衣瑞東 杜顯龍 王建萍
(1山東省煙臺佳信林業(yè)規(guī)劃設(shè)計(jì)有限公司,煙臺 264000;2鄒城市香城鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心,鄒城273503;3山東省煙臺市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院,煙臺265500)
獼猴桃是獼猴桃科獼猴桃屬多年生漿果,風(fēng)味鮮美,營養(yǎng)豐富。我國是獼猴桃原產(chǎn)地,近年來,獼猴桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速[1]?!N值隆俏覈J猴桃主栽品種之一,其果肉翠綠,味道甜酸可口,貨架期長,豐產(chǎn)性強(qiáng),種植效益較高[2]。 本試驗(yàn)對‘海沃德’獼猴桃的組培快繁技術(shù)進(jìn)行研究,旨在為‘海沃德’獼猴桃的快速、大量繁殖提供技術(shù)依據(jù)。
以‘海沃德’獼猴桃當(dāng)年生枝條為試驗(yàn)材料。
1.2.1 滅菌 于春季取當(dāng)年生的健壯枝條做外植體,自來水沖洗1~2 h,具體消毒過程:75%酒精浸泡30 s,然后用0.1%升汞浸泡8~12 min,最后無菌水沖洗 5~6 次[3]。
1.2.2 接種 將消毒好的枝條剪成2 cm左右莖段,用解剖刀將其縱剖成兩半,帶芽的部分向上接種到初代培養(yǎng)基上,經(jīng)過30~50 d的生長,分化成苗后,轉(zhuǎn)到增殖培養(yǎng)基上,多次繼代后,選取高約2.0 cm左右的壯芽,將其剪下轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上[4]?;九囵B(yǎng)基為 MS,pH 值為5.8,蔗糖 30 g/L,瓊脂 5.2 g/L[5]。
表1 不同激素濃度配比培養(yǎng)基對‘海沃德’獼猴桃初代培養(yǎng)的影響
由表1知,‘海沃德’獼猴桃在不同激素濃度配比的初代培養(yǎng)基上分化不一樣,在4號培養(yǎng)基上的生長最好,成活率最高,達(dá)90%,平均株高雖不是最高,為2.6 cm,但是生長健壯;在5號培養(yǎng)基上,雖然株高最高,為3.0 cm,成活率也較高,有70%,但是生長較細(xì)弱;在6號培養(yǎng)基上生長最差,成活率僅有16.7%,平均株高僅為0.7 cm,且生長細(xì)弱。
由表2知,‘海沃德’獼猴桃在不同的繼代培養(yǎng)基上,增殖不同。隨著繼代次數(shù)的增多,增殖系數(shù)基本呈上升趨勢。綜合比較,3號培養(yǎng)基最好,第3代增殖系數(shù)達(dá)3.6,且生長健壯,叢生芽多;4號和2號培養(yǎng)基也較好,第3代增殖系數(shù)分別為2.8和2.4,叢生芽較多,生長健壯;在5號、6號培養(yǎng)基上,增殖一般;在1號培養(yǎng)基上最差,第3代增殖系數(shù)僅為1.0,且生長細(xì)弱。
表2 不同激素濃度配比培養(yǎng)基對‘海沃德’獼猴桃繼代增殖的影響
由表3知,4號培養(yǎng)基上生根最好,生根率90%,平均根長2.3 cm,生長粗壯;2號生根情況也很好,生根率為83%,平均根長2.2 cm,粗壯;3號、5號培養(yǎng)基生根率也較高,均為68%,平均根長分別為1.8和2.0 cm;1號、6號培養(yǎng)基生根較差,生根率僅有17%和33%,平均根長僅有0.5 cm和1.2 cm,且均較細(xì)弱。
表3 不同激素濃度配比培養(yǎng)基對‘海沃德’獼猴桃生根的影響
由結(jié)果可知,‘海沃德’獼猴桃最佳進(jìn)瓶培養(yǎng)基為MS+ZT 1.0 mg/L+6-BA 0.1 mg/L+GA30.05 mg/L,最差培養(yǎng)基為MS+ZT 1.0 mg/L+6-BA 0.3 mg/L+GA30.1 mg/L,可見激素濃度過高對獼猴桃初代培養(yǎng)有抑制作用;最佳增殖培養(yǎng)基為MS+ZT 0.5 mg/L+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.05 mg/L,最差培養(yǎng)基為MS+ZT 0.5 mg/L+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.05 mg/L,可見增殖培養(yǎng)需要較高濃度的6-BA;最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.1 mg/L,最差生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.05 mg/L,可見生根培養(yǎng)需要NAA、IBA均衡搭配。