黨參多糖不同組分的抗炎活性及機制研究

孟燕　徐玉潔　張寶徽　常聰　鄭國華　吳勇

中圖分類號 R285 文獻標(biāo)志碼 A 文章編號 1001-0408（2020）11-1348-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.11.11

摘 要 目的：篩選出黨參多糖中具有較好抗炎效果的組分，并探索其抗炎機制。方法：以黨參藥材為樣品，采用水提醇沉法得黨參粗多糖（CP）。將CP通過DEAE Sepharose Fast Flow、SephadexG-150等凝膠柱分離純化后得到組分CP1-2-1、CP3-1-1，并對其進行表征。采用MTT法測定0.01、0.1、1、10、100 μg/mL的CP、CP1-2-1、CP3-1-1分別對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞RAW264.7作用24、48 h后的細(xì)胞存活率。然后將細(xì)胞分為空白組（空白培養(yǎng)基）、模型組[1 μg/mL脂多糖（LPS）]和3種多糖的低、中、高質(zhì)量濃度組（1 μg/mL LPS+25、50、100 μg/mL CP、CP1-2-1、CP3-1-1），加藥培養(yǎng)24 h。分別測定細(xì)胞培養(yǎng)液中一氧化氮（NO）含量以及細(xì)胞中Toll樣受體4（TLR4）、白細(xì)胞介素6（IL-6）、核因子-κB（NF-κB）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）mRNA表達水平。結(jié)果：CP的糖含量高達（92.20±0.73）%;CP1-2-1是由果糖組成的單一中性多糖，相對分子量為25.8 kDa;CP3-1-1是由阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖以及半乳糖醛酸等組成的酸性雜多糖，相對分子量為49.5 kDa。3種多糖分別作用24、48 h后，細(xì)胞的存活率均大于99%。與空白組比較，模型組細(xì)胞培養(yǎng)液中NO含量以及細(xì)胞中TLR4、IL-6、NF-κB、TNF-α mRNA表達水平均顯著升高（P<0.05或P<0.01）。與模型組比較，各給藥組細(xì)胞培養(yǎng)液中NO含量均顯著降低;50、100 ?g/mL CP組細(xì)胞中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表達水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01），25 ?g/mL CP1-2-1組細(xì)胞中TLR4、NF-κB mRNA表達水平以及50、100 ?g/mL CP1-2-1組細(xì)胞中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表達水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01），25 ?g/mL CP3-1-1組細(xì)胞中IL-6 mRNA表達水平和50? ? ??g/mL CP3-1-1組細(xì)胞中NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表達水平以及100 ?g/mL CP3-1-1組細(xì)胞中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表達水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01）。結(jié)論：黨參CP與均一多糖組分CP1-2-1、CP3-1-1均具有一定的抗炎活性;其機制可能與抑制TLR4/NF-κB途徑的活化來抑制TNF-α、IL-6等炎癥因子的生成與釋放有關(guān)。

關(guān)鍵詞 黨參多糖;粗多糖;多糖組分;抗炎活性;機制

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To screen the components with better anti-inflammatory effect from Codonopsis Radix polysaccharide and explore the anti-inflammatory mechanism. METHODS： Using Codonopsis Radix as sample， the crude polysaccharide （CP） was obtained by water extraction and alcohol precipitation. After CP was separated and purified by Fast Flow DEAE Sepharose， SephadexG-150 gel column and so on， the components CP1-2-1 and CP3-1-1 were obtained and then characterized. The survival rate of RAW264.7 cell was determined by MTT method after cultured with CP， CP1-2-1 and CP3-1-1 （0.01， 0.1， 1， 10， 100? ? ? ?μg/mL） for 24 and 48 h respectively. The cells were divided into blank group （blank culture medium）， model group （1 μg/mL LPS） and low-， medium- and high-concentration groups of 3 kinds of Codonopsis Radix polysaccharide （1 μg/mL LPS+25， 50， 100 μg/mL CP， CP1-2-1， CP3-1-1 solution）. After cultured for 24 h， NO content in cell culture solution， mRNA expressions of TLR4， IL-6， NF-κB and TNF-α in cells were determined. RESULTS： The sugar content of CP reached （92.20±0.73）%. CP1-2-1 was a single neutral polysaccharide composed of fructose with a relative molecular weight of 25.8 kDa. CP3-1-1 was an acidic heteropolysaccharide composed of arabinose， rhamnose， galactose and galacturonic acid and so on， with a relative molecular weight of 49.5 kDa. Cell survival rates were higher than 99%， after cultured with 3 kinds of polysaccharide for 24 and 48 h. Compared with blank group， NO content in cell culture solution and mRNA expressions of TLR4， IL-6， NF-κB and TNF-α in cells were increased significantly in model group （P<0.05 or P<0.01）. Compared with model group， NO content in cell culture solution of each administration group was significantly reduced， mRNA expressions of TLR4， NF-κB， TNF-α， IL-6 in cells in 50， 100 μg/mL CP group were significantly decreased （P<0.05 or P<0.01）; mRNA expressions of TLR4， NF-κB in cells in 25 ?g/mL CP1-2-1 group and mRNA expressions of TLR4， NF-κB， TNF-α， IL-6 in cells in 50， 100 ?g/mL CP1-2-1 group were significantly decreased （P<0.05 or P<0.01）; mRNA expressionsof IL-6 in cells in 25 ?g/mL CP3-1-1 group， mRNA expressions of NF-κB， TNF-α， IL-6 in cells in 50 ?g/mL CP3-1-1 group and mRNA expressions of TLR4， NF-κB， TNF-α， IL-6 in cells in 100 ?g/mL CP3-1-1 group were significantly decreased （P<0.05 or P<0.01）. CONCLUSIONS： CP， CP 1-2-1 and CP 3-1-1 all have certain anti-inflammatory activities. The mechanism may be related to inhibiting the generation and releasing of inflammatory cytokines such as TNF-α， IL-6 by inhibiting the activation of TLR4/NF-κB pathway.

KEYWORDS? ?Codonopsis Radix polysaccharides; Crude polysaccharide; Polysaccharide component; Anti-inflammatory activity; Mechanism

多糖是繼核酸和蛋白質(zhì)之后的第三大類生物大分子。近年，隨著糖組學(xué)、糖生物學(xué)的飛速發(fā)展，已有越來越多的傳統(tǒng)中藥多糖（如枸杞多糖、當(dāng)歸多糖、黃芪多糖、靈芝多糖等）被證實具有諸如抗氧化、調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤以及降血糖等多種生物活性[1]。黨參為桔梗科植物黨參[Codonopsis pilosula（Franch.） Nannf.]、素花黨參 [Codonopsis pilosula Nannf. var. modesta （Nannf.）L.T.Shen]或川黨參（Codonopsis tangshen Oliv.）的干燥根，是我國常用的傳統(tǒng)中藥，具有健脾益肺、補中益氣以及調(diào)理胃腸運動的效用[2-3]。目前，已有許多研究從黨參中提取到黨參多糖，并證實了其具有多種生物活性，其中就包括了抗炎活性[4-6]。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，黨參粗多糖對潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠有防治作用[7]，然而其中具有抗炎活性的有效組分并不明確。鑒于此，本研究擬對黨參粗多糖進行進一步的分離純化，篩選其中具有抗炎作用的有效組分，并探索其抗炎機制，以期為明確黨參多糖中的抗炎活性物質(zhì)提供參考。

1 材料

1.1 儀器

UV-2550型紫外分光光度計（日本Shimadzu公司）;2F1-I型多功能紫外分析儀（上海嘉鵬科技有限公司）;1100LC/MSD Trap型二維液相色譜儀（美國Agilent公司）;RE-2010型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）;FDU-2110型冷凍干燥機（日本Eyela東京理化器械株式會社）;MCO-230AICU-VL-PC型CO2培養(yǎng)箱（日本Panasonic公司）;iMark型酶標(biāo)儀（美國Bio-Rad公司）。

1.2 藥品與試劑

黨參藥材購自九州通醫(yī)藥集團股份有限公司（產(chǎn)地：湖北恩施板橋鎮(zhèn)，批號：181103，規(guī)格：500 g），經(jīng)湖北中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院陳科力教授鑒定為桔梗科植物川黨參（C. tangshen Oliv.）的干燥根莖;DEAE Sepharose Fast Flow凝膠、Sephadex G-150葡聚糖凝膠、G-100葡聚糖凝膠（美國通用電氣醫(yī)療生物科學(xué)有限公司，規(guī)格：500 g）;分子量分別為2 000、500、70、40、10、3 kDa的葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品（批號：S14118、S14116、S14112、S14110、S14107、S14101）以及葡萄糖（批號：B21882）、甘露糖（批號：B21895）、半乳糖（批號：JG155275）、阿拉伯糖（批號：B25848）、鼠李糖（批號：B21931）、木糖（批號：B21155）、果糖（批號：B21896）、半乳糖醛酸（批號：YY11147）等單糖標(biāo)準(zhǔn)品均購自上海源葉生物科技有限公司，純度均為98%;脂多糖（LPS，美國Sigma公司，批號：L2630）;一氧化氮（NO）檢測試劑盒（上海碧云天生物技術(shù)有限公司，批號：20170211）;AzfreshTM總RNA小量/微量提取試劑盒（批號：A06110014）、AZpolarisTM cDNA Synthesis 提取試劑盒（批號：A0610105）、AZpolarisTM實時熒光定量-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（qPCR）試劑盒MasterMix（SYBR Green）（批號：A1127110）均購自瑞典Azanno公司;白細(xì)胞介素6（IL-6）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、核因子-κB（NF-κB）mRNA引物均由上海Invitrogen公司合成及檢驗;二甲基亞砜（DMSO）等試劑均為市售分析純，水為超純水。

1.3 細(xì)胞

小鼠腹腔巨噬細(xì)胞系RAW264.7購于武漢普諾賽生命科技有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 黨參多糖不同組分的分離純化

按照本課題組前期報道方法[8]進行黨參粗多糖的制備：取500 g黨參藥材，采用水提醇沉法得棕黃色粉末狀粗多糖（記為CP）46.6 g，得率為9.3%。CP的分離純化：將CP溶于水中，制成20 mg/mL的溶液。取200 mL上述溶液，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾后，上DEAE Sepharose Fast Flow凝膠柱（20 cm×2.6 cm），以2 mL/min的流速依次用水和0.1、0.25 mol/L的氯化鈉溶液進行洗脫，按10 mL/管收集洗脫液，采用苯酚-硫酸法隔管檢測，直至紫外分光光度計測定無多糖吸收峰為止（最后用0.5 mol/L氯化鈉溶液沖柱）。將收集得到的3種溶液洗脫部分透析凍干，得淡黃色粉末，分別命名為CP1、CP2、CP3，得率分別為54.9%、9.9%、22.8%。取100 mg各洗脫部分粉末，分別加4 mL相應(yīng)洗脫液溶解后，繼續(xù)上SephadexG-150葡聚糖凝膠柱（90 cm×2.0 cm）進行純化，然后以0.5 mL/min的流速分別用相應(yīng)洗脫液進行洗脫，按5 mL/管收集洗脫液，將所有洗脫劑的洗脫組分分別透析凍干，分別命名為CP1-1（得率為5.7%）、CP1-2（得率為36.1%）、CP2-1（得率為1.5%）、CP2-2（得率為1.7%）、CP3-1（得率為14.2%）。取其中得率較高的CP1-2、CP3-1各50 mg，分別加2 mL水、0.25 mol/L氯化鈉溶液溶解后，上SephadexG-100柱（70 cm×1.5 cm）進行分離（分別用對應(yīng)溶劑進行洗脫，流速為0.25 mL/min，按4 mL/管進行收集），最終得2個多糖組分，透析凍干后，分別命名為CP1-2-1、CP3-1-1，得率分別為28.9%、9.3%。

2.2 黨參多糖的表征

2.2.1 黨參多糖的糖含量和糖醛酸含量 采用苯酚-硫酸法[9]測定CP中糖含量：將CP制備成質(zhì)量濃度為0.2 mg/mL的水溶液，以葡萄糖為對照品，采用紫外可見分光光度計進行測定。采用間羥基聯(lián)苯法[10]測定CP1-2-1、CP3-1-1中糖醛酸含量：將樣品制成1 mg/mL的水溶液，以葡萄糖醛酸為對照品，采用紫外可見分光光度計進行測定。結(jié)果顯示，CP的糖含量高達（92.20±0.73）%，表明所提取的產(chǎn)物幾乎均為多糖，可以用于后續(xù)試驗。組分CP1-2-1中幾乎不含有糖醛酸（含量接近0），是一種中性多糖;而組分CP3-1-1中糖醛酸的含量高達（76.3±0.71）%，表明CP3-1-1可能是一種富含糖醛酸的酸性多糖。

2.2.2 組分CP1-2-1、CP3-1-1的相對分子量 采用高效凝膠滲透色譜法（HPGPC）[11]進行測定。色譜柱為TSK-GEL，檢測器為示差折光檢測器，進樣量為50 μL，流動相為水，流速為0.95 mL/min，柱溫為40 ℃。取不同分子量（2 000、500、70、40、10、3 kDa）的葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品，加水制成質(zhì)量濃度均為1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按上述色譜條件進行測定，記錄色譜圖。運用EZ Chrom Elite Compact軟件對測得的洗脫體積（Vp）與標(biāo)準(zhǔn)品分子量（Mp）進行擬合，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為lgMp=-0.6×? ? ?10-10Vp3+1.365×10-5Vp2-0.108 9Vp+295.5（R=0.999 1）。然后，取組分CP1-2-1、CP3-1-1適量，用水制備成質(zhì)量濃度為1 mg/mL的樣品溶液，按上述色譜條件進樣測定，記錄色譜圖，詳見圖1。結(jié)果顯示，組分CP1-2-1、CP3-1-1的色譜圖中均顯示為單一對稱峰，說明這2種組分是均一多糖。測得兩種組分的洗脫體積分別為? ? ?8 514.21、7 901.32 mL，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算得組分CP1-2-1、CP3-1-1的相對分子量分別為25.8、49.5 kDa。

2.2.3 組分CP1-2-1和CP3-1-1的單糖組成 采用完全酸水解法聯(lián)合薄層色譜（TLC）法[12]進行分析。取各單糖（葡萄糖、甘露糖、半乳糖、阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、果糖、半乳糖醛酸）對照品適量，用水制備成質(zhì)量濃度均為10 mg/mL的單糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。將組分CP1-2-1在0.2 mol/L硫酸、60 ℃條件下水解40 min，將組分CP3-1-1在2 mol/L鹽酸、110 ℃條件下水解2 h，待完全酸水解后，取產(chǎn)物適量分別加水溶解，制成質(zhì)量濃度均為10 mg/mL的樣品溶液。分別取單糖標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液點樣于薄層纖維素板（20 cm×10 cm）上，點樣量均為10 μL。以正丁醇-乙酸乙酯-異丙醇-甲酸-水-吡啶（3.5 ∶ 10 ∶ 6 ∶ 3.5 ∶ 3 ∶ 3，V/V/V/V/V/V）為展開劑，展開。以苯胺-鄰苯二甲酸為顯色劑進行顯色（110 ℃、10 min）后，分別在可見光、紫外燈下（波長范圍為260～280 nm）觀察，詳見圖2。結(jié)果顯示，組分CP1-2-1中只含有果糖，是一種單一組成的多糖;而組分CP3-1-1則由阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖以及半乳糖醛酸等單糖組成，是一種酸性雜多糖。

2.3 3種多糖的抗炎活性評價及機制研究

2.3.1 3種多糖的細(xì)胞毒性考察 取處于對數(shù)生長期的RAW264.7細(xì)胞，以5×103個/孔接種于96孔板中（取3塊板，分別考察CP、CP1-2-1、CP3-1-1這3種多糖的細(xì)胞毒性），每孔100 μL。將細(xì)胞分為空白組、對照組和不同質(zhì)量濃度多糖組，每組設(shè)6個復(fù)孔。將細(xì)胞置于37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中，待細(xì)胞培養(yǎng)24 h貼壁良好后，空白組加入培養(yǎng)基，對照組加入磷酸鹽緩沖液（PBS），多糖組分別加入不同質(zhì)量濃度的多糖PBS溶液（0.01、0.1、1、10、100? ?μg/mL），每孔200 μL。分別將各組細(xì)胞置于37 ℃、5% CO2條件下繼續(xù)培養(yǎng)24 、48 h后，吸棄培養(yǎng)基，加20 μL MTT溶液，在37 ℃下繼續(xù)培養(yǎng)4 h，吸棄培養(yǎng)基;每孔中加入150 μL的DMSO溶液，搖勻，采用酶標(biāo)儀在490 nm波長處測定其吸光度（OD），并計算各多糖組細(xì)胞的存活率。各多糖組的細(xì)胞存活率=[（OD多糖組-OD空白組）/（OD對照組-OD空白組）]×100%。試驗重復(fù)3次。3種多糖作用24、48 h后的細(xì)胞存活率測定結(jié)果見表1。

結(jié)果顯示，0.01～100 μg/mL的3種多糖在作用24、48 h后，對細(xì)胞均無細(xì)胞毒性（細(xì)胞存活率均大于99%），甚至還有一定的促細(xì)胞增殖作用。這提示黨參多糖是一種天然無毒的生物大分子，可用于后續(xù)試驗。

2.3.2 黨參多糖對LPS誘導(dǎo)細(xì)胞炎癥的影響 取處于對數(shù)生長期的RAW264.7細(xì)胞，以5×103個/孔接種于96孔板中（每種多糖單獨使用一塊板），每孔100 μL。將細(xì)胞分為空白組（空白培養(yǎng)基）、模型組（1 μg/mL LPS）和多糖低、中、高質(zhì)量濃度組（1 μg/mL LPS+25、50、100? ? ? μg/mL多糖溶液，多糖用PBS溶解），每組設(shè)4個復(fù)孔。加藥后，將細(xì)胞置于37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，收集細(xì)胞培養(yǎng)液，按照試劑盒說明書操作測定NO含量。試驗重復(fù)3次。采用SPSS 19.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料以x±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用t檢驗，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。各組細(xì)胞培養(yǎng)液中NO含量測定結(jié)果見表2。

結(jié)果顯示，與空白組比較，模型組細(xì)胞培養(yǎng)液中NO含量顯著升高（P<0.01）;與模型組比較，3種多糖組細(xì)胞培養(yǎng)液中NO含量均顯著降低（P<0.05或P<0.01）。

2.3.3 3種多糖的抗炎機制研究 按“2.3.2”項下方法進行細(xì)胞接種、分組和給藥。然后將細(xì)胞置于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，用PBS快速清洗細(xì)胞，加入Trizol試劑，反復(fù)吹打，使細(xì)胞充分裂解，按照試劑盒說明書操作提取總mRNA。采用分光光度計測定總mRNA在260、280 nm波長處的吸光度（OD），根據(jù)OD260/OD280評價其純度。然后取mRNA反轉(zhuǎn)錄合成cDNA后，在Mini OpticonTM檢測系統(tǒng)上進行PCR擴增。擴增體系（20 μL）：qPCR試劑10 μL，上、下游引物（10? ? ? ? μmol/L）各0.5 μL，雙蒸水5.0 μL，cDNA模板4.0 μL。擴增條件：95 ℃預(yù)變性2 min;95 ℃變性10 s，62 ℃退火30 s，72 ℃延伸15 s，共40個循環(huán)。以β-actin為內(nèi)參，采用2-ΔΔct法計算目的基因的表達水平。試驗重復(fù)3次。按照“2.3.2”項下方法進行統(tǒng)計分析。PCR引物序列和擴增產(chǎn)物長度見表3，各組細(xì)胞中TLR-4、NF-κB、IL-6、TNF-α mRNA表達水平測定結(jié)果見表4。

結(jié)果顯示，與空白組比較，模型組細(xì)胞中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表達水平均顯著升高（P<0.05或P<0.01）。與模型組比較，50、100 ?g/mL CP組細(xì)胞中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表達水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01），25 ?g/mL CP1-2-1組細(xì)胞中TLR4、NF-κB mRNA表達水平以及50、100 ?g/mL CP1-2-1組細(xì)胞中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表達水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01），25 ?g/mL CP3-1-1組細(xì)胞中IL-6 mRNA表達水平和50 ?g/mL CP3-1-1組細(xì)胞中NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表達水平以及100 ?g/mL CP3-1-1組細(xì)胞中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表達水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01）。

3 討論

目前，國內(nèi)外已有許多文獻報道從黨參中提取的多糖具有多種生物活性[4-6]，但這些多糖大多數(shù)是粗多糖，而關(guān)于黨參多糖具體哪個組分影響了其生物活性的報道較為少見。本研究將CP通過色譜柱分離純化后，最終獲得2種均一的黨參多糖組分（CP1-2-1、CP3-1-1）。通過初步表征發(fā)現(xiàn)，組分CP1-2-1是一種只含有果糖的中性多糖，而組分CP3-1-1是由一種由阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖以及半乳糖醛酸等組成的酸性雜多糖。

巨噬細(xì)胞是機體重要的免疫細(xì)胞之一，具有吞噬、抗原提呈以及分泌多種生物活性物質(zhì)的功能[13]。通常情況下，急性炎癥反應(yīng)發(fā)生時，巨噬細(xì)胞內(nèi)會產(chǎn)生大量的NO，造成細(xì)胞損傷，而通過測定細(xì)胞培養(yǎng)液中NO的含量，可以反映炎癥的病變程度[13]。本研究通過考察CP、CP1-2-1、CP3-1-1對炎癥模型細(xì)胞NO釋放量的影響，發(fā)現(xiàn)三者均可抑制細(xì)胞中NO的釋放，均有較好的抗炎效果。Toll樣受體（TLRs）是一種重要的炎性受體，其與配體結(jié)合可開啟信號傳遞途徑;NF-κB對參與免疫反應(yīng)各階段的許多分子都具有調(diào)控作用;TLR4/NF-κB是一種常見的信號通路，可調(diào)控炎性介質(zhì)的合成和釋放來介導(dǎo)炎性損傷[13-15]。在LPS炎癥模型中，巨噬細(xì)胞受到LPS的誘導(dǎo)刺激后，其模式識別受體TLR4會與配體LPS結(jié)合，從而刺激巨噬細(xì)胞炎癥通路TLR4/NF-κB的激活，以此增加炎性因子mRNA的轉(zhuǎn)錄，使細(xì)胞分泌更多炎性因子（如TNF-α、IL-6等），從而導(dǎo)致炎癥的發(fā)生[16]。因此，通過探究細(xì)胞中各炎癥因子的mRNA表達情況，可初步探究黨參多糖的抗炎機制。本研究結(jié)果顯示，3種多糖組分均能降低炎癥模型細(xì)胞中TLR4、NF-κB、TNF-α和IL-6的mRNA表達水平。

綜上所述，3種多糖組分均具有一定的抗炎活性，其抗炎機制可能與抑制TLR4/NF-κB通路的活化，從而抑制如TNF-α、IL-6等炎癥因子的生成與釋放有關(guān)。

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（收稿日期：2019-11-06 修回日期：2020-04-16）

（編輯：林 靜）