葵花籽與大豆磷脂酰絲氨酸的鑒別

李令星 1.廣東廣業(yè)清怡食品科技有限公司 廣州 510000 2.翁源廣業(yè)清怡食品科技有限公司 韶關 512600

磷脂酰絲氨酸 (簡稱PS) 作為一種營養(yǎng)補充劑在國內外被廣泛使用。它能改善老年人阿爾茲海默癥和兒童多動癥，還具有提高認知力，特別是識別、學習、記憶能力的作用。同時，PS還具有抗抑郁、緩解精神壓力和身體疲勞的功能。但是由于PS需求量大，天然PS來源較少，使得市場上大部分PS主要由大豆或葵花籽卵磷脂與絲氨酸在磷脂酶的作用下合成。但是大豆有轉基因和過敏原風險，而葵花籽目前并無相關報道，因而市面上葵花籽PS更受人們青睞，市場價格也遠遠高于大豆PS。

為了追求短期利益，不少廠家往葵花籽PS中摻雜大豆PS，甚至直接將大豆PS當作葵花籽PS售賣，造成PS市場混亂。目前并無權威的PS鑒別方法，原料卵磷脂可以通過基因測序來鑒別，但合成后PS在純化工序時已將該基因序列破壞，無法通過基因測序來進行鑒別。本文通過試驗分析了兩種PS的脂肪酸組成差異，期望能建立一種簡單、可靠的鑒別方法。

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑

Agilent 7890B 氣相色譜儀( 安捷倫科技有限公司)；分析天平BSA224S( 賽多利斯公司) ；高速離心機（湘儀離心機儀器有限公司）；RE52CS旋轉蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；正己烷，甲醇均為色譜純；氫氧化鈉，無水硫酸鈉，三氟化硼均為分析純；油酸甲酯，亞油酸甲酯，亞麻酸甲酯，棕櫚酸甲酯（Sigma，純度≥99.0%）；葵花籽PS(公司自產，純度≥50%)；大豆PS(公司自產，純度≥50%)。

1.2 色譜條件

色 譜 柱：J&W FFAP (30 m×0.32 mm, 0.25 μm)；進樣器溫度:270℃；檢測器溫度:280℃；程序升溫:初始溫度100℃,持續(xù) 13min；100℃～180℃,升溫速率10℃/min,保持6min；180℃～200℃,升溫速率1℃/min,保持20min；200℃～230℃,升溫速率4℃/min,保持10.5min；載氣:氮氣；分流比:100：1；進樣體積:1.0μl。

2 分析方法

2.1 標準溶液制備

精密稱取油酸甲酯、亞油酸甲酯、亞麻酸甲酯、棕櫚酸甲酯各10mg，用正己烷定溶至10ml，搖勻，取樣到進樣瓶中測定。

2.2 樣品制備

稱取樣品1.0g到三角燒瓶中，加入10ml鹽酸,混勻。70℃～80℃振蕩水浴水解40min。冷卻至室溫，加入95%乙醇10ml，混勻，加入30ml正己烷萃取，4000r/min離心10min，分離出正己烷層，重復3次。收集3次正己烷于旋轉蒸發(fā)儀上蒸干，往蒸干物中加入2%氫氧化鈉甲醇溶液8ml,連接回流冷凝器, 80℃±1℃水浴回流,直至油滴消失。從回流冷凝器上端加入15%三氟化硼甲醇溶液7ml,回流2min。取下燒瓶,冷卻至室溫。準確加入10ml正己烷,振搖2min ,加入飽和氯化鈉溶液,靜置分層。吸取上層溶液5ml至10ml試管中,加入3g～5g無水硫酸鈉,振搖1min,靜置5min ,吸取上層溶液到進樣瓶中測定。

2.3 混合樣品制備

按表一比例稱取葵花籽和大豆PS混合均勻，按2.2制備樣品。

表一 不同比例的PS組成

3 結果與分析

3.1 標準溶液分析

取2.1溶液分別進樣，記錄色譜圖，棕櫚酸甲酯保留時 間為32.083min、油 酸甲 酯 保 留時 間 為41.846min、亞油酸甲酯保留時間為45.050min、亞麻酸甲酯保留時間為48.026min。4種脂肪酸在設定色譜條件下獲得良好的分離。

3.2 純凈樣品分析

通過表二可以看出，大豆PS以棕櫚酸和亞油酸居多，而葵花籽PS則以油酸和亞油酸居多，值得一提的是大豆PS中亞麻酸含量為5.64%，而葵花籽PS中亞麻酸含量僅為0.32%,兩者含量相差近18倍。由此可以通過PS中的亞麻酸多少判斷PS的來源。

表二 2種PS的四種脂肪酸含量

表三 混合PS的亞麻酸含量

通過表三可以看出隨著大豆PS比例的增加，亞麻酸含量也逐漸增加，反之隨著葵花籽PS比例的增加，亞麻酸含量逐漸減少。由此可以通過亞麻酸含量鑒別PS來源，當PS中亞麻酸含量小于0.88%時，可以判斷該PS為葵花籽PS，PS中亞麻酸含量大于5.11%時，可以判斷該PS為大豆PS，PS中亞麻酸含量0.88%～5.11%之間時，可以判斷該PS為葵花籽與大豆PS的混合品。

4 結論

葵花籽與大豆PS中亞麻酸含量相差高達18倍，通過GC測定PS中亞麻酸的含量。當PS中亞麻酸≤0.88%時，產品為葵花籽PS；PS中亞麻酸≥5.11%時，產品為大豆PS；PS中亞麻酸0.88%～5.11%時，產品為混合PS。該方法簡單、快速、可靠，適用于葵花籽和大豆PS鑒別。