液相色譜質(zhì)譜法檢測尿液中的痕量甲基苯丙胺

吳 輝

（福建歷思司法鑒定所，福建廈門 361000）

在以往的檢測方法中，尿液中的甲基苯丙胺含量檢測方法檢出限在1ng/mL，該方法檢出限基本上能追溯到吸毒人員一周內(nèi)吸食甲基苯丙胺；對吸毒人員毛發(fā)進(jìn)行檢測，使用剪刀剪取涉嫌人員頭發(fā)時(shí)，無法取到毛囊，貼于頭皮撿取也往往只能剪取到1mm甚至更往后的頭發(fā)，因此毛發(fā)中毒品檢測往往只能夠追溯到吸毒人員15d前或20d前吸食的情況；那么10d以前，20d以內(nèi)的吸毒情況則很難被檢測到。本實(shí)驗(yàn)使用超高靈敏度的液相色譜質(zhì)譜法對尿液中甲基苯丙胺進(jìn)行檢測[1]，由于靈敏度的極大提高，能夠檢測到吸毒人員10d前，乃至20d前吸食甲基苯丙胺的成分。

1 材料與方法

1.1 試劑與材料

甲基苯丙胺標(biāo)準(zhǔn)品（美國Sigma 1mg/mL）、苯丙胺標(biāo)準(zhǔn)溶液（美國Sigma 1mg/mL）、質(zhì)譜純甲醇、乙腈、甲酸；分析純氨水；實(shí)驗(yàn)用水為一級(jí)水；MCX固相萃取柱（Waters Oasis MCX 500mg）。

1.2 儀器與測試條件

（1）儀器： Waters UPLC-TQXS超高效液相色譜串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜、高速離心機(jī)（湘儀H1650）、氮吹儀（杭州奧盛WD-12）、漩渦振蕩器（德國IKA）。

（2）色譜條件： RESTEK Ultra PFPP（3μm 100×2.1mm）超高效液相色譜柱；柱溫35℃；流動(dòng)相A1：B1=30%水（0.1%甲酸）：70%乙腈（0.1%甲酸）0.4mL/min等度洗脫。

（3）質(zhì)譜條件 ：離子源：ESI+，MRM選擇離子模式，毛細(xì)管電壓2.5kV，去溶劑溫度550 ℃，碰撞氣為高純氬氣。

1.3 樣品來源

公安部門送檢兩份尿液檢材，一份尿液的當(dāng)事人自述12天前有吸食冰毒，另一當(dāng)事人自述15d前有吸食冰毒。另取2份空白尿液2mL，分別添加10μL和20μL的10ng/mL 的甲基苯丙胺和苯丙胺漩渦混勻，則一份尿液樣品中目標(biāo)物濃度為50pg/mL，另一份尿液樣品中目標(biāo)物濃度為100pg/mL。

1.4 制樣

將樣品裝入5mL離心管進(jìn)行離心，準(zhǔn)確移取1mL尿液樣品，進(jìn)行固相萃取。萃取柱使用5mL 甲醇活化，5mL水平衡，加入1mL尿液樣品后使用10%甲醇水溶液淋洗，加入5mL 5%氨水甲醇溶液洗脫。洗脫液用氮吹儀濃縮至干后加入1mL甲醇復(fù)溶，取10μL進(jìn)樣[2-3]。

1.5 儀器設(shè)置

配制50ng/mL甲基苯丙胺和苯丙胺溶液作調(diào)諧液，優(yōu)化質(zhì)譜參數(shù)。甲基苯丙胺錐孔電壓為20，150.1/119.1離子對碰撞能量為10eV，150.1/91.1離子對碰撞能量為16eV；苯丙胺錐孔電壓為20，136.1/119.1離子對碰撞能量為8eV，136.1/91.1離子對碰撞能量為14eV。配制甲基苯丙胺和苯丙胺標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度分別為5、10、20、50、100、200、500、1 000pg/mL，各取10μL進(jìn)樣后，甲基苯丙胺定性離子對為150.1/119.1，定量離子對為150.1/91.1，線性方程為Y=947.618×X+2586.1，r=0.999 6；苯丙胺定性離子對為136.1/119.1，定量離子對為136.1/91.1，線性方程為Y=250.379×X-31.0584，r=0.9996。甲基苯丙胺和苯丙胺線性均良好，且曲線最低濃度點(diǎn)5pg/mL時(shí)，甲基苯丙胺信噪比為24.308，苯丙胺信噪比為27.070，滿足定量限信噪比大于10的要求。選擇離子圖見圖1。

表1 甲基苯丙胺標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)

圖1 200pg/mL甲基苯丙胺和苯丙胺MRM選擇離子圖

2 結(jié)果

50pg/mL目標(biāo)物尿液樣品經(jīng)提取10μL上機(jī)檢測，檢出甲基苯丙胺含量為38.1pg/mL，檢出苯丙胺含量為34.5pg/mL；100pg/mL目標(biāo)物尿液樣品經(jīng)提取10μL上機(jī)檢測，檢出甲基苯丙胺含量為75.8pg/mL，檢出苯丙胺含量為71.1pg/mL。則該提取方法中甲基苯丙胺的回收率為76.0%，苯丙胺的回收率為70.4%。甲基苯丙胺定量標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖2。

圖2 甲基苯丙胺定量標(biāo)準(zhǔn)曲線

自述12d前有吸食冰毒情況的尿液中檢出甲基苯丙胺含量為191.8pg/mL，檢出苯丙胺含量為192.1pg/mL；自述15d前有吸食冰毒情況的尿液中檢出甲基苯丙胺含量為12.9pg/mL，檢出苯丙胺含量為23.0pg/mL。

3 討論

對尿液中甲基苯丙胺使用MCX固相萃取，樣品提取效果好，回收率高，同時(shí)實(shí)際樣品測試數(shù)據(jù)結(jié)果和當(dāng)事人供述情況相符，因此該方法能有效對10天，乃至15天前涉嫌吸毒人員的尿液進(jìn)行鑒定，為辦案單位提供相關(guān)證據(jù)，提高辦案效率。