宮頸癌組織誘捕受體3在宮頸病變中的表達水平與高危型人乳頭瘤病毒感染的相關性研究

王碧霞 巴靜 黃春優(yōu)

[摘要]目的 探討宮頸癌組織誘捕受體3（DcR3）在宮頸病變中的表達水平與高危型人乳頭瘤病毒（HR-HPV）感染的相關性。方法 回顧性分析2017年1月～2018年6月我院收治的80例宮頸癌及宮頸上皮內瘤病變（CIN）患者臨床資料，經病理學分組分為CINⅠ組16例，CINⅡ組24例，CINⅢ組27例及宮頸癌組13例，比較各組DcR3表達水平，分析各組HR-HPV感染陽性檢出率及與癌變程度相關性。結果 CINⅠ組HR-HPV陽性檢出率為43.75%，CINⅡ組HR-HPV陽性檢出率為62.50%，CINⅢ組HR-HPV陽性檢出率為88.89%，宮頸癌組HR-HPV陽性檢出率92.31%;CINⅠ組DcR3陽性檢出率為31.25%，CINⅡ組DcR3陽性檢出率為45.83%，CINⅢ組DcR3陽性檢出率為66.67%，宮頸癌組DcR3陽性檢出率為76.92%。經Spearman分析，CIN嚴重程度與HR-HPV感染、DcR3表達成正相關（r=0.426、0.324，P<0.05）;且DcR3在宮頸病變中表達水平與HR-HPV感染成正相關（r=0.681，P<0.05）。結論 高危型HPV感染、DcR3表達與宮頸癌、宮頸上皮內瘤病變成正相關性，即HR-HPV、DcR3陽性率隨CIN病變程度升高而升高，且DcR3在宮頸病變中的表達水平與HR-HPV感染成正相關。

[關鍵詞]宮頸癌;宮頸上皮內瘤病變;高危型人乳頭瘤病毒

[中圖分類號] R737.33? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-4721（2020）5（b）-0118-03

Correlation between the expression level of expression of Decoy receptor 3 in cervical lesions and high-risk human papillomavirus infection

WANG Bi-xia? ?BA Jing? ?HUANG Chun-you

Department of Obstetrics and Gynecology， Humen Hospital of Dongguan City， Guangdong Province， Dongguan? ?523900， China

[Abstract] Objective To investigate the correlation between the expression of Decoy receptor 3 （DcR3） in cervical lesions and high-risk human papillomavirus （HR-HPV） infection. Methods The clinical data of 80 patients with cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasia （CIN） from January 2017 to June 2018 were retrospectively analyzed. The pathological group was divided into 16 cases of CINⅠ group and 24 cases of CIN Ⅱ group. For example， 27 patients in the CINⅢ group and 13 patients in the cervical cancer group. The expression levels of DcR3 in each group were compared. The positive rate of HR-HPV infection and the correlation with the degree of carcinogenesis were analyzed. Results The positive rate of HR-HPV in CIN Ⅰgroup was 43.75%， the positive rate of HR-HPV in CIN Ⅱgroup was 62.50%， the positive rate of HR-HPV in CIN Ⅲ group was 88.89%. the positive rate of HR-HPV in cervical cancer group was 92.31%. The positive rate of DcR3 in CIN Ⅰgroup was 31.25%， the positive rate of DcR3 in CIN Ⅱgroup was 45.83%， and the positive rate of DcR3 in CIN Ⅲ group was 66.67%， the positive rate of DcR3 was 76.92% in the cervical cancer group. The Spearman analysis showed that the severity of CIN was positively correlated with HR-HPV infection and DcR3 expression（r=0.426， 0.324， P<0.05）; and the expression level of DcR3 in cervical lesions and HR-HPV infection is positively correlated（r=0.426， 0.324， P<0.05）. Conclusion The high-risk HPV infection and DcR3 expression are positively correlated with cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasia. The positive rate of HR-HPV and DcR3 increases with the degree of CIN lesion， and the expression level of DcR3 in cervical lesions and HR-HPV infection is positively correlated.

[Key words] Cervical cancer; Cervical intraepithelial neoplasia; High-risk human papillomavirus

宮頸癌是一種常見女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，其發(fā)病率較高且近年來呈年輕化趨勢[1]。宮頸癌病變位于機體子宮頸鱗狀上皮部位或腺上皮部位，分為鱗癌、腺癌和鱗腺癌，由病毒感染、不健康性生活、多孕多產等引起，可造成患者陰道排液、陰道流血、下肢腫痛、尿頻尿急等癥狀，嚴重者可出現貧血、惡病質等全身衰竭癥狀甚至死亡，對女性身心健康及生命健康造成嚴重影響[2-3]。但宮頸癌癌前病變期對病灶進行切除將不會威脅患者生命安全，故早期診斷和治療對宮頸癌患者有重要意義。高危型人乳頭瘤病毒（HR-HPV）常侵入機體皮膚及黏膜組織，是誘發(fā)宮頸上皮內瘤病變（CIN）和宮頸癌的主要病原菌，是宮頸癌的發(fā)病與發(fā)展中的重要因素，故確定HR-HPV與宮頸癌及宮頸上皮內瘤病變的關系，對宮頸癌篩查及指導治療有關鍵作用[4]。本研究采用PCR-反向點雜交法檢測宮頸癌、宮頸上皮內瘤病變患者HR-HPV陽性表達率，探討宮頸癌、宮頸上皮內瘤病變與高危型HPV感染的相關性，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

回顧性分析2017年1月～2018年6月我院收治的80例宮頸癌及CIN患者的臨床資料，經過病理學分組分為CINⅠ組16例，CINⅡ組24例，CINⅢ組27例及宮頸癌組13例。CINⅠ組中，年齡25～67歲，平均（43.66±5.03）歲;產次0～3次，平均（1.23±0.28）次;孕次0～6次，平均（3.53±0.21）次。CINⅡ組中，年齡20～68歲，平均（43.09±5.16）歲;產次0～3次，平均（1.26±0.32）次;孕次0～5次，平均（3.49±0.22）次。CINⅢ組中，年齡22～65歲，平均（43.24±5.32）歲;產次0～3次，平均（1.26±0.20）次;孕次0～6次，平均（3.50±0.29）次。宮頸癌組中，年齡22～66歲，平均（43.78±5.02）歲;產次0～3次，平均（1.25±0.22）次;孕次0～6次，平均（3.55±0.33）次。四組的一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。本研究經我院醫(yī)學倫理委員會批準。

1.2納入及排除標準

納入標準：符合《宮頸癌及癌前病變規(guī)范化診療指南（試行）》[5]中宮頸癌、CIN診斷標準，經宮頸液基細胞學檢查確診;7 d內無陰道用藥史者;簽署知情同意書。排除標準：心肺、肝腎等重要臟器障礙者;妊娠或哺乳期婦女;宮頸手術史或子宮切除者;有精神、溝通障礙者。

1.3方法

對宮頸癌、CIN患者進行宮頸癌組織誘捕受體3（DcR3）、HR-HPV檢測，采用免疫組織化學法檢測DcR3蛋白表達，非經期采集患者DNA樣本，專用HPV取樣器置入宮頸外口，順時針旋轉5周，存入細胞保存液管并放入2～8℃保存，于1周內采用PCR-反向點雜交法檢測。利用HPV的基因特點設計特異引物，將18種高危型（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83）和5種低危型（HPV6、11、42、43、81）在內的分型探針進行雜交，依據雜交信號的有無判斷各HPV基因型號存在。

1.4觀察指標及評價標準

DcR3檢查，細胞質內檢出棕黃色顆粒，隨機選取5個有代表性的視野，每個視野計數100個細胞，若陽性細胞數>20%即為陽性。高危型HPV陽性為HPV-DNA含量≥1.0 pg/ml，即RLU比值≥1.0;陰性為HPV-DNA含量<1.0 pg/ml，即RLU比值<1.0。

1.5統(tǒng)計學方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計學軟件處理數據，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，采用t檢驗;計數資料以率表示，采用χ2檢驗，采用Spearman檢驗進行相關性分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1四組高危HPV、DcR3陽性檢出率的比較

CINⅠ組HR-HPV陽性檢出率為43.75%，CINⅡ組HR-HPV陽性檢出率為62.50%，CINⅢ組HR-HPV陽性檢出率為88.89%，宮頸癌組HR-HPV陽性檢出率92.31%;CINⅠ組DcR3陽性檢出率為31.25%，CINⅡ組DcR3陽性檢出率為45.83%，CINⅢ組DcR3陽性檢出率為66.67%，宮頸癌組DcR3陽性檢出率為76.92%（表1）。

2.2宮頸癌、CIN與HPV感染、DcR3的相關性分析

經Spearman分析，CIN嚴重程度與HPV、DcR3感染成正相關（r=0.426、0.324，P=0.000、0.003）;DcR3在宮頸病變中的表達水平與HR-HPV感染成正相關（r=0.681，P=0.003）。

3討論

宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)發(fā)病率最高常見腫瘤疾病，發(fā)生于機體子宮頸鱗狀上皮部位或腺上皮部位，分為鱗癌、腺癌和鱗腺癌，可通過淋巴擴散和轉移或直接蔓延，其發(fā)病率及致死率保持較高水平[6-8]。宮頸癌多由病毒感染、多個性伴侶、不健康生活方式引起，可造成患者陰道流血、米泔狀排液、尿頻、尿毒癥等癥狀，病情延誤至晚期可造成患者惡病質等全身衰竭癥狀，嚴重威脅患者生命安全及健康[9]。宮頸癌由CIN病變發(fā)展而來，而CIN患者中僅小部分可發(fā)展為宮頸浸潤癌，大多數CIN最終可通過病灶切除消退，不會威脅患者生命安全[10]。早期診斷和治療對宮頸癌患者有重要作用。

HPV是一種球形DNA病毒，屬于乳多空病毒科，可通過母嬰傳播、醫(yī)源性感染、間接性或密切接觸、性傳播等感染途徑侵犯黏膜上皮和皮膚，誘發(fā)尋常疣、尖銳濕疣等良性腫瘤或宮頸癌等惡性腫瘤[11]。HPV是CIN和宮頸癌發(fā)生和發(fā)展的危險因素，根據其感染危險性高低可分為HR-HPV及低危型人乳頭瘤病毒（LR-HPV），其中持續(xù)性HR-HPV感染可誘發(fā)和推動CIN發(fā)展為宮頸癌，是宮頸CIN及宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的重要影響因素[12]。確定HR-HPV與宮頸癌及宮頸CIN的關系對宮頸癌篩查及指導治療有關鍵作用。本研究結果顯示，CINⅠ組高危型HPV感染陽性檢出率為43.75%，CINⅡ組高危型HPV感染陽性檢出率為62.50%，CINⅢ組高危型HPV感染陽性檢出率為88.89%，宮頸癌組 HR-HPV感染陽性檢出率為92.31%，且經Spearman分析，CIN嚴重程度與HPV感染成正相關（r=0.426，P=0.000）;結果提示，高危型HPV感染與宮頸癌、宮頸上皮內瘤病變成正相關性（r=0.681，P=0.003），HR-HPV陽性率隨CIN病變程度升高，對高危型HPV干預可改變癌前病變發(fā)展。分析其原因可能為：HPV進入機體后長期的隱匿和大量復制，造成機體免疫功能下降，通過微創(chuàng)傷造成陰道局部感染;HPV病毒整合后為宮頸上皮細胞提供生長優(yōu)勢環(huán)境，使HPV癌基因持續(xù)性高表達;HPV的E6和E7蛋白結合p53后使其失活，造成HIF-1α降解，導致機體失去抑癌作用。研究表明，宮頸發(fā)生HR-HPV感染后逐漸從上皮基底層病變過渡到上皮全層至基底膜引起浸潤癌的過程要10年，且逆轉率較大，感染后有足夠時間對其干預，故積極采取各種手段減少HR-HPV感染可降低宮頸癌發(fā)生可能性[13]。HR-HPV感染平均清除時間長達13個月，且其時間與患者生殖道炎癥、性伴侶個數、吸煙史、年齡等因素相關[14]。臨床通過藥物治療、光動力療法、冷凍、微波治療、激光、電灼療法及綜合療法等，各有其優(yōu)、劣勢。本研究結果顯示，DcR3表達與宮頸癌、宮頸上皮內瘤病變成正相關性。結果提示，DcR3陽性率隨CIN病變程度升高，其水平可在一定程度上反應癌前病變程度。分析其原因可能為DcR3在人體胃、肺、腦等正常組織中表達呈較低水平，在肺癌、女性生殖道惡性腫瘤等癌細胞株呈高表達狀態(tài)，且可能與淋巴結轉移、腫瘤細胞分化程度等相關[15]。

綜上所述，HR-HPV感染與宮頸癌、宮頸上皮內瘤病變成正相關性，DcR3、HR-HPV陽性率隨CIN病變程度升高，且DcR3在宮頸病變中的表達水平與HR-HPV感染成正相關。

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（收稿日期：2019-09-06? 本文編輯：崔建中）