免疫組化指標(biāo)Her-2聯(lián)合腫瘤標(biāo)志物檢測在胃癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值

李隆昌，王大鵬

鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院，河南 鄭州 450008

胃癌屬于多發(fā)消化系統(tǒng)惡性腫瘤，治療方法較多，包括手術(shù)、放療、化療等。但多數(shù)胃癌患者發(fā)病早期癥狀不典型，極易被患者與醫(yī)生忽視，導(dǎo)致出現(xiàn)典型癥狀確診時(shí)已處于中晚期，喪失最佳手術(shù)時(shí)機(jī)，需經(jīng)放化療治療，總體效果不佳[1]。故臨床采取積極措施，提升胃癌早期診斷準(zhǔn)確性，指導(dǎo)治療方案制定，改善預(yù)后，具有重要臨床意義。目前認(rèn)為，腫瘤標(biāo)志物在胃癌診斷中發(fā)揮重要作用，可鑒別診斷腫瘤組織與正常組織，且能判斷是否存在腫瘤[2]。但部分血清腫瘤標(biāo)志物單獨(dú)檢測時(shí)靈敏度較低，影響胃癌早期診斷準(zhǔn)確性。近年來，有學(xué)者開始關(guān)注特異性免疫組化指標(biāo)在胃癌診斷中的應(yīng)用，發(fā)現(xiàn)人表皮生長因子受體2(Her-2)與胃癌發(fā)生、發(fā)展有一定關(guān)系[3]。但臨床就該問題研究尚不多。本研究重點(diǎn)分析了胃癌中血清腫瘤標(biāo)志物與Her-2表達(dá)聯(lián)合診斷價(jià)值，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料隨機(jī)抽樣法選取2018年3月至2019年3月本院58例胃癌患者為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《胃癌規(guī)范化診療指南》[4]中原發(fā)性胃癌診斷標(biāo)準(zhǔn)；②經(jīng)手術(shù)病理檢查確診，術(shù)前未行放療、化療、免疫治療等；③臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病、免疫系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病等可能對(duì)腫瘤標(biāo)志物檢測產(chǎn)生干擾的疾?。虎谖葱蠬er-2、腫瘤標(biāo)志物檢測。本組患者中，男30例，女28例；年齡31～76歲，平均(55.48±8.17)歲；TNM分期：Ⅰ期14例，Ⅱ期23例，Ⅲ期17例，Ⅳ期4例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：有36例，無22例。

1.2 方法

1.2.1 血清腫瘤標(biāo)志物檢測 術(shù)前，抽取6mL清晨空腹靜脈血，1500r/min離心，持續(xù)15mnin，取上清液。以酶聯(lián)免疫吸附法檢測腫瘤標(biāo)志物，包括癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CЕA)、糖鏈抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)、糖鏈抗原72-4(carbohydrate antigen 72-4,CA72-4)、糖鏈抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)，試劑盒均購自北京中杉生物技術(shù)有限公司。CЕA、CA125、C A72-4、C A19-9陽性標(biāo)準(zhǔn)分別為＞5n g/m L、＞35U/ mL、＞6.9U/mL、＞35U/mL。

1.2.2 Her-2表達(dá)檢測 經(jīng)胃鏡取胃黏膜標(biāo)本，以3.7%中性甲醛溶液固定。常規(guī)脫水，石蠟包埋，連續(xù)切片，厚度4μm。采用免疫組化法檢測胃癌組織中Her-2表達(dá)，試劑盒購自北京中杉生物技術(shù)有限公司。經(jīng)Max Vision兩步法染色，加入DAB溶液顯色，持續(xù)1～2min。蘇木精襯染，脫水，透明、中性樹膠封固。陰性對(duì)照采用PBS液代替一抗進(jìn)行。依據(jù)細(xì)胞膜是否存在棕黃色顆粒樣沉淀判斷，以無染色或＜10%細(xì)胞存在細(xì)胞膜著色，為0；≥10%細(xì)胞存在輕微膜著色，為+；≥10%細(xì)胞的膜著色較弱，為++；≥10%細(xì)胞存在中到強(qiáng)度膜著色，為+++。低表達(dá)為(0)、(+)，即Her-2陰性；過度表達(dá)為(++)、(+++)，即Her-2陽性。

1.3 觀察指標(biāo)①比較血清腫瘤標(biāo)志物、Her-2表達(dá)與臨床病理特征關(guān)系；②比較CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9、Her-2單獨(dú)與聯(lián)合檢測靈敏度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析以SPSS20.0軟件分析。本研究中計(jì)數(shù)資料以χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 血清腫瘤標(biāo)志物、Her-2表達(dá)與臨床病理特征關(guān)系不同臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌患者CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9、Her-2表達(dá)陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 血清腫瘤標(biāo)志物、Her-2表達(dá)與臨床病理特征關(guān)系比較(例)

2.2 血清腫瘤標(biāo)志物、Her-2診斷胃癌的靈敏度CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9、Her-2聯(lián)合檢測靈敏度高于各項(xiàng)單獨(dú)檢測(P＜0.05)，見表2。

3 討論

現(xiàn)階段，胃癌已發(fā)展成為嚴(yán)重威脅人們身心健康、生活質(zhì)量的重要疾病之一，且病死率較高。目前認(rèn)為，臨床提升胃癌患者治療效果、改善預(yù)后的關(guān)鍵為早期篩查、診斷。但傳統(tǒng)胃鏡檢查較難滿足臨床分期評(píng)估要求；CT、MRI等影像學(xué)手段雖可提升臨床分期評(píng)估準(zhǔn)確率，但在診斷早期胃癌中存在一定局限。研究發(fā)現(xiàn)腫瘤發(fā)生、發(fā)展中腫瘤標(biāo)志物發(fā)揮重要作用，且可進(jìn)行診斷鑒別，常見的有CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9等[5]。其中，CЕA為含較多糖類的蛋白質(zhì)。但早期胃癌診斷中單純CЕA檢測應(yīng)用受限，靈敏度較低，僅為22%[6]。本次研究中，CЕA檢測靈敏度為22.41%，與此相符。此外，Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者CЕA陽性率更高，推測CЕA表達(dá)與胃癌患者臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有一定相關(guān)性，分析CЕA可促使細(xì)胞排列出現(xiàn)錯(cuò)亂，導(dǎo)致癌細(xì)胞位置改變，而一旦癌細(xì)胞脫落，可能引發(fā)浸潤轉(zhuǎn)移。CA125是自上皮性卵巢癌抗原中檢測出來的一種糖蛋白，可被單克隆抗體OC125結(jié)合。研究發(fā)現(xiàn)，胃癌中約90%患者血清CA125與病程發(fā)展、轉(zhuǎn)移有一定相關(guān)性[7]。CA72-4屬于高分子黏蛋白，在人胚胎組織、部分惡性腫瘤組織中存在高表達(dá)，但在正常分化組織中表達(dá)較低。CA19-9屬于糖類腫瘤標(biāo)志物，在肝、胃、胰等細(xì)胞中廣泛分布，早期可用于篩查、診斷胰腺癌。本次研究發(fā)現(xiàn)，CA125、CA72-4、CA19-9對(duì)胃癌診斷靈敏度分別為10.34%、20.69%、12.07%，且不同臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者CA125、CA72-4、CA19-9陽性率存在差異，故推測這些指標(biāo)也在胃癌診斷中有一定的價(jià)值。

表2 血清腫瘤標(biāo)志物、Her-2診斷胃癌的靈敏度分析(%)

此外，研究發(fā)現(xiàn)，胃癌血管形成、侵襲及轉(zhuǎn)移過程中，Her/erbB家族信號(hào)通路也發(fā)揮重要作用，影響腫瘤細(xì)胞增殖分化、遷移、黏附等過程[8]。而Her-2是Her/erbB家族重要成員之一，在正常成年人組織中表達(dá)較低，而一旦機(jī)體處于病理狀態(tài)，Her-2可出現(xiàn)過表達(dá)，抑制腫瘤細(xì)胞凋亡，且能促進(jìn)腫瘤心血管再生，促使腫瘤細(xì)胞侵襲力增加[9]。研究證實(shí)，胃癌患者中，相較于非癌組織，癌組織存在Her-2基因擴(kuò)增、蛋白質(zhì)過表達(dá)現(xiàn)象[10]。本研究中，Her-2表達(dá)靈敏度為58.62%，且不同臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者Her-2表達(dá)陽性率存在差異。故推測Her-2與血清腫瘤標(biāo)志物異常升高在胃癌早期輔助診斷中發(fā)揮重要作用，有利于評(píng)估臨床分期，判斷淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9、Her-2聯(lián)合檢測靈敏度高達(dá)91.38%，明顯優(yōu)于各項(xiàng)單獨(dú)檢測，這說明Her-2、血清腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測可提升胃癌早期診斷靈敏度，在診斷中應(yīng)用價(jià)值更高。

綜上所述，Her-2、血清腫瘤標(biāo)志物(CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9)聯(lián)合檢測可提升胃癌早期診斷靈敏度。