不同采樣點(diǎn)息半夏質(zhì)量對(duì)比研究

王海燕 李金平 周斌 董智堯 陳瓊

摘要：分別從性狀鑒別、粉末顯微鑒別、薄層色譜鑒別、水分、總灰分、浸出物檢查、總酸含量測定等方面，比較了7個(gè)采樣點(diǎn)息半夏（Pinellia ternate（ Thunb.） Breit of Xixian county）的質(zhì)量。結(jié)果表明，7個(gè)采樣點(diǎn)息半夏粉末顯微特征、薄層色譜一致;但性狀、水分、總灰分、浸出物和總酸含量有差異。其種源、繁育方式、野生環(huán)境、培育條件對(duì)息半夏質(zhì)量有影響。

關(guān)鍵詞：息半夏（PineLlia ternate（ Thunb.） Breit of Xixian countv）：粉末顯微鑒別：薄層色譜鑒別：質(zhì)量分析

中圖分類號(hào)：R284.1

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：0439-8114（ 2020） 08-0126-03

D01：10.1408 8/j .cnki.issn0439- 8114.2020.08.028

半夏為天南星科植物半夏[Pinellia ternate（Thunb.）Breit]的干燥塊莖，常見于草坡、荒地、玉米地、田邊或疏林下。全國各地分布廣泛，一般在海拔2 500 m以下（在西藏也有分布，海拔3 000 m），朝鮮、日本等地也有分布。半夏始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，性味辛、溫，有毒，歸脾、胃、肺經(jīng)。具有燥濕化痰、降逆止嘔、消痞散結(jié)[1]功效，可用于濕痰寒痰、咳喘痰多，痰飲眩悸，風(fēng)痰眩暈，痰厥頭痛，嘔吐反胃，胸脘痞悶，梅核氣;外治癰腫痰核[1]。半夏中含有生物堿、半夏淀粉、甾醇類、氨基酸、揮發(fā)油、芳香族成分、有機(jī)酸類、黃酮類、半夏蛋白、鞣質(zhì)以及多種微量元素等[2]?，F(xiàn)代藥理研究表明，其具有鎮(zhèn)咳、止吐、抗炎、抗?jié)?、抗驚厥、鎮(zhèn)靜催眠、降血脂和抗腫瘤等多種藥理活性[3]。其中，河南省信陽市息縣所產(chǎn)半夏個(gè)大、潔白、粉足、療效好，有9 g可頂外地半夏15 g用的說法，為同類藥材中的珍品，被稱為“息半夏”。最早有息半夏記載是在清嘉慶四年（1799年）的《息縣志》;1914年，息半夏參加了在美國舊金山舉辦的萬國商品會(huì)展銷;1949年后，息半夏為重點(diǎn)出口藥材;1979年版《辭海》將半夏列為息縣特產(chǎn)。

息半夏是息縣獨(dú)有的優(yōu)良中藥材品種。為保護(hù)、開發(fā)、利用息半夏這一重要中藥資源，息縣縣委、縣政府高度重視，于2018年與河南息半夏藥業(yè)有限公司簽訂了鼓勵(lì)農(nóng)戶種植的優(yōu)惠政策協(xié)議，將息半夏資源的開發(fā)利用工作列入經(jīng)濟(jì)發(fā)展規(guī)劃，建立了息半夏種植基地，努力實(shí)現(xiàn)企業(yè)、基地和種植農(nóng)戶的三贏，促進(jìn)息半夏中藥材產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。在前期調(diào)研過程中發(fā)現(xiàn)息縣不同地區(qū)和種植基地間存在盲目引種及野生息半夏品種混合生長的現(xiàn)象，個(gè)體間遺傳變異豐富，質(zhì)量參差不齊。本研究采用《中國藥典》（2015年版）方法對(duì)7個(gè)采樣點(diǎn)的息半夏進(jìn)行了質(zhì)量對(duì)比分析，旨在為有效控制息半夏質(zhì)量、息半夏規(guī)范化種植提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

息半夏藥材采于河南省信陽市息縣，經(jīng)信陽農(nóng)林學(xué)院梁利香副教授鑒定命名為Pinellia ternate（Thunb.）Breit（表1）。將息半夏洗凈，除去外皮和須根，曬干，備用。精氨酸對(duì)照品（上海金穗生物科技有限公司，純度≥98%，HPLC含量測定用，批號(hào)20190107），丙氨酸對(duì)照品（上海金穗生物科技有限公司，純度≥98%，HPLC含量測定用，批號(hào)20181019），纈氨酸對(duì)照品（上海金穗生物科技有限公司，純度≥98%，HPLC含量測定用，批號(hào)20180812），亮氨酸對(duì)照品（上海金穗生物科技有限公司，純度≥98%，HPLC含量測定用，批號(hào)20181109），半夏對(duì)照藥材（中國藥品生物制品檢驗(yàn)所，批號(hào)100147-200302），琥珀酸對(duì)照品（合肥博美生物科技有限責(zé)任公司，純度≥98%，HPLC含量測定用，批號(hào)HB220423），薄層層析硅膠G板（煙臺(tái)江友硅膠開發(fā)有限公司），去離子水自制，其余均為分析純。

1.2 儀器

CX21FS1型顯微鏡（日本OLYMPUS公司），SCQ-820IE型超聲清洗儀（上海聲彥超聲波儀器有限公司），全自動(dòng)滴定儀（濟(jì)南海能儀器股份有限公司），烘箱、回流提取裝置、高溫爐。

1.3 方法

參照《中國藥典》（2015年版）一部半夏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的性狀、鑒別、檢查、含量指標(biāo)進(jìn)行測定分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 性狀鑒別

呈類球形，有的稍偏斜，直徑1.0-2.5 cm。表面白色、淺黃色或綠色，頂端有凹陷的莖痕，周圍密布麻點(diǎn)狀根痕;下面鈍圓，較光滑。質(zhì)堅(jiān)實(shí)，斷面潔白，富粉性。氣微，味辛辣，麻舌而刺喉。

2.2 顯微鑒別

本品粉末類白色或稍顯綠色。7個(gè)采樣點(diǎn)息半夏顯微特征無明顯差異顯微特征如圖1所示。環(huán)紋導(dǎo)管，螺紋導(dǎo)管散在;淀粉粒甚多，單粒類圓形、半圓形或圓多角形，臍點(diǎn)裂縫狀、人字狀或星狀;復(fù)粒由2-6分粒組成;草酸鈣針晶束存在于橢圓形黏液細(xì)胞中，或隨處散在。

2.3 薄層色譜鑒別

2.3.1 息半夏中精氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸的鑒別 取樣品粉末0.5 g，加7%甲醇溶液10mL，加熱回流30 min，濾過，濾液揮至0.5 mL，作為供試品溶液。取精氨酸對(duì)照品，加70%甲醇溶液制每1 mg/mL的溶液，作為對(duì)照品溶液;分別另取丙氨酸對(duì)照品、纈氨酸對(duì)照品、亮氨酸對(duì)照品，加70%甲醇溶液制成濃度均為1mg/mL的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。參照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μL、對(duì)照品溶液1μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇一冰醋酸一水（9：2：1）為展開劑展開，取出晾干，噴茚三酮試液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。在供試品色譜中，與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)（圖2）。

2.3.2 以半夏對(duì)照藥材為對(duì)照物的息半夏薄層色譜鑒別 取各樣品粉末1 g，加乙醇溶液10mL，加熱回流1h，濾過，濃縮至0.5 mL，作為供試品溶液。另取半夏對(duì)照藥材1 g，同法制成對(duì)照藥材溶液，參照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，吸取上述6種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60-90℃）一乙酸乙酯一丙酮一甲酸（10：2：1：0.2）為展開劑展開，取出晾干，噴10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。在供試品色譜中，與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)（圖3）。

2.4 含量測定

參照《中國藥典》（2015年版）中測定方法，水分、總灰、浸出物、總酸測定結(jié)果見表2。

3 小結(jié)與討論

本研究中7個(gè)采樣點(diǎn)息半夏表面顏色上略有差異，粉末顯微鑒別和薄層色譜鑒別表明，其所含成分的種類基本一致，無顯著差異;水分、總灰分.浸出物和總酸含量均符合國家藥品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定（標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：水分不得超過14.0%，總灰分不得過4.0%，浸出物不得少于9.0%，總酸不得低于0.25%），7個(gè)采樣點(diǎn)4個(gè)指標(biāo)均有顯著性差異。薄層色譜對(duì)照品鑒別中，考察了正丁醇一冰醋酸一水（8：3：1）和（9：2：1）、對(duì)照藥材鑒別中，考察了石油醚（60-90℃）一乙酸乙酯一丙酮一甲酸（30：6：4：0.5）和（10：2：1：0.2），均以后者分離效果較佳。

本研究前期調(diào)研了解到目前息半夏的來源有野生和栽培兩種方式，栽培有珠牙繁殖、球莖繁殖、種子繁殖及少量通過組織培養(yǎng)的方式繁育，采收主要在每年5月和11月。各采樣點(diǎn)質(zhì)量差異與繁育方式[4]、采收時(shí)間[5]有關(guān)。通過研究不同繁育方式和采收時(shí)間的息半夏質(zhì)量，可為其品種優(yōu)育和確定采收季節(jié)提供理論依據(jù)，關(guān)于息半夏規(guī)范化種植還有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

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[2]左軍，牟景光，胡曉陽，等.半夏化學(xué)成分及現(xiàn)代藥理作用研究進(jìn)展[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2019（9）：7-9.

[3]寧娜.半夏藥理作用的研究進(jìn)展[J].銅仁職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)術(shù)論壇（自然科學(xué)版），2015，13（2）：41.

[4]馬洪娜，檀龍顏，李煦照，等.半夏種苗繁殖技術(shù)的研究進(jìn)展[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2019，30（3）：675-676.

[5]陳華國，湯洪波，周欣，等.半夏中總生物堿及鳥苷含量動(dòng)態(tài)變化研究[J]安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（3）：148-150.

基金項(xiàng)目：河南省縣（市）創(chuàng)新引導(dǎo)計(jì)劃項(xiàng)目（192207310049）;2018年校級(jí)科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)項(xiàng)目（CXTD-201805）

作者簡介：王海燕（1982-），女，山西忻州人，講師，碩士，主要從事中藥學(xué)研究，（電話）13613768720（電子信箱）512201369@qq.com;通信作者，陳瓊（1966-），女，河南信陽人，教授，主要從事中藥制藥新技術(shù)研究，（電子信箱）599299467@qq.com。