施今墨對藥方“腰痛康”對腰椎間盤突出癥SD 大鼠IL-1、NO 水平的影響

呂玉娥，段永峰，李亞峰

（1.山西省針灸醫(yī)院，山西太原030006； 2.山西中醫(yī)藥大學，山西晉中030619）

施今墨對藥方“腰痛康”是國醫(yī)大師呂景山教授用于治療腰椎間盤突出癥（Lumbar disc herniation，LDH）的經驗方，在臨床上每獲良效。為了探究其作用機制，進行其對LDH 大鼠模型血清白介素-1（IL-1）和一氧化氮（NO）水平影響的實驗研究。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 選取60 只成年雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠。其體質量為 250～300 g，單一喂養(yǎng)，溫度控制在25 ℃左右。

1.1.2 藥物與試劑 腰痛康膠囊主要由生黃芪、當歸、蜈蚣、全蝎、杜仲、川續(xù)斷、乳香、沒藥等組成，每粒0.4 g（相當于生藥2.6 g），由山西省針灸醫(yī)院制劑室提供。雙氯芬酸鈉腸溶片（國藥準字H41022703，批號100813，南陽普康藥業(yè)有限公司）。試劑盒IL-1、NO 由山西省針灸醫(yī)院檢驗科提供。

1.2 實驗方法

1.2.1 模型制備 ①制備自體髓核混懸液。術前1 d，先腹腔注射1%氯胺酮50 mg/kg 進行麻醉。然后，剪短大鼠背部的毛，再使用脫毛劑脫毛。手術時，先腹腔注射1%氯胺酮50 mg/kg，麻醉。在大鼠尾部、背部進行消毒，鋪無菌巾。在距尾根部1 cm處切斷鼠尾，縫合傷口。切開尾部椎間盤，可看到髓核呈膠凍狀。取出5 個髓核，加入50 μL 生理鹽水，充分攪拌，使其呈混懸液，以備使用。②建立模型。固定大鼠，使其腰椎呈屈曲側臥位。選取腰椎4，5 棘突間隙作為穿刺點。采用9 號腰椎穿刺針，行硬膜外穿刺。穿刺成功后，使用微量注射器，注射20 μL 自體髓核混懸液。然后注射2%利多卡因30 μL 于硬膜外腔，拔出穿刺針。將大鼠置入籠中進行觀察。造模成功的標準：若麻醉蘇醒后，大鼠四肢活動自若，則表明硬膜外穿刺、注射未成功。若雙側前肢活動自若，而雙側后肢運動、感覺喪失或減弱，且20～30 min 后完全恢復，則表明造模成功。

1.2.2 分組與給藥 采用隨機數(shù)字表法，將60 只SD 大鼠隨機分為正常組（A 組）、造模組（B 組）、中藥組（C 組）及西藥組（D 組），每組 15 只。A 組大鼠正常喂養(yǎng)；余組大鼠均造模，造模成功后，A組、B 組予以生理鹽水灌胃；C 組給予施今墨對藥方“腰痛康”灌胃給藥，折合生藥2.6 g/d；D 組予以雙氯芬酸鈉腸溶片灌胃給藥。

1.2.3 觀察指標 于制模后第7 天、第14 天、第28 天，各組隨機抽取5 只大鼠，摘除眼球取血，測定血清 IL-1、NO 水平。

1.3 統(tǒng)計學方法

2 結 果

2.1 腰痛康對LDH 大鼠IL-1 水平的影響

在相同時間點，B 組較A 組IL-1 水平顯著升高（P<0.05），說明在LDH 所致神經根炎過程中，IL-1 發(fā)揮重要作用。與B 組相同時間點相比，C組、D 組 IL-1 水平降低（P<0.05），說明施今墨對藥方“腰痛康”、雙氯芬酸鈉腸溶片都能有效抑制炎性介質，而 C 組 IL-1 水平較 D 組降低（P<0.05），差異有統(tǒng)計學意義，說明施今墨對藥方“腰痛康”的作用優(yōu)于雙氯芬酸鈉腸溶片。結果見表1。

表1 腰痛康對LDH 大鼠IL-1 水平的影響 （ng，）

表1 腰痛康對LDH 大鼠IL-1 水平的影響 （ng，）

注：與 A 組相同時間點比較，1）P<0.05；與 B 組相同時間點比較，2）P<0.05；與 C 組相同時間點比較，3）P<0.05

組別 n A 組 15 B 組 15 C 組 15 D 組 15第7 天 第14 天 第28 天0.112±0.006 0.089±0.008 0.111±0.006 0.264±0.0061） 0.179±0.0131） 0.198± 0.0031）0.247±0.0892） 0.128±0.0082） 0.104± 0.0062）0.258±0.0052）3） 0.136±0.0072）3） 0.114±0.0042）3）

2.2 腰痛康對LDH 大鼠NO 水平的影響

在相同時間點，B 組較A 組NO 水平顯著升高（P<0.05），說明在腰椎間盤突出癥所致神經根炎的過程中，NO 是一個重要的炎癥介質，可能發(fā)揮重要的作用。與B 組相同時間點比較，C 組、D組隨治療時間延長，NO 水平下降（P<0.05），差異具有統(tǒng)計學意義，且C 組相同時間點NO 水平較D 組明顯降低（P<0.05），說明施今墨對藥方“腰痛康”的作用優(yōu)于雙氯芬酸鈉腸溶片。結果見表2。

3 討 論

LDH 屬于骨科常見病，其臨床發(fā)病率高［1］。該病的發(fā)病機制包括以下兩方面：一方面，椎間盤自身存在退行性變，在遇到外傷、勞損、受寒等后，導致纖維由內向外破裂，引發(fā)本病。另一方面，髓核液里含有糖蛋白、脂蛋白等物質，這些物質可以對神經根產生刺激，當髓核突出破裂后，釋放這些物質的炎性介質，刺激神經根，引起神經根炎，導致神經內壓力升高，產生神經支配區(qū)的疼痛。

表2 腰痛康對LDH 大鼠NO 水平的影響 （ng，）

表2 腰痛康對LDH 大鼠NO 水平的影響 （ng，）

注：與 A 組相同時間點比較，1）P<0.05；與 B 組相同時間點比較，2）P<0.05；與 C 組相同時間點比較，3）P<0.05

組別 n A 組 15 B 組 15 C 組 15 D 組 15第7 天 第14 天 第28 天6.608±0.102 7.526±0.322 7.690±0.312 13.245±0.2921） 16.742±0.4081） 17.993±0.9721）12.968±0.3652） 9.768±0.2582） 8.541±0.6242）13.304±0.3822）3） 10.386±0.6422）3） 9.196±0.3422）3）

炎癥介質如IL-1、NO 在神經根病變導致的LDH中起著十分重要的作用。IL-1 通過刺激炎癥細胞聚集，使炎癥遞質被激活，進而被釋放，然后，刺激脊神經，產生腰腿痛［2］。NO 是一種具有廣泛生物學功能的第二信使物質，內源性NO 已被證實參與炎癥反應［3］。

當前，醫(yī)治LDH 的方法分為非手術治療與手術治療，80%～90%的患者可經非手術治療使其癥狀得到改善，或可病愈［4］。非手術治療包含平臥硬板床、藥物醫(yī)治、牽引、按摩療法、艾灸、針刺、其他康復療法。雖然手術可以治愈本病，但很多人不適合手術或恐懼手術，給患者帶來極大的痛苦。中醫(yī)學認識到，引起本病主要有：外感風、寒、濕、熱之邪，經絡閉阻，氣滯血瘀，不通則痛；肝腎虧虛，筋脈失養(yǎng)，不榮則痛；外傷或勞損，氣滯血瘀，不通則痛。臨床中多是上述三方面雜合為病，且三方面互相影響。實邪病久，則可致虛。若為虛證，則實邪不易被祛除。施今墨對藥方“腰痛康”基于LDH 的中醫(yī)病因病機擬定，方中生黃芪、當歸、杜仲、續(xù)斷補益肝腎，蜈蚣、全蝎、乳香、沒藥舒經活絡、消腫止痛。合用之，可使血液循環(huán)得以改善，新陳代謝得以調整，神經根水腫得以減輕，進而炎癥得以消退。

本實驗 B 組 IL-1、NO 水平較 A 組升高，說明炎性介質在腰椎間盤突出癥中發(fā)揮重要作用，而C 組能明顯降低模型大鼠血清IL-1、NO 水平，說明施今墨對藥“腰痛康”可能通過抑制炎性介質，使腰椎間盤突出所致神經根痛得以改善。