影響高同型半胱氨酸型高血壓發(fā)生的基因和環(huán)境危險(xiǎn)因素

葉叔安 張安平 許藝璇

福建省泉州市泉港區(qū)醫(yī)院 362801

高血壓患者長期存在的高血壓狀態(tài)極易導(dǎo)致各種臟器損害，是發(fā)生心腦血管事件的重要危險(xiǎn)因素之一[1]。而當(dāng)高血壓患者伴有血同型半胱氨酸水平升高時(shí)，其發(fā)生心腦血管事件的風(fēng)險(xiǎn)更會(huì)顯著增加。因此，積極了解影響高同型半胱氨酸型高血壓發(fā)生的危險(xiǎn)因素，以便早期進(jìn)行心腦血管事件的防治十分必要。然而，目前國內(nèi)關(guān)于高血壓與高同型半胱氨酸血癥的相關(guān)研究還較少，故本文就以114例高血壓患者作為觀察對(duì)象，對(duì)影響高同型半胱氨酸型高血壓發(fā)生的基因和環(huán)境危險(xiǎn)因素進(jìn)行了探究，現(xiàn)總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 基線資料 選取2018年3月—2019年6月我院收治的114例原發(fā)性高血壓患者作為觀察對(duì)象，男43例，女71例；年齡34～93歲，平均年齡(60.21±3.45)歲；從不吸煙、曾經(jīng)吸煙、正在吸煙患者分別為80例、14例、20例；從不飲酒、偶爾飲酒、曾經(jīng)飲酒、正在飲酒患者分別為91例、5例、8例、10例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)均符合WHO/ISH《高血壓指南》中的原發(fā)性高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]；(2)知曉、同意并愿意配合本研究者；(3)經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)繼發(fā)性高血壓；(2)合并嚴(yán)重心律失常、冠心病、腦卒中以及肝腎功能不全、惡性腫瘤等疾病者；(3)有腦卒中、心肌梗死等疾病史或?qū)W運(yùn)重建等手術(shù)史者；(4)妊娠和哺乳期婦女。

1.2 方法

1.2.1 血同型半胱氨酸水平檢測(cè)。采用酶循環(huán)法進(jìn)行血同型半胱氨酸水平檢測(cè)。檢測(cè)時(shí)在患者空腹情況下，采用分離膠/促凝管采集患者靜脈血5ml，采血后1h內(nèi)進(jìn)行離心，離心后分離血清，如延遲檢測(cè)，則可在2～8℃的情況下密封保存48h。血同型半胱氨酸水平由中心實(shí)驗(yàn)室采用酶循環(huán)法測(cè)定，檢測(cè)儀器采用日立7180型全自動(dòng)生化分析儀，試劑盒由中山標(biāo)佳生物科技有限公司提供。試驗(yàn)條件：樣本(S)：10μl； 試劑1(R1)：200μl；試劑2(R2)：50μl；溫度：37℃；測(cè)定類型：速率法；主波長：340nm；副波長：405nm；反應(yīng)方向：向下；方法：先將樣本與R1混合，37℃ 5min后加入R2試劑，然后測(cè)定加入R2后2～5min的ΔA。反應(yīng)時(shí)間：10min。血同型半胱氨酸水平正常參考值為4.0～15.0μmol/L。根據(jù)指南，將血同型半胱氨酸水平≥10μmol/L定義為高同型半胱氨酸血癥。

1.2.2 MTHFR C677T基因檢測(cè)。(1)采樣：EDTA抗凝外周血1～2ml；(2)提取DNA：使用天隆全血DNA提取試劑盒、配套自動(dòng)化提取儀，將外周血、相應(yīng)試劑加入96深孔板中，選擇運(yùn)行程序，結(jié)束后將提取好的DNA吸出保存；(3)質(zhì)控：使用NANODROP 2000核酸濃度檢測(cè)儀檢測(cè)DNA濃度(需>10ng/μl)，260/280純度在1.8～2.0之間合格；(4)熒光PCR：使用武漢友芝友人類MTHFR 677基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒，將配套試劑配好加入8聯(lián)管或96孔板中，最后加入相應(yīng)樣本的DNA，且每批檢測(cè)中還需同時(shí)檢測(cè)陰性對(duì)照和陽性對(duì)照；(5)儀器運(yùn)行：加好后瞬時(shí)離心上機(jī)——Themofisher ABI 7500熒光定量PCR儀；(6)分析結(jié)果：分析CC、CT、TT。

1.3 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)這114例高血壓患者的血同型半胱氨酸水平檢測(cè)和MTHFR C677T基因檢測(cè)結(jié)果，并統(tǒng)計(jì)不同人群(性別、年齡、是否吸煙、是否飲酒、血壓嚴(yán)重程度、體質(zhì)指數(shù)、MTHFR C677T基因多態(tài)性)的高同型半胱氨酸血癥患病率分布情況，同時(shí)通過多元回歸分析影響高血壓患者高同型半胱氨酸血癥發(fā)生率的危險(xiǎn)因素，以及比較接受葉酸干預(yù)高同型半胱氨酸型高血壓患者干預(yù)前后的血同型半胱氨酸水平。

2 結(jié)果

2.1 血同型半胱氨酸和MTHFR C677T基因檢測(cè)結(jié)果 114例高血壓患者中，有58例患者患有高同型半胱氨酸血癥，高同型半胱氨酸血癥總發(fā)生率為50.88%，其中男28例，女30例，男性高同型半胱氨酸血癥發(fā)生率65.12%(28/43)高于女性的42.25%(30/71)(P<0.05)；男性血同型半胱氨酸水平(21.89±2.48)μmol/L高于女性的(19.80±2.31)μmol/L(P<0.05)；MTHFR C677T基因檢測(cè)結(jié)果中，CC型41例(35.96%)，CT型47例(41.23%)，TT型26例(22.81%)，男性CC型、CT型、TT型占比(32.56%、44.19%、23.26%)與女性比較(38.03%、39.44%、22.54%)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 不同人群的高同型半胱氨酸血癥患病率分布情況 年齡≥70歲男性患者高同型半胱氨酸血癥患病率高于45～59歲和60～69歲患者，且女性患者趨勢(shì)相同(P<0.05)；男女不同血壓嚴(yán)重程度、不同吸煙情況患者的高同型半胱氨酸血癥患病率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；正在飲酒男性患者的高同型半胱氨酸血癥患病率高于從不飲酒、偶爾飲酒、曾經(jīng)飲酒患者，且女性患者趨勢(shì)相同(P<0.05)；體質(zhì)指數(shù)≥25男性患者的高同型半胱氨酸血癥患病率高于<23患者(P<0.05)，但不同體質(zhì)指數(shù)女性患者的高同型半胱氨酸血癥患病率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；TT基因型男性患者的高同型半胱氨酸血癥患病率高于CT和CC基因型患者，且女性患者趨勢(shì)相同(P<0.05)。見表1。

表1 不同人群的高同型半胱氨酸血癥患病率分布情況[n(%)]

2.3 影響高血壓患者高同型半胱氨酸血癥發(fā)生率的危險(xiǎn)因素 年齡、飲酒情況、體質(zhì)指數(shù)以及基因型在兩個(gè)性別中均與高同型半胱氨酸血癥發(fā)生率呈正相關(guān)性(P<0.05)。見表2。

表2 影響高血壓患者高同型半胱氨酸血癥發(fā)生率的危險(xiǎn)因素

2.4 葉酸干預(yù)前后血同型半胱氨酸水平比較 58例高同型半胱氨酸型高血壓患者中，有11例患者接受葉酸干預(yù)，葉酸干預(yù)后血同型半胱氨酸水平(16.29±1.86)μmol/L低于葉酸干預(yù)前的(21.31±2.09)μmol/L(P<0.05)。

3 討論

心腦血管疾病的發(fā)生和發(fā)展不僅取決于血壓水平，還取決于高血壓患者同時(shí)存在的其他心腦血管危險(xiǎn)因素。有研究證實(shí)[3]，血同型半胱氨酸水平與心腦血管疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān)，且可與高血壓產(chǎn)生協(xié)同作用，加劇血管損害。鑒于此，本文對(duì)影響高同型半胱氨酸型高血壓發(fā)生的基因和環(huán)境危險(xiǎn)因素進(jìn)行了探究，旨在為心腦血管疾病的防治提供更多的方向。

本文結(jié)果顯示，114例高血壓患者高同型半胱氨酸血癥總發(fā)生率為50.88%。與惠朝暉等報(bào)道的58.4%相符[4]，提示我國高血壓患者的高同型半胱氨酸血癥患病率較高，可增加患者并發(fā)心腦血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)，需引起重視。此外，本文結(jié)果還顯示,男性高同型半胱氨酸血癥發(fā)生率以及血同型半胱氨酸水平均高于女性，年齡、飲酒情況、體質(zhì)指數(shù)以及基因型在兩個(gè)性別中均與高同型半胱氨酸血癥發(fā)生率呈正相關(guān)性(P<0.05)。提示高血壓患者的性別、年齡、飲酒情況、體質(zhì)指數(shù)以及MTHFR C677T基因多態(tài)性均是影響高同型半胱氨酸血癥發(fā)生率的重要危險(xiǎn)因素?？紤]是因?yàn)槟行噪琢蛎薛?合成酶活性低于女性，可影響血同型半胱氨酸轉(zhuǎn)硫代謝過程，引起血同型半胱氨酸水平的升高，且女性較高的血清雌激素水平也在一定程度上調(diào)節(jié)血同型半胱氨酸的代謝[5]。而隨著年齡的增長，人體腎臟清除率的下降、B族維生素和葉酸生物利用度的下降以及胱硫醚β-合成酶活性的下降，也會(huì)導(dǎo)致血同型半胱氨酸水平的升高[6]。同時(shí)，MTHFR是血同型半胱氨酸代謝的關(guān)鍵酶之一，當(dāng)MTHFR C677T基因突變后，可能會(huì)影響血同型半胱氨酸的代謝而使其水平升高[7]。而飲酒可抑制胱硫醚β-合成酶活性、干擾B族維生素代謝，影響MTHFR活性，肥胖患者則可能飲食結(jié)構(gòu)不當(dāng)，葉酸攝入過少，因此飲酒與體質(zhì)指數(shù)也與高同型半胱氨酸血癥發(fā)生率密切相關(guān)[8]。本文結(jié)果顯示，葉酸干預(yù)后患者的血同型半胱氨酸水平低于葉酸干預(yù)前(P<0.05)。可見對(duì)于高同型半胱氨酸型高血壓患者，可以通過葉酸干預(yù)來降低其血同型半胱氨酸水平，預(yù)防心腦血管疾病的發(fā)生。

綜上所述，高血壓患者高同型半胱氨酸血癥發(fā)生率較高，可增加其發(fā)生心腦血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)于高血壓患者，尤其是男性、年齡偏大、飲酒、體質(zhì)指數(shù)較高以及MTHFR C677T基因突變的高血壓患者，應(yīng)該盡早通過檢測(cè)發(fā)現(xiàn)高同型半胱氨酸血癥，并早期進(jìn)行葉酸干預(yù)。