動(dòng)脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血病人血清sLOX-1、netrin-1水平變化及其與病人預(yù)后的關(guān)系

張 蘭 庫(kù)洪彬 王 敏 周 燕

動(dòng)脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血（aneurysmal subarachnoid hemorrhage，aSAH）有起病急、致殘率高和病死率高等特點(diǎn)[1～6]。可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體-1（soluble lectin-like oxidized lowdensity lipoprotein receptor-1，sLOX-1）是由蛋白酶裂解膜結(jié)合受體合成的一種糖蛋白，對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生有重要影響[7]。神經(jīng)軸突向?qū)б蜃?1（axon guidance factor-1，Netrin-1）可促進(jìn)缺血區(qū)域神經(jīng)元再生，減輕缺血性中風(fēng)后的缺血再灌注損傷[8]。研究發(fā)現(xiàn)，動(dòng)脈粥樣硬化病人血清netrin-1 水平低于無(wú)動(dòng)脈粥樣硬化病人，提示netrin-1 可能參與動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程[9]。本文探討aSAH 病人血清sLOX-1、netrin-1水平變化及其與病人預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 前瞻性收集2015 年1 月至2018 年7月收治的aSAH共130例（aSAH組），其中男性82例，女性48例；年齡24～75歲，平均（58.62±6.11）歲；體重指數(shù)（25.38±2.26）kg/m2。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合aSAH 的診斷標(biāo)準(zhǔn)[10]；②首次入院治療，病程＜12 h；③發(fā)病前無(wú)外傷史；④均簽署知情同意書(shū)；⑤臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病史；②合并惡性腫瘤、自身免疫性疾病及造血系統(tǒng)疾??；③再發(fā)SAH；④合并嚴(yán)重心、肝、腎功能損傷；⑤合并嚴(yán)重感染。同時(shí)，選取我院健康體檢者130例（對(duì)照組），其中男性65例，女性65例；年齡28～70歲，平均（55.76±4.82）歲；體重指數(shù)（24.36±2.71）kg/m2。兩組年齡、性別等一般資料相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 檢測(cè)方法 入院24 h內(nèi)，取空腹外周靜脈血5 ml，3 000轉(zhuǎn)/min離心10 min，取上清液，置-80 ℃保存待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)血清sLOX-1、netrin-1水平。sLOX-1試劑盒購(gòu)自天津?yàn)笊镏破房萍加邢薰?，netrin-1試劑盒購(gòu)自上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司。所有操作均按照說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格進(jìn)行。

1.3 預(yù)后評(píng)估 出院6個(gè)月后，采用GOS評(píng)分評(píng)估預(yù)后，4～5分為預(yù)后良好，1～3分為預(yù)后不良[11]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行分析；計(jì)量資料以±s 表示，采用t 檢驗(yàn)；繪制受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線(xiàn)分析敏感度、特異度；應(yīng)用多因素logistic回歸分析預(yù)后危險(xiǎn)因素；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 aSAH 病人血清sLOX-1、netrin-1 變化aSAH 組血清sLOX-1 水平[（1.762±0.610）ng/ml]明顯高于對(duì)照組[（0.520±0.040）ng/ml；P＜0.05]，而aSAH 組血清netrin-1 水平[（254.600±87.331）pg/ml]明顯低于對(duì)照組[（788.534±246.510）pg/ml；P＜0.05]。

2.2 不同預(yù)后病人血清sLOX-1、netrin-1 比較 出院后6 個(gè)月，預(yù)后良好78 例，預(yù)后不良52 例。預(yù)后良好組血清sLOX-1 水平[（1.301±0.560）ng/ml]明顯低于預(yù)后不良組[（2.236±1.121）ng/ml；P＜0.05]，而預(yù)后良好組血清netrin-1 水平[（318.924±120.660）pg/ml]明顯高于預(yù)后不良組[（152.358±61.725）pg/ml；P＜0.05]。

2.3 影響aSAH病人預(yù)后的危險(xiǎn)因素 單因素分析示，糖尿病、高血壓、術(shù)前Hung-Hess 分級(jí)、術(shù)前改良Fisher 分級(jí)、術(shù)前WFNS 分級(jí)、動(dòng)脈瘤大小、治療方式、血清sLOX-1 和netrin-1 是影響aSAH 病人預(yù)后的危險(xiǎn)因素（P＜0.05，表1）。多因素logistic回歸分析顯示，術(shù)前Hung-Hess分級(jí)Ⅲ～Ⅳ級(jí)、術(shù)前改良Fisher分級(jí)Ⅲ～Ⅳ級(jí)、術(shù)前WFNS分級(jí)Ⅳ～Ⅴ級(jí)、血清sLOX-1增高和血清netrin-1降低是aSAH病人預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P＜0.05，表2）。

表1 aSAH病人預(yù)后影響因素的單因素分析結(jié)果

表2 aSAH病人預(yù)后不良影響因素的多因素logistic回歸分析結(jié)果

2.4 血清sLOX-1、netrin-1水平對(duì)aSAH 不良預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值ROC曲線(xiàn)分析顯示，血清sLOX-1、netrin-1 聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)aSAH 預(yù)后不良的曲線(xiàn)下面積為0.923（95%置信區(qū)間為0.778～0.923；P＜0.001），敏感度和特異度分別為0.842和0.814，見(jiàn)圖1。

3 討論

10%～12%的aSAH 病人在就診前已死亡，45%～50%的病人發(fā)病30 d 內(nèi)死于并發(fā)癥，而生存者大多遺留不同程度的神經(jīng)功能缺損和認(rèn)知功能障礙[12]，嚴(yán)重影響病人的生活質(zhì)量。氧化低密度脂蛋白受體-1 屬于E 類(lèi)清道夫受體，可在氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein，oxLDL）誘導(dǎo)下活化內(nèi)皮細(xì)胞，引起內(nèi)皮細(xì)胞及血管平滑肌細(xì)胞損傷、凋亡，介導(dǎo)巨噬細(xì)胞活化和活性氧簇生成，進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞泡沫化，引發(fā)血管功能障礙。sLOX-1可通過(guò)特異性結(jié)合、攝取ox-LDL 參與動(dòng)脈粥樣硬化的形成過(guò)程。動(dòng)脈粥樣硬化是影響顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成和破裂的重要危險(xiǎn)因素。aSAH 病人血清sLOX-1 明顯升高，對(duì)病人預(yù)后有預(yù)測(cè)價(jià)值[13]。Netrin-1 有調(diào)節(jié)引導(dǎo)軸突生長(zhǎng)、細(xì)胞遷移和血管生成的作用。Netrin-1 還具有抗炎特性，可抑制內(nèi)皮細(xì)胞和神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡。此外，netrin-1過(guò)表達(dá)可抑制Notch1信號(hào)通路改善缺血性腦損傷患者預(yù)后[14]。研究表明，血清netrin-1升高與缺血性腦卒中病人預(yù)后改善有關(guān)[15]。

LOX-1 主要存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞，可通過(guò)介導(dǎo)ox-LDL 促進(jìn)平滑肌細(xì)胞增殖和遷移，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，加速動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程；還可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP），引起sLOX-1 表達(dá)增加，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展。MMP 分泌增多對(duì)顱內(nèi)血管內(nèi)皮細(xì)胞也有損害作用，可通過(guò)促進(jìn)血管重塑，導(dǎo)致顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的發(fā)生、發(fā)展。netrin-1可刺激腦血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，引起局灶性血管生成；還可通過(guò)激活其受體neogenin-1增強(qiáng)MMP 催化活性，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的局部降解，導(dǎo)致動(dòng)脈瘤的形成。本文結(jié)果發(fā)現(xiàn)，aSAH 病人血清sLOX-1 水平明顯高于對(duì)照組，而血清netrin-1 水平明顯低于對(duì)照組。這提示血清sLOX-1、netrin-1 與aSAH 發(fā)生、發(fā)展的病理過(guò)程有關(guān)。

本文結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，預(yù)后良好的aSAH 病人血清sLOX-1 水平明顯低于預(yù)后不良的病人，而血清netrin-1 水平明顯高于預(yù)后不良的病人。這提示血清sLOX-1、netrin-1水平可反映aSAH病人的病情變化，可作為判斷aSAH 病人預(yù)后的標(biāo)志物。發(fā)病時(shí)，aSAH 病人腦血管組織氧化應(yīng)激水平和活性氧的產(chǎn)生增加，LOX-l與oxLDL等配體相結(jié)合，增強(qiáng)血管局部氧化應(yīng)激反應(yīng)，從而加劇病情進(jìn)展。血清netrin-1水平是反映aSAH病情嚴(yán)重程度、炎癥和預(yù)后的潛在生物標(biāo)志物[16]。血清sLOX-1 和netrin-1 是影響aSAH病人預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，表明血清sLOX-1、netrin-1 變化與aSAH 臨床預(yù)后結(jié)局有相關(guān)性。sLOX-1、netrin-1聯(lián)合檢測(cè)的AUC高于其單獨(dú)檢測(cè)，說(shuō)明兩者聯(lián)合檢測(cè)能明顯提高aSAH 別人預(yù)后判斷的準(zhǔn)確性。

總之，血清sLOX-1 升高、netrin-1 降低是aSAH預(yù)后不良的重要危險(xiǎn)因素，兩者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)aSAH預(yù)后具有較高預(yù)測(cè)價(jià)值。