張靜,王淑培, ,游小輝,吳玉瓊,趙泰霞,傅新征
1. 武夷學(xué)院茶與食品學(xué)院(武夷山 354300);2. 西南大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院(重慶 400715)
太子參為石竹科植物孩兒參的干燥塊根,又名孩兒參、童參、米參、四葉參,具有益氣健脾、生津潤肺的功效,用于治療脾虛體倦、食欲不振、病后虛弱、氣陰不足、自汗口渴、肺燥干咳等癥[1-2]。太子參中含有多種微量元素、多糖、環(huán)肽、苷類、氨基酸、揮發(fā)性成分、磷脂類、脂肪酸類、生物堿類、甾醇類及萜類等[3-7],具有心肌保護[8-9]、抗氧化[10]、免疫調(diào)節(jié)[11]、抗糖尿病[12-13]、止咳[14]、抗應(yīng)激[15]及降脂[16]等作用。
保健醋飲料口感醇厚、風(fēng)味濃郁、營養(yǎng)豐富,還具有保健作用,近年來受到消費者青睞,保健醋飲料品種豐富,如蛹蟲草香醋[17]、瑪咖醋[18]、蘆薈紫山藥醋[19]等,但有關(guān)太子參保健醋飲料的研究仍鮮見報道,試驗以太子參為原料,通過酒精發(fā)酵、醋酸發(fā)酵和配方優(yōu)化開發(fā)太子參保健醋飲料,以期為太子參的深加工和太子參保健醋的規(guī)?;a(chǎn)提供數(shù)據(jù)參考。
太子參(購自柘榮縣);耐高糖酵母(湖北安琪酵母股份有限公司);滬釀1.01醋酸菌(山東省食品發(fā)酵工業(yè)研究設(shè)計院);枸杞(購自武夷山);殼聚糖(河南百康化工產(chǎn)品有限公司);L-阿拉伯糖(食品級,安徽豐原發(fā)酵技術(shù)工程研究有限公司);葡萄糖(食品級,天津市致遠化學(xué)試劑有限公司);白砂糖(食品級,國藥集團化學(xué)試劑有限公司);酚酞(分析純,國藥集團化學(xué)試劑有限公司)。
W-CJ-1FD凈化工作臺(蘇州凈化設(shè)備有限公司);PAL-1型糖度計(北京中諾遠東科技有限公司);DPN型電熱恒溫培養(yǎng)箱(上海精宏試驗設(shè)備有限公司);SHZ-82恒溫培養(yǎng)振蕩器(上海躍進醫(yī)療器械有限公司);78-1磁力加熱攪拌器(北京國華科技集團有限公司);Neofuge 23R臺式高速冷凍離心機(上海力申科學(xué)儀器有限公司);UV-6100紫外可見分光光度計(上海元析儀器有限公司);YP50001電子天平(上海佑科儀表有限公司);PHS-25 pH計(上海富眾生物科技有限公司)。
成分調(diào)整:通過添加葡萄糖滿足酒精發(fā)酵要求,配制成太子參2.5%、葡萄糖12%發(fā)酵原液。
醋酸菌株活化:接種0.1%醋酸菌粉,置于轉(zhuǎn)速175 r/min的恒溫?fù)u床中,30 ℃培養(yǎng)48 h;以12%接種量,置于轉(zhuǎn)速175 r/min的恒溫?fù)u床中,30 ℃培養(yǎng)48 h。
殼聚糖澄清劑配制:取準(zhǔn)確稱量的1 g殼聚糖,加入到100 mL 0.2%檸檬酸溶液中,待溶脹后攪拌10 min使其溶解,溶液呈現(xiàn)透明的黏稠狀。
澄清:按0.06%添加量加入殼聚糖澄清劑,在4 000 r/min條件下離心15 min,過濾。
選取發(fā)酵時間、初始糖度、接種量以及發(fā)酵溫度進行試驗,測定酒精度和殘?zhí)橇?,確定酒精發(fā)酵參數(shù)。
選取發(fā)酵溫度和時間、接菌量、pH進行試驗,測定醋酸含量,確定醋酸發(fā)酵參數(shù)。
將影響太子參保健醋飲料的色澤、香氣、滋味、體態(tài)4個方面作為評價標(biāo)準(zhǔn),對太子參原醋添加量、白砂糖添加量、L-阿拉伯糖添加量、枸杞汁添加量4個單因素進行優(yōu)化。
1.7.1 理化指標(biāo)測定
醋酸的測定:按GB/T 5009.41—2003中的方法測定。酒精度的測定:按GB 5009.225—2016中酒精計法測定。殘?zhí)橇康臏y定:使用手持糖度儀。
1.7.2 感官評價
隨機選取20名評分員組成感官評定小組,對醋飲料進行評價和描述,感官評價標(biāo)準(zhǔn)見表1。
表1 感官評價表
2.1.1 培養(yǎng)時間對酒精發(fā)酵的影響
由圖1可知,在發(fā)酵時間0~72 h,酵母菌迅速利用葡萄糖產(chǎn)生乙醇,使酒體中殘?zhí)橇吭絹碓叫?,酒精度不斷上升?2 h之后酒精度和殘?zhí)橇炕静蛔儯S著發(fā)酵時間延長,酵母菌活力下降且容易出現(xiàn)自溶現(xiàn)象,導(dǎo)致太子參酒滋味變苦澀,影響酒體品質(zhì)。因此發(fā)酵時間不宜太長,選定最適發(fā)酵時間72 h。
2.1.2 初始糖度對酒精發(fā)酵的影響
由圖2可知,初始糖度7%~16%時,隨著糖度增加,發(fā)酵液中酒精濃度隨之增加,這是由于酒精是由葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)生,葡萄糖濃度變高,酒精度持續(xù)增高。糖度16%時酒精度達到最高值,隨后下降,可能是因為發(fā)酵液中的糖分過高,較高的滲透壓下,酵母利用葡萄糖產(chǎn)生酒精的能力降低。因而選擇初始糖度16%。
圖2 初始糖度對酒精發(fā)酵的影響
2.1.3 接種量對酒精發(fā)酵的影響
從圖3可知,隨著接種量增多,酒精度也增高,接種量0.5%時酒精度達到最大值,之后酒精度呈緩慢下降趨勢。由于接種量較大時,導(dǎo)致酵母菌消耗過多營養(yǎng)成分或產(chǎn)生較多副產(chǎn)物,不僅會影響酒體的滋味還會使酒精度下降及殘?zhí)橇可仙?。因此,選擇接菌量0.5%。
圖3 接種量對酒精發(fā)酵的影響
2.1.4 培養(yǎng)溫度對酒精發(fā)酵的影響
由圖4可知,隨著培養(yǎng)溫度增高,酒精度顯著增加,殘?zhí)橇縿t減少。溫度28 ℃時,酒精度最高,溫度繼續(xù)增高,酒精度開始降低,殘?zhí)橇縿t變大。這是由于溫度過高會降低酵母活性,加快酵母細(xì)胞老化,不利于酒精發(fā)酵,表現(xiàn)為酒精度下降,殘?zhí)橇可仙?。因此,選擇培養(yǎng)溫度28 ℃。
2.1.5 酒精發(fā)酵的工藝條件
初始糖度16%的太子參原液中接入0.5%耐高糖酵母菌粉,于溫度28 ℃、厭氧培養(yǎng)72 h,獲得酒精度5.9%的發(fā)酵酒。
2.2.1 培養(yǎng)溫度與培養(yǎng)時間對醋酸發(fā)酵的影響
由圖5可知,溫度對醋酸發(fā)酵的影響大小為:32℃發(fā)酵效果>29 ℃發(fā)酵效果>26 ℃發(fā)酵效果>35 ℃發(fā)酵效果>23 ℃發(fā)酵效果。發(fā)酵溫度32 ℃時,醋酸產(chǎn)量最高,因此選擇太子參原醋發(fā)酵溫度32 ℃。隨著發(fā)酵時間增加,發(fā)酵液中醋酸含量不斷增加,發(fā)酵時間96 h時,醋酸含量最高,之后基本穩(wěn)定。這是由于發(fā)酵液中營養(yǎng)物質(zhì)是固定的,發(fā)酵96 h后,可以發(fā)酵產(chǎn)生醋酸的營養(yǎng)物質(zhì)基本利用完畢,即使延長發(fā)酵時間,醋酸含量難以增加。因此,選擇最佳培養(yǎng)時間96 h,最佳培養(yǎng)溫度32 ℃。
圖4 培養(yǎng)溫度對酒精發(fā)酵的影響
圖5 培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間對醋酸發(fā)酵的影響
2.2.2 接菌量對醋酸發(fā)酵的影響
由圖6可以看出,接菌量6%~12%時,隨著接菌量增加,發(fā)酵液中醋酸含量顯著增高,接菌量12%時醋酸含量達到最高,隨后逐漸降低。由于醋酸菌接種量大小直接影響醋酸發(fā)酵,接菌量越小,產(chǎn)酸速度越慢且醋酸產(chǎn)量少。接菌量過大,醋酸菌細(xì)胞增殖會消耗掉過多營養(yǎng)物質(zhì),且生成大量代謝廢物,致使菌細(xì)胞過早的老化與自溶,影響太子參醋的風(fēng)味,因而選擇最適醋酸菌接種量12%。
2.2.3 pH對醋酸發(fā)酵的影響
由圖7可知,在pH 4.0~6.0,醋酸含量跟隨pH變化先增長后下降。pH 5.0時,醋酸含量最大。由于氫離子濃度對醋酸菌的生命活動和代謝速率有顯著影響,pH過高或過低均不適合醋酸菌的生長繁殖,因而選擇pH 5.0為宜。
圖6 接菌量對醋酸發(fā)酵的影響
圖7 pH對醋酸發(fā)酵的影響
2.2.4 醋酸發(fā)酵的工藝條件
以12%接菌量,將醋酸菌液接入到pH 5.0,酒精度5.9%的太子參酒中,于32 ℃條件下,發(fā)酵96 h,制得的太子參原醋的醋酸含量最高,可達4.06%。
2.3.1 單因素試驗
2.3.1.1 太子參原醋添加量對醋飲料的影響
圖8所示是太子參原醋添加量對醋飲料的影響,太子參原醋添加量10%~30%范圍內(nèi),醋飲料的感官評分隨太子參原醋添加量變化先增加后減少,太子參原醋添加量少會使醋飲料在滋味上呈現(xiàn)甜味過重,酸味較淡的情況。添加量25%時,醋飲料的感官評分達到最高值,因此選定太子參原醋添加量為20%,25%和30%進行正交試驗。
圖8 太子參原醋添加量對醋飲料的影響
2.3.1.2 白砂糖添加量對醋飲料的影響
如圖9所示,白砂糖添加量8%時,醋飲料的感官評分最高。添加量過少會造成甜味不明顯,酸味過重的滋味,添加量多,甜味太高。在白砂糖添加量5%,8%和11%條件下,色澤、滋味、體態(tài)都處于較好水平。因此,選擇這3個水平進行太子參醋飲料正交試驗。
圖9 白砂糖添加量對醋飲料的影響
2.3.1.3 L-阿拉伯糖添加量對醋飲料的影響
由圖10可知,L-阿拉伯糖添加量0.8%時,醋飲料的感官評分最高,添加量增多時,會使醋飲料甜味稍重,感官評分下降。因此,選擇滋味、色澤、體態(tài)都呈現(xiàn)較好的0.5%,0.8%和1.1%的L-阿拉伯糖添加量進行正交試驗。
圖10 L-阿拉伯糖添加量對醋飲料的影響
2.3.1.4 枸杞汁添加量對醋飲料的影響
如圖11所示,枸杞汁添加量15%~35%時,醋飲料的感官評分隨著枸杞汁添加量變化先增加后不斷減少,過量添加枸杞汁會導(dǎo)致枸杞味過重,色澤也會過深。所以取15%,20%和25%作為太子參醋飲料調(diào)配中枸杞汁添加量的水平。
圖11 枸杞汁添加量對醋飲料的影響
2.3.2 正交試驗結(jié)果與分析
在單因素試驗基礎(chǔ)上進行正交試驗,因素水平見表2,正交試驗結(jié)果見表3。
由表3可知,R的大小反映各因素對太子參醋飲料影響的程度,對太子參醋飲料品質(zhì)影響因素主次為:太子參發(fā)酵醋原液>枸杞汁>白砂糖>L-阿拉伯糖。通過k值可知最佳配方組合為A3B2C1D2,即太子參醋添加量30%、白砂糖添加量8%、L-阿拉伯糖添加量0.5%、枸杞汁添加量20%。對最優(yōu)組合A3B2C1D2進行驗證試驗,感官評分為92分,證明通過正交試驗得到的優(yōu)化工藝方案可行。
表2 正交試驗因素水平表
表3 正交表及試驗結(jié)果分析
試驗以太子參為原料,通過成分調(diào)整,接種酵母菌進行酒精發(fā)酵,最佳工藝條件為:初始糖度16%、酵母菌接種量0.5%、發(fā)酵溫度28 ℃、發(fā)酵時間72 h,此條件下發(fā)酵液酒精度達到5.9%。接種醋酸菌進行醋酸發(fā)酵,最佳工藝條件為:醋酸菌接菌量12%、pH 5.0、發(fā)酵溫度32 ℃、發(fā)酵時間96 h,此條件下可得到醋酸含量4.06%的太子參發(fā)酵原醋。以感官評價為指標(biāo),利用單因素試驗和正交試驗獲得的太子參醋飲料最佳配方為:太子參醋添加量25%、枸杞汁添加量20%、白砂糖添加量8%、L-阿拉伯糖添加量0.8%。此配方下獲得的醋飲料色澤鮮亮,酸甜可口,滋味醇厚。