紅景天中有效成分山萘酚的薄層色譜鑒別

胡英婕

(錦州醫(yī)科大學(xué)醫(yī)療學(xué)院，遼寧 錦州 121000)

紅景天是《中國藥典》一部收錄的中藥材，具有益氣活血，通脈平喘功效，用于氣虛血淤，胸痹心痛，中風(fēng)偏癱，倦怠氣喘等癥[1]。近年來國內(nèi)外的藥學(xué)工作者對(duì)紅景天進(jìn)行了深入的研究，提出了紅景天具有類似人參“扶正固本”的“適應(yīng)原樣”的作用，而且在某些方面還優(yōu)于人參，沒有人參興奮作用過強(qiáng)的不足。紅景天所含有效成分具有強(qiáng)心鎮(zhèn)靜、調(diào)節(jié)新陳代謝、調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)雙向調(diào)節(jié)血糖、血壓的作用，用于治療腦血管疾病，老年性心肌能衰竭、糖尿病、低血壓等癥，也用于病后體虛、年老體弱、神經(jīng)乏力等[2]。

現(xiàn)代藥理研究表明，山萘酚為黃酮類化合物,具有抗癌、抗氧化、抗病毒、抗炎、抗菌、增強(qiáng)機(jī)體免疫等多種藥理作用，是紅景天主要有效成分之一[3]。《中國藥典一部》(2015版)紅景天質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中有紅景天苷的薄層色譜鑒別，而沒有山萘酚的鑒別。本研究根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)[4-6]，建立紅景天中有效成分山萘酚的薄層色譜鑒別方法，對(duì)完善中藥材紅景天的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其他藥材中含有山萘酚成分的鑒別提供借鑒。

1 材料

KQ-100A 型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，F(xiàn)A2004N電子天平(上海精密儀器公司)，HH-S恒溫水浴鍋(江蘇醫(yī)療儀器廠)，山萘酚對(duì)照品(購自中國食品藥品檢定研究院)，甲醇、鹽酸，環(huán)己烷、乙酸乙酯、甲酸、乙醇、三氯甲烷、丙酮為分析純。紅景天藥材，經(jīng)遼寧錦州大德堂藥店王景山執(zhí)業(yè)藥師鑒定為正品。

2 方法

2.1 山萘酚對(duì)照品溶液的制備

取山萘酚對(duì)照品2mg，用甲醇配制成濃度為1mg/mL的對(duì)照品溶液。

2.2 山萘酚供試品溶液制備方法考察

(1)取本品粉末(過三號(hào)篩)約0.5g，用甲醇-鹽酸混合液(甲醇終濃度50%，鹽酸終濃度2.0mol/L)于90℃水浴回流水解1h。

(2)用醋酸乙酯浸泡一夜，第二日在恒溫水浴鍋(35℃)加熱回流1h。

(3)用60%乙醇水溶液，料液比1∶15混合，超聲波提取，超聲波功率：100W，超聲頻率：35赫茲，提取方式：間隔2min超聲作用一次，超聲時(shí)間5min，總提取時(shí)間28min，提取溫度35℃。

2.3 展開系統(tǒng)的篩選

Ⅰ 三氯甲烷-甲醇-丙酮-水(6∶3∶1∶1)的下層溶液

Ⅱ 三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)于5-10℃放置12h的下層溶液

Ⅲ 環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸(2∶1∶0.1)

2.4 山萘酚供試品溶液制備方法和展開系統(tǒng)的優(yōu)選

用供試品溶液制備方法2和3制備的供試液，分別用3個(gè)展開系統(tǒng)展開后，斑點(diǎn)模糊一片，說明制備方法2和3分離效果不好。用供試品溶液制備方法1制得的供試液，用展開系統(tǒng)Ⅰ展開后，Rf值為0.2；用展開系統(tǒng)Ⅱ展開后，展開時(shí)間過長；而用展開系統(tǒng)Ⅲ展開后，Rf值為0.4，斑點(diǎn)清晰，圓整，重現(xiàn)性也好。因此，采用供試品溶液制備方法1制得的供試液，用展開系統(tǒng)Ⅲ展開。

2.5 薄層色譜鑒別檢測限的確定

取山萘酚對(duì)照品溶液(1mg/mL)0.5,1,1.5,2,2.5,3μL分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，按照薄層色譜鑒別方法操作，結(jié)果自1μL起，可見到明顯斑點(diǎn)，故山萘酚的最小檢出量為1μg。

3 結(jié)果

取三種不同產(chǎn)地(黑龍江、寧夏、四川)紅景天藥材，分別制成供試品溶液。取硅膠G薄層板，105℃活化后，吸取對(duì)照品溶液和3種供試品溶液各2μL,以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸(2∶1∶0.1)為展開劑，展開，展距約為10cm，取出，晾干。噴以5%AlCl3乙醇溶液，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上出現(xiàn)相同的斑點(diǎn)(見照片1)。本方法可將山萘酚與其他成分較好的分離，而且鑒別的靈敏度較高，專屬性好。

照片1

1.山萘酚對(duì)照品;2.供試液(紅景天藥材產(chǎn)地：黑龍江) ;3.供試液(紅景天藥材產(chǎn)地：寧夏);4.供試液(紅景天藥材產(chǎn)地：四川)

4 討論

(1)提取方法的考察 首先對(duì)回流提取法、超聲提取法和酸水解提取進(jìn)行了比較，結(jié)果回流提取和超聲提取所得供試品溶液提取效果差，經(jīng)展開劑展開后，均未呈現(xiàn)清晰、圓整的斑點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)證明酸水解法提取效果好，斑點(diǎn)圓整、清晰。

(2)因山萘酚含有酚羥基，顯酸性，展開系統(tǒng)中加入少量甲酸，能有效控制主斑點(diǎn)不擴(kuò)散，保持斑點(diǎn)更為圓整，實(shí)驗(yàn)證明展開系統(tǒng)中加入少許甲酸展開效果更好。