呼吸窘迫綜合征早產(chǎn)兒血清NT-proBNP BMP-7及TGF-β1水平變化的臨床研究

戚昌麗，張雅琴，李 敏，王文慧

(1.海南省瓊海市人民醫(yī)院兒科，海南 瓊海 571400 2.海南省婦幼保健院兒科，海南 海口 570311)

早產(chǎn)兒呼吸窘迫綜合征(Respiratory Distress Syndrome，RDS)是由于肺泡表面活性物質(zhì)缺乏或失活引起的肺泡進(jìn)行性萎陷，是早產(chǎn)兒最常見的呼吸障礙性疾病之一[1]。RDS早產(chǎn)兒出生后4～12h內(nèi)即出現(xiàn)進(jìn)行性呼吸困難、呻吟、發(fā)紺、吸氣三凹征，嚴(yán)重者發(fā)生呼吸衰竭甚至死亡[2]。臨床研究表明，多種細(xì)胞因子均參與了肺泡局部上皮組織的氧化應(yīng)激代償障礙、炎癥損傷等，推進(jìn)RDS的發(fā)生發(fā)展[3]。血漿氨基末端腦鈉肽前體(Amino-terminal Pro-brain natriuretic peptide，NT-proBNP)是由B型利鈉肽前體(Pro-brain natriuretic peptide，proBNP)裂解所產(chǎn)生的無活性產(chǎn)物，體內(nèi)較為穩(wěn)定，可以敏感且特異地反映左心室功能變化[4]。骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7(Bone morphogenetic protein-7，BMP-7)與轉(zhuǎn)化生長因子-β1(Transforming growth factor-β1，TGF-β1)均屬于TGF-β超家族的重要成員，可以激活下游多種炎癥因子的表達(dá)，參與多種疾病的發(fā)生發(fā)展[5]。臨床研究表明，RDS早產(chǎn)兒血漿NT-proBNP、BMP-7和TGF-β1水平偏高，且與病情發(fā)展密切相關(guān)。本研究分析了RDS患者血清中NT-proBNP、BMP-7和TGF-β1的水平變化與疾病發(fā)展之間的關(guān)系，旨在明確其在RDS治療和預(yù)后中的應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1一般資料：選擇2016年4月到2018年4月在本院確診的106例RDS早產(chǎn)兒，男55例，女51例，胎齡28～35周，體重1000～2230g，順產(chǎn)58例、剖宮產(chǎn)48例。納入標(biāo)準(zhǔn)：均符合《實(shí)用新生兒學(xué)》第4版早產(chǎn)兒RDS診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]：①胎齡28～35周；②出生12h內(nèi)即出現(xiàn)呼吸急促、呼氣性呻吟、吸氣三凹征和發(fā)紺，且癥狀進(jìn)行性加重；③胸片表現(xiàn)為兩肺野透亮度普遍降低、出現(xiàn)磨玻璃樣b病變和支氣管充氣征等RDS特征性改變，均獲得患者及其家屬知情同意，本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核。排除標(biāo)準(zhǔn)：母親有吸煙史者；合并肺部感染或其它影響肺功能的呼吸系統(tǒng)疾病者；合并明顯肝腎功能不全、心、腦血管疾病者；父母或兄弟姐妹有哮喘或特應(yīng)性鼻炎家族史者。根據(jù)胸片疾病嚴(yán)重程度將患兒分為4級：Ⅰ級19例，Ⅱ級41例，Ⅲ級35例，Ⅳ級11例。選擇同期住院、同性別且胎齡相近的非RDS早產(chǎn)兒53例為對照組，男27例，女26例，胎齡28～35周，體重875～2240g，順產(chǎn)58例、剖宮產(chǎn)48例，兩組胎齡、性別、體重、分娩方式等一般資料無顯著差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2試劑與儀器：TGF-β1酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)檢測試劑盒，購自上海富眾生物科技發(fā)展有限公司；BMP-7 ELISA檢測試劑盒，購自上海研晶科技有限公司；羅氏e602電化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)及相應(yīng)配套試劑、定標(biāo)品購自羅氏公司；多功能酶標(biāo)檢測儀，由Bio-Rad公司提供；高速離心機(jī)，由Beckman Coulter公司提供。

1.3檢測指標(biāo)：早產(chǎn)兒出生后1d內(nèi)，用加有分離膠的真空采血管采集靜脈血2～3mL，離心(3000r/min，5min)，取血清于-80℃冰箱保存。采用ELISA檢測所有血清樣品中BMP-7和TGF-β1的水平，采用羅氏e602電化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)測定NT-proBNP的水平，嚴(yán)格參照試劑盒說明操作。

2 結(jié) 果

2.1RDS早產(chǎn)兒血清中NT-proBNP、BMP-7及TGF-β1表達(dá)水平：與對照組相比，RDS早產(chǎn)兒血清中BMP-7、NT-proBNP和TGF-β1的表達(dá)水平明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 RDS早產(chǎn)兒血清中NT-proBNP BMP-7和TGF-β1表達(dá)水平

2.2不同病情程度RDS早產(chǎn)兒血清中NT-proBNP、BMP-7和TGF-β1的表達(dá)：與病理分級為Ⅰ～Ⅱ級RDS早產(chǎn)兒相比，Ⅲ～Ⅳ級RDS早產(chǎn)兒血清BMP-7、NT-proBNP和TGF-β1的表達(dá)水平明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 不同病情程度RDS早產(chǎn)兒血清中NT-proBNP BMP-7和TGF-β1的表達(dá)

2.3NT-proBNP、BMP-7和TGF-β1水平與RDS早產(chǎn)兒病情程度的相關(guān)性分析：相關(guān)性分析結(jié)果顯示，NT-proBNP、BMP-7和TGF-β1均與RDS早產(chǎn)兒病情嚴(yán)重程度為正相關(guān)關(guān)系(r=0.402，P=0.000；r=0.311，P=0.018；r=0.313，P=0.015)，相關(guān)性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.4NT-proBNP、BMP-7和TGF-β1水平對RDS早產(chǎn)兒診斷價值：NT-proBNP診斷RDS早產(chǎn)兒的截點(diǎn)值為3655.92ng/L，靈敏度為88.7%，特異度為3.8%，AUC為0.985；BMP-7診斷的截點(diǎn)值為44.85ng/L，靈敏度為63.2%，特異度為11.3%，AUC為0.829；TGF-β1診斷的截點(diǎn)值為36.73g/L，靈敏度為81.1%，特異度為17.0%，AUC為0.829；BMP-7聯(lián)合TGF-β1診斷的靈敏度為89.6%，特異度為15.1%，AUC為0.934，見圖1、表3。

圖1 NT-proBNP、BMP-7和TGF-β1水平對RDS患兒診斷價值

表3 NT-proBNP BMP-7和TGF-β1水平診斷RDS的ROC特征

3 討 論

RDS是由于早產(chǎn)兒肺發(fā)育尚未成熟、各系統(tǒng)功能均不完善、肺表面活性物質(zhì)缺乏或失活所導(dǎo)致的呼吸障礙性疾病，其長期存在，還可以并發(fā)心力衰竭等嚴(yán)重并發(fā)癥，臨床遠(yuǎn)期預(yù)后較差。目前，RDS最常用且有效的治療措施是呼吸機(jī)通氣和PS替代治療，但這些治療措施易導(dǎo)致肺損傷，影響患兒肺功能結(jié)局。研究RDS發(fā)病機(jī)制，進(jìn)行早期診斷和正確干預(yù)是提高早產(chǎn)兒RDS治愈率，改善肺功能結(jié)局的關(guān)鍵。本研究中，NT-proBNP對RDS具有較高的診斷價值，提示NT-proBNP參與了RDS發(fā)生發(fā)展，臨床可作為其診斷標(biāo)識物。NT-proBNP是由心臟分泌的肽類激素，當(dāng)機(jī)體容量及壓力負(fù)荷異常增加時，心肌細(xì)胞會分泌proBNP再裂解產(chǎn)生BNP及NT-proBNP，BNP是一組有生物學(xué)活性的天然激素，具有較強(qiáng)的排鈉、利尿、舒張血管等功能；NT-proBNP無生物學(xué)活性，具有更長的半衰期，體內(nèi)較穩(wěn)定，臨床常用于心力衰竭的診斷及預(yù)后評估。本研究發(fā)現(xiàn)NT-proBNP在RDS患者中表達(dá)水平明顯升高，且其水平升高與疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。陸俊秀等[7]的研究發(fā)現(xiàn)，RDS早產(chǎn)兒血清中的NT-proBNP水平明顯高于正常早產(chǎn)兒，且其水平會隨著病情的嚴(yán)重程度而增加，本研究結(jié)果與其一致，進(jìn)一步證實(shí)NT-proBNP參與了RDS的發(fā)生發(fā)展，提示RDS早產(chǎn)兒可能伴隨心功能下降，且隨著RDS病情發(fā)展，心功能下降越明顯，存在并發(fā)心力衰竭的風(fēng)險，臨床應(yīng)及早進(jìn)行干預(yù)治療，保護(hù)心功能損傷。

本研究中，BMP-7聯(lián)合TGF-β1對RDS具有較高的診斷價值，臨床可同時檢測BMP-7和TGF-β1作為診斷RDS早產(chǎn)兒的依據(jù)。BMP-7與TGF-β1均為TGF-β超家族的成員，可以促進(jìn)下游細(xì)胞炎癥因子白介素-6或C反應(yīng)蛋白的激活，引起局部肺泡上皮間質(zhì)的炎癥性損傷。本研究發(fā)現(xiàn)，BMP-7和TGF-β1在RDS患者中表達(dá)水平明顯升高，且其表達(dá)量與RDS患者疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。TGF-β1是一組多功能的細(xì)胞因子，可以調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和分化，參與調(diào)控肺炎發(fā)生和肺纖維化過程。趙文飚等[8]的研究發(fā)現(xiàn)，TGF-β1參與調(diào)控急性RDS后的肺纖維化，與RDS發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，與本研究結(jié)果一致，TGF-β1可誘導(dǎo)產(chǎn)生大量炎癥因子促進(jìn)成纖維細(xì)胞增生，還可以上調(diào)α-平滑肌肌動蛋白以及膠原蛋白等的表達(dá)，進(jìn)一步導(dǎo)致肺纖維化病變，提示RDS早產(chǎn)兒伴隨肺纖維化病變，臨床可根據(jù)TGF-β1水平，評估肺纖維化損傷程度，及時調(diào)整治療方案。BMP-7是重要的細(xì)胞間質(zhì)因子，可以調(diào)控動物或人體間充質(zhì)細(xì)胞增殖分化為神經(jīng)組織、骨、軟骨、肌腱等，還可以參與肺泡組織纖維化等病理過程。臨床研究表明[9]，在肺過敏性炎癥反應(yīng)中，BMP-7可以有效拮抗TGF-β1的致纖維化的作用，達(dá)到保護(hù)肺纖維化損傷的作用。李小琴等[10]的研究發(fā)現(xiàn)，在RDS早期，BMP-7會隨著TGF-β1增加而代謝性增加，在RDS后期，BMP-7隨著TGF-β1水平升高呈降低趨勢，本研究結(jié)果與其一致，提示在RDS早產(chǎn)兒的治療中可以補(bǔ)給外源性的BMP-7拮抗TGF-β1引起的纖維化病變，有望成為RDS早產(chǎn)兒治療的新靶點(diǎn)。

綜上所述，RDS患者血清中NT-proBNP、BMP-7和TGF-β1表達(dá)量顯著增加，對RDS具有較高的診斷價值，且其表達(dá)量與疾病發(fā)展嚴(yán)重程度呈顯著正相關(guān)，其水平越高，疾病越嚴(yán)重，臨床可作為其診斷和預(yù)后的標(biāo)識物。本研究不足之處為樣本量較少，但本研究為臨床RDS的診斷和預(yù)后提供了一定的理論依據(jù)。