羅山縣2019年高致病性禽流感血清學(xué)調(diào)查與分析

唐天友

禽流感是由A型流感病毒引起的一種禽類（家禽和野禽）傳染病。病毒根據(jù)血凝素（HA）和神經(jīng)氨酸酶（NA）的抗原性不同進(jìn)行分類，目前，HA分為H1～H16亞型，NA分為N1～N9亞型。由H5、H7亞型毒株引起的疾病稱為高致病性禽流感（HPAI），發(fā)病急，發(fā)病率和病死率可達(dá)100%，被世界動物衛(wèi)生組織（OIE）列為法定通報動物疫病，被我國列為優(yōu)先防控和重點(diǎn)防范的一類動物疫病。2004年和2017年，我國分別對H5、H7亞型禽流感實(shí)行強(qiáng)制免疫和抗體監(jiān)測，并要求采用重組禽流感病毒（H5+H7）二價滅活疫苗（H5N1Re-8株+H7N9H7-Re1株）集中免疫。為了解羅山縣高致病性禽流感免疫效果，制定科學(xué)合理的免疫程序，開展評價工作，正確判斷禽流感防控形勢，2019年10月，羅山縣畜牧局組織開展本次免疫效果監(jiān)測，以便提供可靠的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)參考。

1、材料與方法

（1）抽樣設(shè)計抽樣設(shè)計方法采用先群體抽樣再個體抽樣。根據(jù)《2019年羅山縣動物疫病監(jiān)測與流行病學(xué)調(diào)查計劃》，按照估計免疫抗體陽性率方法，設(shè)85%的預(yù)期免疫抗體合格率（p），10%的可接受誤差（d），在95%的置信水平（CL）下，根據(jù)公式N=1.962×p（1–p）/d2計算出抽樣場數(shù)N=49個，并結(jié)合羅山縣春秋季強(qiáng)制免疫實(shí)際，對11個鄉(xiāng)鎮(zhèn)隨機(jī)抽樣50個場群開展集中監(jiān)測。場群內(nèi)采取系統(tǒng)抽樣，依據(jù)場群分類不同，在家禽養(yǎng)殖場抽取1440份，活禽交易場所抽取150份，散養(yǎng)戶抽取30份，共采集樣品1670份。具體抽樣設(shè)計見表1。

（2）樣品采集無菌操作翅靜脈采集雞血液，每只2～3ml，3000r/min離心10～15min，析出血清，做好標(biāo)記，-20℃保存?zhèn)錂z。

（3）檢測試劑禽流感H5亞型病毒（Re-8株）血凝抑制試驗(yàn)抗原，批號：2019062;禽流感H7亞型病毒（H7N9株），批號：2019071，以上兩種試劑均為哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)有限公司產(chǎn)品。

（4）檢測方法與判斷標(biāo)準(zhǔn)按照《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T18936—2003）中血凝抑制試驗(yàn)（HI）檢測H5、H7亞型禽流感免疫抗體。判斷標(biāo)準(zhǔn)按照個體HI抗體效價≥24為免疫合格個體，群體免疫抗體合格率≥70%為免疫合格群體，H5和H7群體免疫抗體合格率均≥70%為免疫合格場群。

2、結(jié)果

（1）H5、H7亞型禽流感免疫整體情況50個場群中，有32個場群使用重組禽流感（H5+H7）二價滅活疫苗，占場群數(shù)量的64.0%（32/50）;H5亞型場群合格率為76.0%（38/50），個體合格率為86.3%（1442/1670）;H7亞型場群合格率為50.0%，個體抗體合格率為59.5%（993/1670）。養(yǎng)殖場的H5、H7亞型群體合格率和個體合格率均高于散養(yǎng)戶和活禽交易點(diǎn)，且差異顯著（P<0.05）。

（2）使用不同疫苗的場群抗體合格率比較在50個場群中，32個使用（H5+H7）二價滅活疫苗，18個使用其他禽流感類型疫苗和未免疫。比較使用（H5+H7）二價滅活疫苗場群與使用其他疫苗和未免疫場群的H5、H7亞型免疫抗體，可以看出前者個體免疫抗體合格率均大于70%，分別比后者高出27.5%、187.3%，差異極顯著（P<0.01）;同時，前者群體合格率也大于未使用的群體合格率，分別高于37.9%、124.8%，差異極顯著（P<0.01）。不使用（H5+H7）二價滅活疫苗導(dǎo)致禽流感群體免疫合格率低于70%的風(fēng)險是使用（H5+H7）二價滅活疫苗的2.6倍（OR=2.6，95%CL：1.1～13.0）。

（3）群間分布家禽種類不同，H5、H7亞型禽流感場個體免疫抗體情況存在差別。雞和其他禽類（鴨、鵝）全部場群合格率分別為50%和0，無統(tǒng)計學(xué)意義。雞和其他禽類（鴨、鵝）的H5亞型個體合格率分別為86.1%、91.4%，差異不顯著（P>0.05）;H7亞型個體合格率分別為62.1%、0，差異極顯著（P<0.01）。

（4）空間分布分析羅山縣高致病性禽流感空間分布，結(jié)果顯示，羅山縣11個鄉(xiāng)鎮(zhèn)區(qū)域內(nèi)群體合格率和個體合格率不均衡，存在較大差異。D、F、K鄉(xiāng)鎮(zhèn)的H5、H7亞型場群合格率和個體合格率均高于70%，占鄉(xiāng)鎮(zhèn)總數(shù)的27.3%（3/11），符合國家要求，但是A、E、H、I和J鄉(xiāng)鎮(zhèn)的H7亞型免疫抗體檢測不到，占鄉(xiāng)鎮(zhèn)總數(shù)的45.5%（5/11）。

3、小結(jié)與討論

高致病禽流感對養(yǎng)禽業(yè)危害巨大，我國將高致病性禽流感納入強(qiáng)制免疫計劃，實(shí)行H5亞型和H7亞型高致病性禽流感100%免疫。農(nóng)業(yè)部在2017年秋季，要求使用H5+H7二價滅活疫苗替代重組禽流感病毒H5二價或三價滅活疫苗，對家禽實(shí)施免疫。

本次檢測是在秋季強(qiáng)制免疫21天后進(jìn)行的抽樣抗體檢測，從本調(diào)查檢測數(shù)據(jù)看，場群免疫密度達(dá)不到100%，進(jìn)一步對抽樣檢測點(diǎn)調(diào)查，主要是對該病重視性不夠，部分養(yǎng)禽場戶沒有按照要求替換使用H5+H7二價滅活疫苗。

4、結(jié)論

本次血清學(xué)調(diào)查結(jié)果表明，使用H5+H7二價滅活疫苗免疫可以達(dá)到免疫保護(hù)水平，效果優(yōu)于未使用的。建議加大宣傳力度，要求家禽養(yǎng)殖場戶使用H5+H7二價滅活疫苗，對免疫不合格者進(jìn)行補(bǔ)免。

（作者單位：464200河南省羅山縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所）