灰樹花1號工廠化生產(chǎn)栽培技術(shù)*

趙敬聰，楊成梅，杜寶勝，秦存寶，劉孝利，高 霞，王振利，李曉博，謝紅艷，劉存博，萬魯長**

（1.山東省科創(chuàng)食用菌產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究院，山東 鄒城 273500；2.微山縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，山東 微山 277600；3.鄒城市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，山東 鄒城 273500；4.山東福禾菌業(yè)科技股份有限公司，山東 鄒城 273500；5.山東恒發(fā)生物科技有限公司，山東 鄒城 273500；6.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所/農(nóng)業(yè)部廢棄物基質(zhì)化利用重點實驗室，山東濟(jì)南250100；）

灰樹花（Grifola frondosa） 俗稱“舞茸”，是一種食藥兼用的大型真菌[1]。其子實體肉質(zhì)，柄短呈珊瑚狀分枝，重疊成叢，其外觀婀娜多姿、層疊似菊；其氣味、清香四溢；其肉質(zhì)脆嫩爽口，百吃不厭[2]，同時具有豐富的營養(yǎng)價值和很高的藥用價值，深受消費者歡迎[3-4]。

目前國內(nèi)灰樹花工廠化栽培尚未實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)，主要制約因素是：出菇溫度一般要求15℃～20℃之間，工廠化栽培需配備空調(diào)設(shè)施；出菇期間要求CO2濃度較低，需控制在0.1%以下，高于此濃度范圍，灰樹花畸形率高，甚至不開片；出菇過程菇房需要較大通風(fēng)，該關(guān)鍵因素與溫度、濕度、CO2濃度條件形成矛盾。山東省科創(chuàng)食用菌產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究院選育中溫“灰樹花1號”，出菇溫度為18℃～20℃，采用側(cè)排風(fēng)空調(diào)、LED燈帶、3 μm超聲波加濕器等設(shè)施，解決了灰樹花工廠化周年生產(chǎn)的瓶頸問題，其栽培關(guān)鍵技術(shù)如下。

1 供試材料

菌種來源于山東省科創(chuàng)食用菌產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究院。

2 灰樹花1號外觀形態(tài)和生物學(xué)特性

2.1 外觀形態(tài)

灰樹花1號子實體肉質(zhì)、短柄、呈珊瑚狀分枝，末端生扇形至匙形菌蓋，重疊成叢，菌蓋直徑3 cm～4 cm，菌蓋厚2 mm～3 mm，褐色[5]。表面光滑，有反射性條紋，邊緣薄，內(nèi)卷。菌肉白，菌管長1 mm～2 mm，管孔延生，孔面白色至淡黃色，管口多角形，平均每毫米1個～3個。孢子無色、光滑，卵圓形至橢圓形。菌絲壁薄、分枝、有橫隔，無鎖狀聯(lián)合[6]。

2.2 生物學(xué)特性

灰樹花1號屬于中溫恒溫結(jié)實型木腐生型食用菌類[7-8]，好氧，菌絲生長最適溫度22℃～24℃，出菇最適溫度18℃～20℃。栽培基質(zhì)最適水的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為64%～66%，pH自然，出菇階段最適空間相對濕度85%～90%。CO2的體積分?jǐn)?shù)為0.1%以下，光照強(qiáng)度為白天 300 lx～500 lx[9-10]。

3 栽培技術(shù)

3.1 菌種制作

3.1.1 母種制作

液體培養(yǎng)基配方：土豆200 g、葡萄糖20 g、蛋白胨 5 g，磷酸二氫鉀 3.0 g、硫酸鎂 1.5 g，水1 000 mL，pH自然。

將稱量好的土豆去皮，切片，放入水中煮軟，取其過濾水，加入以上稱量好的試劑，溶解后分裝到1 000 mL三角瓶中，每瓶裝液量600 mL，蓋好硅膠塞，放入滅菌鍋，121℃，30 min，滅菌結(jié)束后，待三角瓶冷卻至23℃，接入灰樹花1號菌種，放入搖床，170 r·min-1、25℃培養(yǎng)，13 d后即可接入發(fā)酵罐中，發(fā)酵完成原種見圖1。

如圖1所示，發(fā)酵完成菌種，菌球大小均勻，靜置后菌液不分離。

3.1.2 液體發(fā)酵罐制作

液體發(fā)酵罐配方：豆粕粉3.0 kg、酵母膏2.5 kg、白砂糖 10.0 kg、磷酸二氫鉀 1.0 kg、硫酸鎂 0.5 kg，水800 L，pH自然。

將稱量好的物料投入發(fā)酵罐中，封閉好后，通入高溫蒸汽，125℃滅菌60 min。滅菌結(jié)束后，待罐溫降至23℃，接入發(fā)酵完成的原種，23℃培養(yǎng)10 d后為發(fā)酵完成的菌種，即可接入菌包中。

如圖2所示，發(fā)酵完成的液體菌種，菌球大小均勻，發(fā)酵罐進(jìn)氣關(guān)閉后，菌液不分離。

3.2 菌包制作

栽培配方：棉籽殼42%、硬雜木40%、麥麩16%、紅糖1%、石膏1%，pH自然，含水量65%。

按照配方比例稱取各種原料，逐一加入到攪拌機(jī)內(nèi)，木屑和棉籽殼提前24 h預(yù)濕，混合均勻后，傳入培養(yǎng)料沖壓機(jī)內(nèi)，裝入規(guī)格17 cm×38 cm的聚丙烯塑料袋，每包重量 1.2 kg～1.3 kg，料高 19 cm，套好蓋子套環(huán)。裝袋結(jié)束后立即放入高壓滅菌鍋內(nèi)，125℃滅菌3 h，滅菌結(jié)束后進(jìn)入冷卻車間冷卻，菌包中心溫度降至23℃，進(jìn)行接種。

如圖3所示，經(jīng)滅菌后的菌包，放置在冷卻間，冷卻至23℃后，菌包高度一致，菌袋上無水珠，即可進(jìn)行接種。

3.3 接種

接種室內(nèi)采用40 W紫外線滅菌燈進(jìn)行消毒滅菌。經(jīng)過滅菌的塑料袋必須冷卻至23℃左右時方可接種。接種前要先做好2項準(zhǔn)備工作。

1）選擇質(zhì)量合格的液體菌種。經(jīng)檢測確認(rèn)菌種無隱性污染，菌球濃密和菌種氣味正常，無臭味、酸味等異味。并且菌種未老化之前使用，菌種純度降低不能使用。

2）接種前工作人員雙手戴無菌手套，接種時在風(fēng)機(jī)過濾機(jī)組FFU下嚴(yán)格無菌操作，正確掌握熟練的接種技術(shù)，動作力求準(zhǔn)確迅速。接種槍頭以及接種管道用124℃，0.14 MPa的蒸汽滅菌30 min，冷卻結(jié)束后可以正式開始接種。將已接種菌袋放在24℃培養(yǎng)室培養(yǎng)。

如圖4所示，采用自動接種機(jī)接種，每包接種量一致，菌包后期生長速度一致。

3.4 培養(yǎng)發(fā)菌

接種好的菌袋在運往發(fā)菌室前，先對養(yǎng)菌室進(jìn)行消毒，采用0.15%消毒水噴洗養(yǎng)菌室內(nèi)棚架及地面。將接完種的菌袋放入發(fā)菌室，溫度控制在24℃，空氣相對濕度控制在70%以下，避光，定期觀察記錄菌絲生長情況。培養(yǎng)過程應(yīng)盡可能保持培養(yǎng)室內(nèi)溫度的穩(wěn)定。培養(yǎng)10 d左右，菌包內(nèi)菌絲在蔓延過程中降解培養(yǎng)基，產(chǎn)生生物熱，菌包溫度會比室溫高出2℃～3℃，此時，溫度控制在22℃為適宜，在培養(yǎng)過程盡可能不開燈，保持培養(yǎng)室的黑暗。培養(yǎng)期間CO2體積分?jǐn)?shù)控制在0.3%以內(nèi)。

采用液體菌種的菌袋一般情況下25 d左右菌絲可長至袋底，此后再后熟10 d左右，讓菌袋的菌絲由營養(yǎng)生長階段轉(zhuǎn)入生殖生長階段就可移入出菇房。

如圖5所示，在培養(yǎng)室培養(yǎng)的菌包，菌絲強(qiáng)壯，發(fā)菌速度一致。

3.5 栽培管理

3.5.1 催蕾階段

1）割口處理：用75%酒精棉擦拭手術(shù)刀，用酒精燈火焰灼燒后，待冷卻至常溫，選擇側(cè)面菌包菌絲濃密部位，割“V”形口，邊長1.5 cm～2.0 cm，割口處的塑料袋揭開再放下，割口完畢后，平鋪至床架上，割口處向上臥式放置。

如圖6所示，采用床架臥式出菇的方式，菌包劃“V”口。

2） 調(diào)控管理：菇房溫度設(shè)置為18℃～20℃，濕度保持85%～90%，CO2體積分?jǐn)?shù)控制在0.2%以下，白天光照強(qiáng)度300 lx～500 lx，晚上黑暗處理。5 d左右，割口處菌絲泛黃，開始出現(xiàn)原基，見圖7。

如圖7所示，灰樹花的原基最開始為淺灰色，原基稍微大些為深灰色。

3.5.2 出菇管理

菇房溫度17℃～22℃，濕度保持90%～95%，CO2體積分?jǐn)?shù)控制0.1%以下，白天光照500 lx～1 000 lx，晚上避光，培養(yǎng)17 d～19 d，等菌蓋呈扇形，形成菌孔，七分～八分成熟即可采收。

如圖8所示，灰樹花隨著原基的長大，先形成密密麻麻的小疙瘩，之后隨著生長，每個小疙瘩開始分化為片狀。

3.6 采收

采收要根據(jù)每朵灰樹花子實體的發(fā)育情況判定，當(dāng)菌蓋邊緣稍向內(nèi)卷，菌蓋背面剛形成菌管深度不超過1 mm，尚未釋放孢子，單朵產(chǎn)量可達(dá)250 g，子實體達(dá)到七分～八分成熟，散發(fā)濃郁菇香時，即可采收。采收時要戴手套，手扶住栽培袋套環(huán)部位，一手托住菇體的底面，向上抬起即可將灰樹花折下，再用小刀切除基部，輕柔碼放至托盤上。

3.7 包裝及保藏

采收后的灰樹花放入冷庫預(yù)冷后，裝入蔬菜包裝盒內(nèi)，放入泡沫箱封好，于2℃冷庫保藏?；覙浠ㄒ部蓵窀善?。