抗SSA60、SSA52、SSB/La抗體及抗著絲點(diǎn)B抗體在老年性干燥綜合征干眼癥診斷中的意義

胡海林 方思捷 崔昌 王俊芳 趙福濤

資料與方法

一、一般資料

選取2015年7月至2019年11月在我院風(fēng)濕免疫科和眼科確診為老年性干燥綜合征的患者157例，其中男性21例，女性136例；年齡60～80歲，平均(67.54±4.90)歲。研究對(duì)象病歷資料完整，符合老年性的標(biāo)準(zhǔn)和干燥綜合征的診斷標(biāo)準(zhǔn)，SS診斷符合2002年干燥綜合征國(guó)際診斷(分類)標(biāo)準(zhǔn)(US-EU)[2]。本研究通過上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院倫理委員會(huì)審查，所有患者均簽署知情同意書。

二、方法

1．自身抗體檢測(cè):所有研究對(duì)象均于清晨空腹采靜脈血5 ml分離血清，并保存于-20 ℃冰箱用于檢測(cè)抗體。采用免疫印跡法(德國(guó)Human公司)和免疫雙擴(kuò)散法(北京和杰公司)檢測(cè)抗SSA60抗體、抗SSA52抗體、 抗SSB/La抗體及抗著絲點(diǎn)B抗體。

2．干眼檢測(cè)

(1)淚液分泌試驗(yàn):用5 mm×35 mm Whatmann 41號(hào)濾紙，折5 mm置于下瞼外1/3結(jié)膜處，5 min后取下濾紙測(cè)定濕長(zhǎng)。

(2)淚膜破裂時(shí)間:用玻璃棒沾取2%的熒光素鈉滴入結(jié)膜囊，囑患者輕輕眨眼數(shù)次，自然睜眼平視前方。 在裂隙燈下用低亮度鈷藍(lán)光，仔細(xì)觀察角膜表面，直至發(fā)現(xiàn)完整淚膜出現(xiàn)第一個(gè)破孔“黑洞”的時(shí)間，即淚膜破裂時(shí)間。檢查均在同一暗室、同一裂隙燈下，由同一檢查者進(jìn)行，重復(fù)3次并取平均值。

(3)角膜熒光素染色評(píng)分:熒光素鈉染色后，在裂隙燈鈷藍(lán)光下觀察角膜染色情況。從瞳孔正中開始，將角膜劃分為4個(gè)象限，每個(gè)象限出現(xiàn)的角膜染色面積按如下計(jì)分:0分無染色;1分為0～30個(gè)點(diǎn)狀著色;2分為>30個(gè)點(diǎn)狀染色但未融合;3分為片狀染色，最終將計(jì)分相加，記錄患者角膜熒光素染色評(píng)分。

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(4)干眼評(píng)分:干眼癥評(píng)分如下：0分，無明顯干眼癥狀;1分，有干眼癥狀,但出現(xiàn)頻率低;2分，有干眼癥狀, 但不持續(xù);3分，持續(xù)有干眼癥狀。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

結(jié) 果

一、抗SSA60抗體、抗SSA52抗體、抗SSB/La抗體，抗著絲點(diǎn)B抗體在老年性干燥綜合征患者血清中的檢出率：人選的157例患者中，抗SSA60抗體陽性82例，占52.2%，抗SSA52抗體陽性82例，占52.2%，抗SSB/La抗體陽性52例，占33.1%，抗著絲點(diǎn)B抗體陽性18例，占11.4%。

二、干眼癥在老年性干燥綜合癥患者中的檢出率(157例，79例干眼癥)：干眼癥在老年性干燥綜合癥的陽性率為50.3%。

三、抗SSA60抗體、抗SSA52抗體、抗SSB/La抗體，抗著絲點(diǎn)B抗體在老年性干燥綜合征患者干眼癥的比較(表1)。

1.抗SSA60抗體陽性的患者出現(xiàn)干眼癥與抗SSA60抗體陰性的患者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；抗SSA52抗體陽性的患者出現(xiàn)干眼癥與抗SSA52抗體陰性的患者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；抗SSB/La抗體陽性的患者出現(xiàn)干眼癥與抗SSB/La抗體陰性的患者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；抗著絲點(diǎn)B抗體陽性的患者出現(xiàn)干眼癥與抗著絲點(diǎn)B抗體陰性的患者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；

2.抗SSA60抗體陽性和陰性患者干眼指標(biāo)的比較：抗SSA60抗體陽性的患者相對(duì)于陰性患者來說，出現(xiàn)淚液分泌試驗(yàn)和淚膜破裂時(shí)間短、角膜熒光素染色評(píng)分和干眼評(píng)分高，2組患者差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。

3.抗SSA52抗體陽性和陰性患者干眼指標(biāo)的比較：抗SSA52抗體陽性的患者相對(duì)于陰性患者來說，出現(xiàn)淚液分泌試驗(yàn)和淚膜破裂時(shí)間短、角膜熒光素染色評(píng)分和干眼評(píng)分高，2組患者差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。

4.抗SSB/La抗體陽性和陰性患者干眼指標(biāo)的比較：抗SSB/La抗體陽性的患者相對(duì)于陰性患者來說，出現(xiàn)淚液分泌時(shí)間和淚膜破裂時(shí)間短、角膜熒光素染色評(píng)分和干眼評(píng)分高，2組患者差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)

5.抗著絲點(diǎn)B抗體陽性和陰性患者干眼指標(biāo)的比較：抗著絲點(diǎn)B抗體陽性的患者相對(duì)于陰性患者來說，出現(xiàn)淚液分泌時(shí)間短，2組患者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。淚膜破裂時(shí)間、角膜熒光素染色評(píng)分、干眼評(píng)分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表1 抗SSA60、SSA52、SSB/La抗體及抗著絲點(diǎn)B抗體在老年性干燥綜合征患者干眼癥的干眼指標(biāo)的比較

討 論

干燥綜合征常常以淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)和外分泌腺功能損傷為特征，多于40～60歲發(fā)病，好發(fā)于女性，女性和男性比例為 9:1[3]。本研究組女性和男性比例在6.5:1左右，比報(bào)道的比例略低?？赡鼙狙芯渴窃?0歲以上的老年人群中開展，故推測(cè)是男女性比例有所差異。

眼干、口干是干燥綜合征的常見臨床表現(xiàn)。1933年瑞典的眼科醫(yī)生亨里克報(bào)道有19例干燥綜合癥患者有嚴(yán)重的干眼癥狀[4]，成人患病率為0.5～0.1%，是風(fēng)濕病科第二大疾病[5]。干燥綜合征在老年人群中，發(fā)病率為3%～4%[6]。干眼是由于淚液的量或質(zhì)或流動(dòng)動(dòng)力學(xué)異常引起淚膜不穩(wěn)定和(或)眼表損害，后導(dǎo)致眼不適癥狀及視功能障礙的一類疾病[7]。有研究證明，在美國(guó)老年人中近乎8%的人有干眼癥，其中約有1/10都是干燥綜合征患者[8]。而其中大概約2/3的干燥綜合征患者還沒進(jìn)一步在臨床上確診為干眼癥[9]，在美國(guó)干眼癥的廣泛發(fā)作已成為巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[10]。因此推測(cè)在干燥綜合征患者中，干眼癥比例可能更高。本研究表明干眼癥在老年性干燥綜合征中比例超過50%，約半數(shù)人都有干眼癥。有研究表明[11]眼表炎癥是干眼病理損害的重要機(jī)制，干燥綜合征是慢性炎癥免疫性疾病，我們可以推測(cè)干燥綜合征患者干眼比例更高。

有研究表明，干燥綜合征患者的血液中可檢測(cè)多項(xiàng)免疫因子，成為評(píng)價(jià)干燥綜合征的重要血清學(xué)檢查，例如抗SSA和抗SSB抗體?？筍SA抗體，又稱抗Ro抗體，屬于小分子細(xì)胞質(zhì)核糖核蛋白(scRNP)，由Anderson等人在1962年首次發(fā)現(xiàn)?？筍SA抗體的靶抗原是分子量為60KD和52KD兩種蛋白，Ro60和Ro52是同一大分子復(fù)合體，所以把抗SSA抗體系統(tǒng)命名成為SSA 60抗體和SSA52抗體。該抗體也廣泛出現(xiàn)于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、系統(tǒng)性硬化癥、多發(fā)性肌炎等多種自身免疫病。

有研究表明，干燥綜合征的患者約71%抗SSA抗體陽性和約67%抗SSB抗體陽性[12]?？筍SB/La抗體是一種磷蛋白，相對(duì)分子質(zhì)量為48000，在1979年Alspaugh與Clark實(shí)驗(yàn)就證明SSB抗原與1974年發(fā)現(xiàn)的胞漿抗原La是同一種物質(zhì)，所以命名為抗SSB/La抗體[13]。定位于細(xì)胞核/細(xì)胞漿中，對(duì)于診斷干燥綜合征有著重要的地位[14]。在傳統(tǒng)的免疫印跡檢測(cè)中，通常要60KD和52KD同時(shí)陽性才能報(bào)告抗SSA抗體陽性，臨床標(biāo)本單獨(dú)出現(xiàn)時(shí)不能報(bào)告。所以本研究在老年性干燥綜合征患者中同時(shí)檢測(cè)抗SSA60、抗SSA52抗體，結(jié)果表明兩者檢測(cè)結(jié)果幾乎一致。

有研究發(fā)現(xiàn)抗著絲點(diǎn)抗體(anticentromereantibody,ACA)和干眼癥的相關(guān)性越來越多[15]，在PSS中的陽性率占3.7%～27.4%[16]。與ACA反應(yīng)的有四種著絲蛋白，其中著絲蛋白-B是最主要的靶蛋白。而在PSS中，ACA僅僅能識(shí)別靶蛋白B[17]。因此本研究在老年性干燥綜合征患者中檢測(cè)抗著絲點(diǎn)B抗體的比例。有文獻(xiàn)表明，抗著絲點(diǎn)B抗體陽性的原發(fā)性SS與抗著絲點(diǎn)B抗體陰性的SS有不同的臨床特征，使得SS分為不同亞組[18-20]。本研究證明抗著絲點(diǎn)B陽性的患者與抗著絲點(diǎn)B陰性患者相比，淚液分泌時(shí)間縮短的意義更大，而淚膜破裂時(shí)間、角膜熒光素染色評(píng)分、干眼評(píng)分沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

綜上所述，在老年性干燥綜合征患者中檢測(cè)抗SSA60、SSA52、SSB/La及抗著絲點(diǎn)B抗體在臨床上有一定的意義，聯(lián)合檢測(cè)能提示干眼癥的發(fā)生，抗SSA60、SSA52、SSB/La抗體可能意義更大。本研究是回顧性病例分析，納入研究的患者病例數(shù)比較少，為單中心研究，后續(xù)可能需要更多樣本以及多中心的臨床研究等支持。