組基礎(chǔ)上聯(lián)合川芎嗪進行治療，雖然兩組有效率比較差異無統(tǒng)計學意義，但是觀察組生活質(zhì)量評分高于對照組，表明川芎嗪聯(lián)合順鉑能夠明顯改善病人癥狀，提高病人生活質(zhì)量。對于川芎嗪抗惡性腫瘤的作用，賈秀紅等［13］發(fā)現(xiàn)沉默HOXA10基因表達聯(lián)合川芎嗪可逆轉(zhuǎn)白血病K562∕ADR細胞的多藥耐藥性，劉群軼等［14］發(fā)現(xiàn)川芎嗪可以加強經(jīng)皮肝穿瘤內(nèi)注射碘油吡柔比星治療中晚期肝癌的療效，其機制可能與川芎嗪可以改善病人血液流變學水平有關(guān)。對于肺癌，朱亞芳等［15］通過研究證實川芎嗪能夠抑制Lewis肺癌移植瘤生長，抑制其血管生成，與順鉑聯(lián)合可提高化療效果并改善小鼠生存狀態(tài)，與本研究結(jié)果相符。腫瘤病人大多處于高凝、低纖溶狀態(tài)，腫瘤組織周圍及腫瘤供血血管內(nèi)的纖維蛋白沉著及血栓形成阻礙了化療藥物的浸潤［16］。川芎嗪能改善高凝和低纖溶狀態(tài)，同時增加血清脂蛋白脂酶活性，增加腫瘤組織通透性，使化療藥物更容易滲透，從而增加藥物的療效［17-19］。

SDF-1是趨化因子蛋白家族成員之一，SDF-1能夠與腫瘤細胞表面CXCR4受體結(jié)合并促進腫瘤細胞增殖，同時參與腫瘤細胞遷徙、黏附等過程［20］。本次研究中，兩組病人治療后SDF-1均較治療前降低，其中觀察組明顯低于對照組，表明川芎嗪聯(lián)合順鉑化療能夠降低SDF-1表達，從而對腫瘤細胞的增殖產(chǎn)生抑制作用。Livin是一種抑制凋亡蛋白，在腫瘤組織中表達較多，對腫瘤細胞維持活性具有重要作用［21］。本次研究中，觀察組病人腫瘤組織中Livinα、Livinβ明顯低于對照組，表明川芎嗪能夠降低Livin水平，利于化療藥物殺死腫瘤細胞。MMP2和MMP9能夠降解胞外基質(zhì)，在腫瘤組織新生血管的生長、腫瘤細胞的浸潤、轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要作用［22］。根據(jù)相關(guān)研究［23］，腫瘤組織中MMP2、MMP9水平明顯高于癌旁組織。本次研究中，觀察組病人MMP2、MMP9水平明顯低于對照組，說明川芎嗪能夠降低MMP2、MMP9表達，可能對降低腫瘤細胞轉(zhuǎn)移能力具有積極作用。本次研究中，采用川芎嗪聯(lián)合順鉑治療后SDF-1、Livin、MMPs等水平顯著下降，分析原因可能為川芎嗪能夠提高腫瘤細胞對順鉑的敏感性，增強順鉑殺滅腫瘤細胞的能力，從而對腫瘤細胞的生長具有抑制作用［24］。另外，本次研究還對病人治療期間不良反應進行監(jiān)測，結(jié)果顯示，觀察組病人粒細胞減少、惡心嘔吐、腹瀉、轉(zhuǎn)氨酶升高等不良反應發(fā)生率明顯低于對照組，表明川芎嗪能夠降低順鉑化療相關(guān)不良反應的發(fā)生。

綜上所述，川芎嗪聯(lián)合順鉑治療老年肺癌病人能夠降低腫瘤組織SDF-1、Livin、MMPs表達，提高臨床療效，有助于提高病人生活質(zhì)量，降低不良反應的發(fā)生。