新發(fā)2型糖尿病患者血清FGF19與PEDF水平治療前后變化研究

肖艷新 趙新翠 賈麗艷 王翯 王君

糖尿病是常見病、多發(fā)病，是嚴(yán)重威脅人類健康的世界性公共衛(wèi)生問(wèn)題，高血脂、肥胖常伴隨著高血糖存在。成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子19（fibroblast growth factor19，F(xiàn)GF19）可調(diào)控糖脂代謝、膽汁酸合成等一系列生物學(xué)過(guò)程，為糖尿病、肥胖等多種疾病的治療帶來(lái)了希望[1]。色素上皮衍生因子（pigment epithelium derivedfactor，PEDF）是一種分泌性蛋白，具有抗血管生成、抑制氧化應(yīng)激等作用[2]，與糖尿病及其并發(fā)癥有重要關(guān)系。本研究對(duì)健康人群和新發(fā)肥胖2型糖尿病（T2DM）患者的血清FGF19、PEDF進(jìn)行測(cè)定，旨在了解FGF19、PEDF在糖尿病發(fā)生、發(fā)展中的作用，為臨床診療提供依據(jù)。

1 對(duì)象和方法

1.1 對(duì)象 選取2016年9月至2017年12月就診于我院門診及住院的170例新發(fā)T2DM患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合世界衛(wèi)生組織制定的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]；（2）年齡18～65歲；（3）初診病例且未接受任何藥物治療措施。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）其他類型糖尿?。唬?）糖尿病急性并發(fā)癥如糖尿病酮癥酸中毒，糖尿病高滲非酮癥昏迷，急性感染及嚴(yán)重的糖尿病慢性并發(fā)癥如視網(wǎng)膜脫離、腎功能不全等；（3）惡性高血壓，嚴(yán)重心、肺、肝臟疾患以及惡性腫瘤、風(fēng)濕性疾病等系統(tǒng)性疾病；（4）妊娠或哺乳期婦女；（5）合并精神或認(rèn)知障礙，難以配合隨訪及治療者。根據(jù)《中國(guó)成人超重和肥胖癥預(yù)防控制指南》按照體重指數(shù)（body mass index，BMI）將患者分為正常體重組85例（BMI＜24kg/m2，DM 組）和肥胖組 85 例（BMI≥28kg/m2，ODM組），DM組男42例，女43例，平均年齡（52.8±6.5）歲，ODM 組男 44 例，女 41 例，平均（53.6±7.1）歲；選取同期門診健康體檢人群60例作為對(duì)照組（NC組）,男 29例，女 31 例，平均年齡（50.1±5.6）歲。3組間性別、年齡的比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。所有研究對(duì)象均進(jìn)行口服葡萄糖耐量試驗(yàn)檢查明確血糖情況。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)通過(guò)，所有受檢者均知情并簽署知情同意書。

1.2 方法 測(cè)量身高、體重、腰圍、血壓，根據(jù)體重身高計(jì)算BMI。清晨抽取空腹靜脈血3ml，測(cè)定血清總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesferol，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesferol，HDL-C）、空腹血糖（fasting blood glucose，F(xiàn)BG）、餐后 2h 血糖（postprandial blood glucose，PBG）、空腹胰島素、糖化血紅蛋白（glycosylated hemoglobin，HbA1C）、C 反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）。采用Olympus AU2700全自動(dòng)生化分析儀(日本)測(cè)定血脂、血糖，Cobas8000（瑞士）電化學(xué)發(fā)光法測(cè)定胰島素水平，IMMAGE800蛋白分析儀（美國(guó)）散射比濁法測(cè)定CRP。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定血清FGF19、PEDF水平，試劑盒購(gòu)自美國(guó)Chemicon公司。根據(jù)空腹血糖及胰島素水平計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR=空腹血糖×空腹胰島素/22.5）。所有T2DM患者均給予個(gè)體化降糖方案，如無(wú)禁忌降糖方案均包括二甲雙胍0.5g 2次/d（中美上海施貴寶制藥有限公司，規(guī)格：0.5g）起始治療，最大劑量為2.0g/d。同時(shí)給予飲食及運(yùn)動(dòng)指導(dǎo)，根據(jù)血糖水平調(diào)整降糖藥物以使血糖盡快達(dá)標(biāo)。治療6個(gè)月后分別測(cè)定身高、體重、腰圍、血壓及相關(guān)生化指標(biāo)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件。正態(tài)分布的計(jì)量資料以表示。多組間比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用SNK-q檢驗(yàn)。采用Spearman相關(guān)分析血清FGF19和PEDF與各指標(biāo)相關(guān)性，多元逐步回歸分析血清FGF19和PEDF的影響因素。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組對(duì)象治療前后臨床及血液生化指標(biāo)的比較 3組間治療前 SBP、DBP、BMI、腰圍、血脂、血糖、HbA1C、HOMA-IR、CRP的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。治療后DM組、ODM組血壓、BMI、血糖、胰島素抵抗及血脂均較治療前好轉(zhuǎn)，但ODM組BMI、腰圍、TC、LDLC、HOMA-IR仍高于DM組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表 1。

2.2 治療前FGF19、PEDF與臨床及血液生化指標(biāo)相關(guān)性分析 治療前 FGF19與 BMI、腰圍、FBG、HbA1C、TC、LDL-C、CRP、HOMA-IR 均呈負(fù)相關(guān)（均 P＜0.05），PEDF與 BMI、腰圍、FBG、PBG、HbA1C、TC、CRP 均呈正相關(guān)（均 P＜0.05），見表 2。

2.3 治療后FGF19、PEDF差值與臨床及血液生化指標(biāo)相關(guān)性分析 治療后FGF19差值與BMI、腰圍、FBG、HbA1C、CRP、HOMA-IR 差值呈負(fù)相關(guān)（均 P＜0.05），PEDF差值與 BMI、FBG、PBG、HbA1C、CRP 差值均呈正相關(guān)（均 P＜0.05），見表 3。

2.4 FGF19、PEDF差值影響因素的多元逐步回歸分析以FGF19差值為因變量，以BMI、腰圍、FBG、HbA1C、CRP、HOMA-IR差值為自變量，行多元逐步回歸分析，顯示BMI、腰圍差值是FGF19水平變化影響因素；以PEDF 差值為因變量，以 BMI、FBG、PBG、HbA1C、CRP 差值為自變量，行多元逐步回歸分析，顯示CRP、FBG差值是 PEDF 水平變化影響因素（P＜0.05），見表 4。

3 討論

FGF19主要在回腸分泌，屬于內(nèi)分泌型因子，發(fā)揮抑制膽汁酸合成及調(diào)節(jié)肝臟代謝作用[4]，β-Klotho基因家族調(diào)控FGF19的代謝。有研究發(fā)現(xiàn)，用FGF19治療高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖小鼠，小鼠體重下降，血糖血脂水平改善，胰島素敏感性增強(qiáng)[5]。人體研究發(fā)現(xiàn)，T2DM患者血清FGF19水平較對(duì)照組降低，而通過(guò)部分胃切除術(shù)或胃腸吻合術(shù)降低體重后，F(xiàn)GF19水平增加，糖代謝指標(biāo)好轉(zhuǎn)[6]。同樣，肥胖人群FGF19水平降低，減重后FGF19水平增加，肥胖患者皮下脂肪和內(nèi)臟脂肪中的β-Klotho轉(zhuǎn)錄水平顯著降低[7]。提示FGF19在糖脂代謝中發(fā)揮重要作用，F(xiàn)GF19水平下降后能量代謝減少，可能導(dǎo)致肥胖及糖脂代謝紊亂。本研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病患者較NC組FGF19水平降低，肥胖糖尿病患者下降更明顯，治療后FGF19水平上升，與文獻(xiàn)結(jié)果一致。治療前FGF19基線水平與BMI及腰圍、糖脂代謝指標(biāo)、炎性指標(biāo)相關(guān)，治療后多元逐步回歸分析顯示，治療后FGF19水平差值只與BMI及腰圍變化差值有關(guān)，與糖脂代謝指標(biāo)無(wú)關(guān)，與Gallego-Escuredo研究結(jié)果一致[8]。該研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，調(diào)整BMI后，F(xiàn)GF19水平與葡萄糖代謝異常指標(biāo)相關(guān)性并不顯著，推測(cè)脂肪和肝臟組織β-Klotho表達(dá)下降導(dǎo)致FGF19水平降低，從而出現(xiàn)代謝紊亂。二甲雙胍可以影響血清FGF19表達(dá)及其受體水平[9]，但本研究糖尿病患者入組后均應(yīng)用二甲雙胍治療，且無(wú)治療劑量差異，推測(cè)與藥物影響無(wú)關(guān)。DePaoli等[10]給予T2DM患者應(yīng)用FGF19類似物后并未看到血糖改善，但健康志愿者應(yīng)用7d后，HDL-C水平增加了26%[11]。提示FGF19類似物在人體研究中可能與動(dòng)物模型不同，進(jìn)一步可研究餐后FGF19水平變化及加強(qiáng)基礎(chǔ)試驗(yàn)研究。Kir等[12]在動(dòng)物模型中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)GF19在敲除胰島素基因的小鼠中仍發(fā)揮降糖作用，而給予肥胖大鼠側(cè)腦室注射FGF19可以降低體重，減輕糖耐量異常[13]。獨(dú)立于胰島素及直接作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)證明FGF19通過(guò)多種途徑調(diào)節(jié)糖脂代謝。

表1 3組治療前后臨床及血液生化指標(biāo)的比較

表2 治療前FGF19、PEDF與臨床及血液生化指標(biāo)相關(guān)性分析

表3 治療后FGF19、PEDF差值與臨床及血液生化指標(biāo)差值相關(guān)性分析

表4 治療后FGF19、PEDF差值影響因素的多元逐步回歸分析

PEDF屬于絲氨酸蛋白酶抑制劑基因家族，具有營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)、調(diào)節(jié)血管通透性、抑制氧化應(yīng)激等生物學(xué)作用，與多囊卵巢綜合征、代謝綜合征、2型糖尿病等多種代謝性疾病相關(guān)[14-16]。研究發(fā)現(xiàn)，T2DM患者血清PEDF水平升高[17]，與本研究結(jié)果一致。Sabater等[18]研究發(fā)現(xiàn)，高糖刺激離體肝臟組織分泌PEDF，從而導(dǎo)致糖尿病患者血清水平增加。本研究同時(shí)發(fā)現(xiàn)，肥胖T2DM患者血清PEDF水平更高，治療后下降。推測(cè)可能與原始脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中PEDF表達(dá)增加有關(guān)[19]。慢性低度炎癥增加是T2DM發(fā)病機(jī)制之一，PEDF在氧化損傷過(guò)程中起到抑制炎癥反應(yīng)，保護(hù)視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞等作用[20]。本研究發(fā)現(xiàn)，治療前后PEDF差值與CRP差值呈正相關(guān)，推測(cè)PEDF可能作為T2DM發(fā)病預(yù)測(cè)因子。

綜上所述，F(xiàn)GF19水平變化與肥胖相關(guān)，F(xiàn)GF19可能是評(píng)估肥胖的指標(biāo)。而PEDF與血糖及炎性指標(biāo)相關(guān)，PEDF可能是T2DM發(fā)病預(yù)測(cè)因子，同時(shí)反映了糖尿病患者體內(nèi)慢性炎癥水平。進(jìn)一步需探索肥胖及糖尿病患者餐后血清FGF19及PEDF水平與代謝指標(biāo)相關(guān)性，及其發(fā)揮作用相關(guān)分子機(jī)制。