乙肝孕婦血清標(biāo)志物模式與HBV-DNA 載量及肝功能關(guān)系研究

楊秀欽 倪琛

乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染是全球性的公共衛(wèi)生問題，據(jù)相關(guān)文獻報道：我國人群乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）攜帶率為7.18%，慢性感染者約為9300 萬，其中慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB） 患者約2000 萬[1]。母嬰垂直傳播是造成新生兒HBV 感染最主要原因[2]。我國從1992年開始實施乙肝疫苗的免疫策略，顯著降低了HBV 的流行，但目前我國育齡婦女HBV 的感染率仍較高，對孕產(chǎn)婦健康和母嬰傳播風(fēng)險構(gòu)成威脅[3]。有研究表明孕婦血清HBV-DNA ≥106/mL 或≥107/mL 是HBV 母嬰傳播的閾值，高于此閾值需要聯(lián)合應(yīng)用乙肝免疫球蛋白和乙肝疫苗或核苷酸藥物進行母嬰傳播阻斷[4-5]。本文選取767 例在我院產(chǎn)檢HBsAg 陽性孕婦的乙肝血清標(biāo)志物模式、肝功能指標(biāo)的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alamine aminotransferase，ALT）及HBV-DNA 載量進行回顧性分析，以初步了解乙肝孕婦血清標(biāo)志物模式、HBV-DNA 載量及肝功能三者之間的關(guān)系，為孕期乙肝病毒感染情況的監(jiān)控和乙肝病毒母嬰傳播的預(yù)防提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2019 年1 月—11 月在我院產(chǎn)檢的767 例妊娠合并HBV感染的孕婦作為研究對象，年齡介于20～43 歲之間，平均年齡（29.2±2.7）歲。納入研究標(biāo)準(zhǔn)主要包括妊娠的診斷、HBV 感染的診斷，并排除患者患有肝炎活動史、抗病毒治療或免疫抑制治療史、合并丙型肝炎等其他肝炎病毒感染。767 例孕婦根據(jù)乙肝血清標(biāo)志物模式不同分為三個組：即大三陽組[乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝e 抗原（HBeAg）、核心抗體（抗HBc）陽性]316例，小三陽組[HBsAg、е 抗體（抗HBe）、抗HBc 陽性]301 例，以及1、5 陽性組（HBsAg、抗HBc 陽性）150 例。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集 767 例孕婦晨起空腹采集靜脈血5 mL，置于非抗凝試管中，輕搖混勻，在室溫下靜置30 min，3 000 r/min 離心10 min 待測。

1.2.2 HBV-DNA 檢測 采用美國生產(chǎn)的儀器為ABI 7500 熒光定量PCR 儀定量檢測血清HBV-DNA 載量，試劑由中山大學(xué)達安基因股份有限公司提供，操作按照試劑盒要求進行，結(jié)果＞500 U/mL 判定為陽性。

1.2.3 HBV-M 檢測 采用上?？迫A生產(chǎn)酶聯(lián)免疫吸附試驗試劑盒，嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。

1.2.4 ALT 檢測 采用雙試劑速率法檢測ALT，儀器為a1600型全自動生化免疫分析儀，試劑購于美康生物科技有限公司。正常參考值：ALT 為＜40 U/L。

1.2.5 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 18.0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理，計數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，采用χ2檢驗；對ALT 與HBV-DNA陽性率及載量的關(guān)系采用Spearman 相關(guān)分析。P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HBV-M 模式與HBV-DNA 載量關(guān)系

送檢的767 例孕婦中大三陽（HBsAg、HBeAg、HBcAb 陽性）316 例，小三陽（HBsAg、HBeAb、HBcAb 陽性）301 例，1、5 陽性（HBsAg、HBcAb 陽性）150 例。三組孕婦在不同水平的HBV-DNA 載量分布及HBV-DNA 陽性率比較上差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）。大三陽孕婦HBV-DNA 陽性率為94.20%，顯著高于其他兩種模式孕婦。HBV-DNA 載量陰性（＜0.5×103U/mL ）孕婦中以小三陽組孕婦居多；HBV-DNA載量在0.5×103～＜1×105U/ mL 間的孕婦中以1、5 陽性組孕婦的陽性率最高；HBV-DNA 載量≥1×107的262 例孕婦中，258例為大三陽組占98.47%（258/262），具體數(shù)據(jù)詳見表1。

2.2 HBV-DNA 載量與ALT 關(guān)系

將767 名孕婦根據(jù)HBV-DNA 載量不同分為四組，四組間ALT 異常率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=79.198，P=0.000）。HBVDNA 載量陰性（＜0.5×103）的孕婦ALT 異常率為2.04%（8/393），均為輕度升高。HBV-DNA 載量陽性的孕婦ALT 異常率較陰性組升高，但ALT 水平未隨著HBV-DNA 載量的增加而增高。進一步分析發(fā)現(xiàn)ALT 升高程度與HBV-DNA 載量具有一定相關(guān)性（r ＝0.255，χ2＝80.150，P=0.000），詳見表2。

2.3 HBeAg 與HBV-DNA 和ALT 的關(guān)系

767 名孕婦中HBeAg 陽性316 例，其中HBV-DNA 陽性304 例，ALT 異常59 例；HBeAg 陰性451 例，HBV-DNA 陽性70 例，ALT異常27 例。兩組間HBV-DNA 陽性率和ALT 異常率差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，詳見表3。

3 討論

HBV 感染是我國最常見的傳染性疾病之一，給人們健康造成嚴(yán)重的影響，特別是HBV 感染的妊娠期婦女這一特殊人群，應(yīng)給予足夠重視。HBV 感染使得妊娠復(fù)雜化，如早孕反應(yīng)加重，妊娠期高血壓及產(chǎn)后出血等疾病的發(fā)生率增加；此外還可引起流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎，新生兒死亡率也較正常孕婦明顯升高[6]。目前HBV感染的診斷、治療和預(yù)后判斷仍較依賴血清學(xué)檢查，檢測項目主要有乙肝血清標(biāo)志物5 項（HBV-M）、HBV-DNA 載量及與肝細(xì)胞損傷程度有關(guān)的ALT 等。

表1 不同HBV-M 模式孕婦HBV-DNA 載量分布情況比較[例（%）]

HBV-DNA 直接反映乙肝病毒復(fù)制狀態(tài)，也是預(yù)測乙肝疾病進展或治療效果的重要和獨立指標(biāo)，乙肝病毒母嬰傳播多見于高HBV-DNA 載量的孕婦。HBeAg 是病毒復(fù)制活躍的間接指標(biāo)，既往研究表明，HBV-DNA 載量與HBeAg 具有明顯的相關(guān)性[7-8]。本研究顯示：三組孕婦在不同水平的HBV-DNA 載量分布及HBVDNA總陽性率上差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）。大三陽組（HBeAg陽性），HBV-DNA 載量總陽性率為94.20%遠(yuǎn)高于其它兩種模式。HBV-DNA 載量≥1×107的262 例孕婦中，258 例為大三陽，與文獻報道相一致。因此對于HBeAg 陽性的孕婦，應(yīng)重視孕期乙肝病毒載量的監(jiān)測。對妊娠合并高HBV 載量患者孕期進行抗病毒治療、出生后進行預(yù)防措施，可顯著降低圍產(chǎn)期HBV 傳播率[9]。

ALT 主要存在于肝細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，當(dāng)肝臟細(xì)胞受損時ALT可釋放至外周血，1%的肝細(xì)胞受損即可導(dǎo)致ALT 在血清中的水平升高1 倍[10]。因而ALT 成為臨床評估肝功能的常用指標(biāo)。本研究顯示孕期HBV-DNA 載量陽性的孕婦ALT 異常率較陰性組高，且高病毒載量孕婦ALT 升高較低病毒載量孕婦更明顯。進一步研究發(fā)現(xiàn)ALT升高程度與HBV-DNA載量具有一定相關(guān)性（r ＝0.255，χ2＝80.150，P=0.000）。妊娠末期孕婦如合并乙型肝炎病毒感染，體內(nèi)肝臟醛固酮滅活能力降低，肝細(xì)胞受損導(dǎo)致凝血功能下降，產(chǎn)后出血、尿蛋白等并發(fā)癥的發(fā)生率升高[11-12]。此外，高病毒載量孕婦肝功能恢復(fù)較慢，分娩大多提前，早產(chǎn)和手術(shù)分娩的幾率增加，早產(chǎn)還會增加新生兒死亡率和患病率。因此應(yīng)加強乙肝孕婦肝功能監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)異常情況及時進行保肝治療。

綜上所述，妊娠合并HBV 會導(dǎo)致肝功能異常幾率增加，大三陽孕婦中高病毒載量比例高，應(yīng)重視對這部分人群孕期的規(guī)范化風(fēng)險評估，加強各項指標(biāo)的監(jiān)測，必要時進行干預(yù)治療是防治HBV 母嬰傳播的重要手段。