Hsp90α、AFP、血清鐵蛋白聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌的診斷價值研究

胥 慧,梁紅梅,黃 華

[1.深圳市人民醫(yī)院(暨南大學(xué)第二臨床附屬醫(yī)院)內(nèi)分泌科實驗室,廣東 深圳 518000；2.龍崗區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗科，廣東 深圳 518000]

原發(fā)性肝癌(Primary hepatic cancer，PHC)是我國常見的肝臟惡性腫瘤之一，起病隱匿，發(fā)現(xiàn)時多是中晚期，已失去最佳治療時機(jī)，疾病發(fā)展快，死亡率高[1-2]。早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、早期治療是提高PHC患者生存期的關(guān)鍵。由于影像學(xué)診斷和病理學(xué)檢測對早期診斷原發(fā)性肝癌價值有限，對原發(fā)性肝癌的診斷具有較高的敏感性和特異性的血清甲胎蛋白(AFP)成為目前臨床最常用的肝癌標(biāo)志物，但AFP在原發(fā)性肝癌中的陽性率為71.59%，但對原發(fā)性肝癌的診斷仍有部分假陰性[3-4]。因此聯(lián)合檢測多種腫瘤標(biāo)志物有助于提高原發(fā)性肝癌臨床診斷陽性率。血清鐵蛋白(SF)在 PHC 患者中顯著升高且與腫瘤血管侵襲或肝內(nèi)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。熱休克蛋白90α(Hsp90α)是潛在的腫瘤標(biāo)志物。本文通過對Hsp90α、AFP、SF聯(lián)合檢測來探討其對原發(fā)性肝癌的診斷價值，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取我院2015年1月～2017年1月原發(fā)性肝癌患者血清標(biāo)本70例，術(shù)后病理確診，符合原發(fā)性肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)(2011版)，男41例，女29例，年齡37～72歲，平均(45.73±5.79)歲；肝炎患者血清標(biāo)本70例，經(jīng)臨床癥狀體征、肝功能檢查以及PCR法定量檢測血清乙肝病毒DNA確診，符合病毒性肝炎防治方案，男38例，女32例，年齡36～70歲，平均(44.29±5.23)歲；健康體檢血清標(biāo)本70例，男36例，女34例，年齡40～68歲，平均(45.19±5.46)歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：①免疫系統(tǒng)疾病或服用免疫藥物者；②心、肺、肝、腎等器官功能異常及其他腫瘤者；③嚴(yán)重的感染性疾病。PHC組、肝炎組及健康體檢組在年齡、性別等一般臨床資料方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，三組人員及其家屬均了解此次研究內(nèi)容，全部簽署知情同意書。

1.2方法：清晨空腹采集靜脈血5 ml，分離血清，置冰箱待測。SF、AFP檢測采用電化學(xué)方法，使用的E170全自動免疫分析儀及其配套試劑均由美國羅氏公司提供。ELISA法檢測Hsp90α，定量檢測試劑盒購自上海領(lǐng)潮科技生物有限公司。ELISA法檢測乙肝血清免疫學(xué)指標(biāo)，試劑盒購自上海晶抗生物工程有限公司。AFP>20 ng/ml，SF<219 ng/ml，Hsp90α>82.06 ng/ml為陽性表達(dá)。靈敏度=真陽性例數(shù)/PHC患者總數(shù)×100%；特異性=真陰性例數(shù)/PHC患者總數(shù)×100%；準(zhǔn)確性=(真陽性例數(shù)+真陰性例數(shù))/PHC患者總數(shù)×100%。

2 結(jié)果

2.1三組人員血清TM各指標(biāo)水平的比較:PHC組AFP、SF及Hsp90α均顯著高于肝炎組和健康體檢組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

組別例數(shù)AFP(μg/L)SF(ng/ml)Hsp90α(ng/ml)PHC組70212.34±63.54254.33±127.67147.78±32.74肝炎組7013.19±7.87①162.37±84.51①75.87±17.31①健康體檢組707.54±3.65①125.43±56.72①71.25±15.64①t1值36.8047.10724.451t2值38.01710.91724.956

注：t1為PHC組與肝炎組相比；t2為PHC組與健康體檢組相比；與PHC組比較，①P<0.05

2.2PHC組內(nèi)腫瘤指標(biāo)單獨與聯(lián)合檢測的結(jié)果比較：PHC組血清AFP敏感性為72.86%，SF的敏感性為70.00%，Hsp90α的敏感性為30.00%。多項指標(biāo)聯(lián)合檢測HPC敏感性為95.71%，與一項或兩項聯(lián)合檢測相比，敏感性、準(zhǔn)確性均有不同程度的升高，但與一項檢測相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與部分單項檢測相比，特異性略有下降。見表2。

表2 PHC組內(nèi)腫瘤指標(biāo)單獨和聯(lián)合檢測的結(jié)果比較(%)

項目準(zhǔn)確性敏感性特異性AFP78.57272.86182.86SF71.4370.0080.00Hsp90α60.0030.0080.00AFP+ SF88.5787.1478.57AFP+ Hsp90α85.7184.2977.13AFP+SF+ Hsp90α97.1495.7178.57

注：與AFP單項檢測比較，χ2=13.806、11.351，P<0.05

3 討論

AFP在胎兒肝臟合成，在正常組織中幾乎不產(chǎn)生或產(chǎn)量甚微，當(dāng)肝細(xì)胞發(fā)生癌變時，由于低甲基化作用導(dǎo)致AFP的基因表達(dá)開放，于血清中可檢測到AFP濃度顯著升高，因此AFP成為PHC早期診斷的血清標(biāo)記物。許多國內(nèi)外專家和機(jī)構(gòu)均指定 AFP作為唯一的原發(fā)性肝癌腫瘤標(biāo)志物，并且AFP 檢測對手術(shù)治療及放療、化療預(yù)后具有重要的臨床價值[5]。

有研究報道，SF是鐵貯存于人體的主要形式之一，參與對造血和免疫系統(tǒng)的調(diào)控，合成增加見于炎性反應(yīng)、肝臟病變及惡性腫瘤，尤其是原發(fā)性肝癌，腫瘤壞死因子 α誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞產(chǎn)生鐵蛋白，血清中鐵蛋白升高[6]。PHC發(fā)生時，腫瘤的臨床TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處臟器轉(zhuǎn)移與SF水平呈正相關(guān)(P<0.05)，在進(jìn)展為 Ⅲ 期和Ⅳ 期患者中SF水平有進(jìn)一步上升的趨勢，可作為肝癌的診斷、治療及療效監(jiān)測的輔助手段[7]。Hsp90α作為熱休克家族的主要成員，在多種惡性腫瘤中異常表達(dá)，加速細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)變及影響腫瘤血管形成，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展、侵襲浸潤和轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，對腫瘤的病情監(jiān)測和治療效果評價有一定的提示作用。Hsp90α可能在肝細(xì)胞惡變的初始期或癌前期即參與細(xì)胞的轉(zhuǎn)化[8]。

本文研究顯示， PHC組的AFP、SF及Hsp90α水平顯著高于肝硬化組和健康體檢組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，表明肝癌發(fā)生時，三者活性大量表達(dá)，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展、侵襲與轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。研究顯示，PHC患者血清AFP水平與FER呈正相關(guān)(P<0.05)[9]。

崔燦等人研究發(fā)現(xiàn)，PHC組中的AFP及Ferritin水平遠(yuǎn)高于良性肝病組和健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。原發(fā)性肝癌組的AFP及Ferritin水平陽性率高于良性肝病組和健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測敏感度84.8%顯著優(yōu)于單一指標(biāo)檢測敏感度，特異性和準(zhǔn)確性分別為88.9%和85.2%，較部分腫瘤標(biāo)志物特異性有所降低[10]。本研究中，三者聯(lián)合檢測的準(zhǔn)確性與敏感性分別為88.57%和95.17%，遠(yuǎn)高于二者聯(lián)合檢測或單一指標(biāo)檢測，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，特異性為78.57%，略低于二者聯(lián)合檢測或單一指標(biāo)檢測，提示腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測對于提高肝癌診斷的敏感性和準(zhǔn)確性具有良好的互補(bǔ)作用。AFP單項檢測對PHC診斷存在不同程度的局限性，會出現(xiàn)一定程度的漏診和誤診，聯(lián)合檢測AFP和SF及Hsp90α可以有效提高AFP陰性或低濃度病例的檢出率，提高了PHC的檢出率和診斷PHC的敏感性，可以顯著提高原發(fā)性肝癌的確診率，具有更好的臨床應(yīng)用價值。