外用復(fù)合卵黃抗體在淺Ⅱ度燒傷創(chuàng)面愈合過程中抗感染作用的初步臨床觀察

胡衛(wèi)剛 葉子青 趙超莉 阮瓊芳 席毛毛 謝衛(wèi)國(guó)

（武漢大學(xué)附屬同仁醫(yī)院，武漢市第三醫(yī)院燒傷研究所，湖北 武漢 430071）

感染是影響燒傷創(chuàng)面愈合的重要因素，安全、有效、便捷的外用抗感染藥物對(duì)于控制創(chuàng)面感染和促進(jìn)愈合具有重要作用。碘伏是臨床工作中應(yīng)用最廣泛的消毒劑，對(duì)傷口感染控制具有良好的效果，常用于創(chuàng)面、傷口的處理[1]。外用復(fù)合卵黃抗體噴劑是一種針對(duì)銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的創(chuàng)面外用制劑，更易使用與攜帶，但其用于創(chuàng)面消毒的效果尚不十分明確。為探究該卵黃抗體制劑用于創(chuàng)面抗感染的效果，本研究以臨床常用碘伏為對(duì)照，初步選擇淺Ⅱ度燒傷創(chuàng)面，觀察復(fù)合卵黃抗體噴劑用于創(chuàng)面的抗菌效果及對(duì)創(chuàng)面愈合的影響。報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 病例納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡16 ～65 歲，性別不限；②傷后96 h 內(nèi)；③入院前未予任何可能影響本研究的處理；④由兩名燒傷科醫(yī)師診斷為淺Ⅱ度燒傷，燒傷總面積≤20%TBSA，觀察創(chuàng)面面積≤10%TBSA。排除標(biāo)準(zhǔn)：①對(duì)雞蛋過敏；②哺乳期、孕期婦女；③有糖尿病、心臟疾病、肝腎功能不全等基礎(chǔ)疾病者；④有精神疾病者；⑤其他判斷不適合入選的病例。

1.2 病例與分組 2018 年7 月5 日—2018 年8 月25 日，以我院燒傷科門診收治的54 例患者68 處淺Ⅱ度燒傷創(chuàng)面為觀察對(duì)象（其中14 例患者均為不同部位2 處創(chuàng)面），依次編號(hào)，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組34 處,對(duì)照組34 處。10 處創(chuàng)面因患者原因脫落，2 處觀察組創(chuàng)面出現(xiàn)過敏反應(yīng)，最終有效觀察56 處創(chuàng)面（46 例患者），其中觀察組23 處（19例），對(duì)照組33 處（27 例）。兩組有效觀察創(chuàng)面在性別、年齡、致傷原因、受傷部位、觀察創(chuàng)面面積（%TBSA）等方面，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞ 0.05）。見表1。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，均按照《醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)規(guī)定》的要求進(jìn)行，患者自愿簽署知情同意書。

表1 兩組患者有效觀察創(chuàng)面一般資料比較

1.3 治療方法 ①去除繃帶及外層敷料。②戴無(wú)菌手套，內(nèi)層敷料以生理鹽水潤(rùn)濕后揭除。③0.5%碘伏稀釋后創(chuàng)面消毒，范圍至創(chuàng)周5 ～10 cm，直至創(chuàng)面基本清潔、無(wú)明顯分泌物。④生理鹽水沖洗創(chuàng)面，去除殘留碘伏；⑤觀察組創(chuàng)面依次用復(fù)合卵黃抗體噴劑[商品名燒可安TM,成都安蒂康生物科技有限公司生產(chǎn)，衛(wèi)生許可證號(hào)川（成都-高新）衛(wèi)消證字（2014）第003 號(hào)]浸潤(rùn)的單層油紗、雙層無(wú)菌干紗覆蓋創(chuàng)面，外覆一層油紗。對(duì)照組創(chuàng)面外覆一層碘伏油紗[武漢同濟(jì)美迪生科技有限公司生產(chǎn)，質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.50%～0.55%，鄂衛(wèi)消證字：（2013）第0001 號(hào)]。⑥外層包覆8 ～15 層無(wú)菌干紗布，繃帶包扎。視創(chuàng)面滲出情況，每1 ～2 d換藥1 次。

1.4 觀察指標(biāo) ①創(chuàng)面大體觀察：換藥時(shí)觀察創(chuàng)面大體情況，包括紅腫、滲出、腫脹等，并拍照記錄。②創(chuàng)面細(xì)菌培養(yǎng)：去除創(chuàng)面敷料后，生理鹽水沖洗創(chuàng)面3 ～4 次，直至創(chuàng)面表面清潔無(wú)明顯分泌物，滾動(dòng)咽試子棉簽取創(chuàng)緣深面分泌物行細(xì)菌培養(yǎng)[2]。用藥前、用藥后第3、7、14 d 各取材培養(yǎng)1 次,創(chuàng)面愈合后用濕潤(rùn)棉簽于新鮮上皮組織滾動(dòng)后行細(xì)菌培養(yǎng)。細(xì)菌培養(yǎng)后第2 天記錄培養(yǎng)結(jié)果。③創(chuàng)面愈合時(shí)間：以完全上皮化為創(chuàng)面愈合標(biāo)準(zhǔn)，統(tǒng)計(jì)兩組創(chuàng)面愈合時(shí)間。④不良事件：紅腫、痛癢加劇等異常反應(yīng)的發(fā)生時(shí)間、次數(shù)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。描述性分析中，正態(tài)分布計(jì)量資料以表示，行t 檢驗(yàn)；非正態(tài)分布計(jì)量資料以四分位數(shù)［M(Q 1，Q 3)］表示，非參數(shù)檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（%）表示，χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 創(chuàng)面大體觀察 兩組創(chuàng)面大體觀察均基本正常，傷后早期兩組創(chuàng)面均有不同程度紅腫及滲出反應(yīng)，隨時(shí)間推移紅腫、滲出逐步減少，觀察組滲出減少較對(duì)照組更明顯。見圖1 和圖2。

2.2 創(chuàng)面細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率 觀察組、對(duì)照組創(chuàng)面用藥前細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率分別為60.87%(14/23例)和69.70%（23/33 例），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.492）；用藥后（3±1）d，兩組細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率分別為56.52%（13/23 例）和68.97%（20/29例），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.355）；用藥后（7±1）d，兩組細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率分別為73.33%（11/15 例）和59.26%（16/27 例），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.362）；愈合后1 ～2 d，細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率分別為52.17%(12/23 例)和78.79%（26/33例）,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.036）。見表2。

2.3 創(chuàng)面愈合時(shí)間 觀察組創(chuàng)面愈合時(shí)間為9（7,11）d，較對(duì)照組創(chuàng)面愈合時(shí)間12(9,13)d 明顯縮短，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.001）。見表2。

表2 兩組有效觀察創(chuàng)面細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率及愈合時(shí)間比較

2.4 不良事件 觀察組2 處（8%，2/25 處）創(chuàng)面用藥1 次后出現(xiàn)紅腫加劇，伴明顯瘙癢，停止復(fù)合卵黃抗體噴劑用藥并予以哈西奈德濕敷后好轉(zhuǎn)，愈合良好；對(duì)照組創(chuàng)面無(wú)不良反應(yīng)。兩組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.181）。

3 討 論

燒傷創(chuàng)面屬開放性創(chuàng)面，存在壞死組織，并伴有大量血漿樣滲出液，使得創(chuàng)面成為病原菌繁殖的良好培養(yǎng)基。局部外用抑菌或殺菌劑是一種有效的燒傷創(chuàng)面抗感染措施。金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌及大腸桿菌是燒傷創(chuàng)面最常見的菌種[3]。創(chuàng)面外用抗感染藥物需兼顧有效性、安全性和方便性等多方面因素?？股匾蛞子谛纬赡退幮远粐?yán)格限制創(chuàng)面外用。安全、有效、便捷的創(chuàng)面外用藥物，將會(huì)顯著提高創(chuàng)面治療的臨床工作效率。

1893 年，Klemperer 用試驗(yàn)首次證明用特異性抗原免疫雞后，抗體會(huì)轉(zhuǎn)移到卵黃中，后來(lái)以IgY（Immunoglobulin yolk）表示該抗體。IgY在胃內(nèi)不會(huì)嚴(yán)重失活，可添加至飼料中以防治畜禽腸道感染性疾病，已在畜禽養(yǎng)殖、腸道感染、疾病診斷等方面得到廣泛應(yīng)用。IgY 還用于功能性食品和保健品、消毒產(chǎn)品、分離檢測(cè)試劑盒及疾病診斷等方面。目前部分IgY 已用于臨床治療，其中最成功的是口服IgY 治療肺囊性纖維化病[4]。

1962 年，Williams 等用銅綠假單胞菌處理毒素和經(jīng)超聲波處理的菌體碎片制成抗原免疫產(chǎn)蛋母雞，制備的抗銅綠假單胞菌IgY 對(duì)燒傷創(chuàng)面銅綠假單胞菌感染有顯著的預(yù)防和治療作用。與一般哺乳動(dòng)物IgG 相比，IgY 無(wú)需采血，且物理、化學(xué)性質(zhì)更穩(wěn)定[5]。IgY 還具有產(chǎn)生有效免疫反應(yīng)所需抗原量小，生產(chǎn)過程更方便，免疫效能特異性更強(qiáng)，蛋黃中IgY 含量高、種類單一、易于提純等優(yōu)點(diǎn)[6]。同時(shí)，IgY 制備工藝相對(duì)簡(jiǎn)單，工業(yè)化生產(chǎn)成本低，具有推廣使用的前景。如何避免蛋傳性病原傳播風(fēng)險(xiǎn)及減少過敏原性，則是進(jìn)一步改進(jìn)和推廣使用中需注意的問題[7]。基于此，設(shè)計(jì)和生產(chǎn)針對(duì)燒傷創(chuàng)面常見感染菌的特異性外用卵黃免疫抗體，有可能成為燒傷創(chuàng)面外用抗感染治療的一條新途徑。燒可安TM是針對(duì)燒傷創(chuàng)面最常見的銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的復(fù)合卵黃抗體產(chǎn)品，制作成噴劑，更方便使用和攜帶。本研究中因兩組創(chuàng)面大都在用藥14 d 之前愈合，研究計(jì)劃中用藥后14 d 創(chuàng)面細(xì)菌培養(yǎng)與愈合后1 ～2 d 培養(yǎng)重復(fù)，故略去前者。本研究顯示，復(fù)合卵黃抗體制劑在淺Ⅱ度燒傷創(chuàng)面愈合過程中，其抗感染作用與碘伏相似，兩組間創(chuàng)面細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率的差異無(wú)顯著性，但使用復(fù)合卵黃抗體可以顯著降低創(chuàng)面愈合后的細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率，并縮短創(chuàng)面愈合時(shí)間。分析其抗菌作用機(jī)制可能為：①特異性卵黃抗體能直接黏附于病原菌的細(xì)胞壁,改變其形態(tài)和完整性,抑制病原菌生長(zhǎng)；②與細(xì)菌菌毛結(jié)合的卵黃抗體減少了細(xì)菌對(duì)創(chuàng)面上皮細(xì)胞的黏附；③卵黃抗體可作為外源性抗原，刺激黏膜免疫，增強(qiáng)黏膜免疫的殺菌作用；④通過抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)起抗感染作用，促進(jìn)創(chuàng)面愈合。

本研究中門診患者依從性較差，創(chuàng)面脫落率（17.6%）較高，對(duì)組間隨機(jī)性有一定影響；大多患者未能按研究計(jì)劃如期就診、行創(chuàng)面分泌物細(xì)菌培養(yǎng)，故培養(yǎng)結(jié)果部分?jǐn)?shù)據(jù)完整性欠佳。本研究還存在以下缺陷：①用藥后（3±1）d、（7±1）d，觀察組和對(duì)照組均有部分患者未按研究計(jì)劃就診，以致部分培養(yǎng)結(jié)果缺如，兩組培養(yǎng)陽(yáng)性率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異可能與此有關(guān)，其可靠性有待進(jìn)一步證實(shí)。②愈合后1 ～2 d 觀察組細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率較用藥前降低，且明顯低于對(duì)照組（P＜0.05），而對(duì)照組愈合后1 ～2 d 細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率較用藥前略升高，與碘伏的臨床應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)不甚相符，可能與樣本量不足有關(guān)。③參考本科室患者的感染菌譜[3]，燒傷患者創(chuàng)面感染菌株以金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌及大腸桿菌最多見，故本研究中對(duì)創(chuàng)面細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果僅行定性分析，未予準(zhǔn)確分類及定量分析，未來(lái)需進(jìn)一步完善此步驟。④創(chuàng)面分泌物培養(yǎng)均嚴(yán)格按照“全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第4 版）要求進(jìn)行，但對(duì)于淺II 度燒傷創(chuàng)面而言，本組創(chuàng)面細(xì)菌檢出陽(yáng)性率較高，其原因可能為正常皮膚本就長(zhǎng)期細(xì)菌定植；入組患者多為體力勞動(dòng)者，工作、生活環(huán)境衛(wèi)生條件欠佳； 創(chuàng)面表面滲出增加了創(chuàng)面感染概率。⑤此外，因依從性及費(fèi)用問題，未能全部抽血查患者肝腎功能以評(píng)價(jià)藥物吸收后的不良反應(yīng)。我們未來(lái)將擴(kuò)大樣本量，且納入住院患者，以期更加完善、可靠的研究結(jié)果，并對(duì)臨床工作有一定的指導(dǎo)意義。