美藤果油納米乳液的制備及穩(wěn)定性研究

黃劍釗，黎攀，許錦偉，林懷娜，謝藍(lán)華，杜冰，

1(華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品學(xué)院，廣東 廣州，510642) 2(普洱市杜冰專家工作站，云南 普洱，665008)

美藤果油是一種含有豐富α-亞麻酸的功能性植物油，其α-亞麻酸含量分別是橄欖油的67.09倍、茶籽油的175.46倍、花生油的506.89倍，不飽和脂肪酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)可達(dá)93%，多不飽和脂肪酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為83.73%[1-2]。研究表明，美藤果油在調(diào)節(jié)人體血脂、預(yù)防心血管疾病、增強(qiáng)免疫力、抗菌消炎、保養(yǎng)肌膚等方面具有顯著療效[3]。然而，由于美藤果油中不飽和脂肪酸含量極高，其在貯藏加工中極易發(fā)生氧化，且又因?yàn)橛皖愇镔|(zhì)具有水溶性差、口服利用率低等不足，大大限制了其作為功能油脂在食品中的開發(fā)應(yīng)用。

納米乳液(nanoemulsions)，多指平均粒徑為50～500 nm的乳液體系[4-5]，是由水、油、表面活性劑或助表面活性劑等按一定比例混合，經(jīng)過一定的外部能量輸入(如攪拌、均質(zhì)、分散、超聲等)所形成的熱力學(xué)穩(wěn)定的膠體分散體系[6]。納米乳液可以改善功能性油脂在水相食品中的溶解性和分散性，使功能性油脂可以應(yīng)用到多相多組分的油水分散體系，如蛋黃醬、色拉醬、酸奶、功能性飲料、護(hù)膚乳液等[7-9]。除此之外，功能性油脂由于乳化后界面面積增大，有利于與消化液作用，改善了生物利用度[10]。LANE等[11]利用超聲乳化法制備了藻油納米乳液，并添加到草莓酸奶中，發(fā)現(xiàn)納米乳液體系改善了DHA的吸收速率、吸收量和生物利用度。SALVIA-TRUJILLO等[12]發(fā)現(xiàn)番茄紅素納米乳液與番茄汁相比，更有利于番茄紅素向膠束相轉(zhuǎn)移，提高生物利用度。納米乳液還可改善功能性油脂貯藏過程中的氧化程度。鄭景霞等[13]報(bào)道了魚油經(jīng)納米乳液包埋可顯著提高魚油氧化穩(wěn)定性，張建潤[14]也發(fā)現(xiàn)了南極磷蝦油納米乳液可以提高南極磷蝦油的氧化穩(wěn)定性。納米乳液與其他乳液體系相比，在乳液穩(wěn)定性和食品安全性等方面具有較好的優(yōu)勢[15-16]。

將美藤果油制作成美藤果油納米乳液，可以解決其水溶性差、口服利用率低、貯藏和加工過程中易發(fā)生氧化變質(zhì)等加工應(yīng)用方面的難題，同時(shí)保留美藤果油作為功能性油脂的營養(yǎng)價(jià)值，有利于其作為功能性輔料在食品領(lǐng)域進(jìn)行廣泛應(yīng)用。目前，有關(guān)美藤果油納米乳液的研究鮮有報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)以復(fù)合乳化劑為基質(zhì)，利用高壓均質(zhì)法制備美藤果油納米乳液，研究均質(zhì)壓力、均質(zhì)次數(shù)、乳化劑的用量以及油添加量對(duì)美藤果油納米乳液的平均粒徑、多分散系數(shù)(polydispersity index, PDI)、Zeta電位和分光比(split ratio, SRI)的影響，優(yōu)化制備工藝條件，并進(jìn)一步評(píng)價(jià)美藤果油添加量對(duì)納米乳液的物理穩(wěn)定性和貯藏穩(wěn)定性的影響，為美藤果油納米乳液應(yīng)用開發(fā)提供數(shù)據(jù)參考。

對(duì)于適合學(xué)生實(shí)際動(dòng)手操作的實(shí)驗(yàn)，教師可以通過演示實(shí)驗(yàn)來讓學(xué)生明確實(shí)驗(yàn)的步驟，避免學(xué)生在進(jìn)行實(shí)際操作時(shí)產(chǎn)生問題，對(duì)于不適合學(xué)生進(jìn)行操作的實(shí)驗(yàn)，教師可通過演示實(shí)驗(yàn)來增進(jìn)學(xué)生的理解.雖然學(xué)生沒有必要進(jìn)行實(shí)際操作，但實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容是學(xué)生必須要掌握的.演示實(shí)驗(yàn)在高中物理教學(xué)中具有一定的優(yōu)勢，教師合理教學(xué)設(shè)計(jì)，將操作與講解相結(jié)合，發(fā)揮演示實(shí)驗(yàn)的作用，并且通過操作的規(guī)范性提升讓學(xué)生對(duì)知識(shí)的掌握更加精準(zhǔn).

1 材料與方法

1.1 材料與儀器設(shè)備

美藤果油，普洱聯(lián)眾生物資源開發(fā)有限公司；硬脂酰乳酸鈉、蒸餾單硬脂酸甘油脂(均為食品級(jí))，印尼春金集團(tuán)；卵磷脂(食品級(jí))，安慶市中創(chuàng)工程技術(shù)有限責(zé)任公司。

1.2.2 美藤果油納米乳液平均粒徑、PDI和Zeta電位測定方法

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

取適量的待測乳液用去離子水稀釋1 000倍后，搖晃均勻，利用Zetasizer Nano ZS90型納米粒度及Zeta電位分析儀測定納米乳液的粒徑，PDI和Zeta電位。每個(gè)待測樣品平行測定3次，取平均值。貯藏90 d粒徑增長率按公式(1)計(jì)算：

據(jù)了解，有四類企業(yè)在新疆生存狀況比較好，一是進(jìn)口企業(yè)，如以色列海法、德國康樸；二是國內(nèi)做得較好的液體肥企業(yè)，如史丹利、金正大等；三是疆內(nèi)自身發(fā)展起來或者投資在疆內(nèi)建廠的企業(yè)；四是充斥在各個(gè)水溶肥發(fā)展較好市場的地方小雜牌廠家。也正因如此，地方農(nóng)戶的需求轉(zhuǎn)向市場，而市場上滴灌肥品類繁雜、標(biāo)準(zhǔn)不一，缺乏領(lǐng)軍品牌。

（1）液質(zhì)條件：Thermo Scientific LCQ液質(zhì)聯(lián)用儀，XbridgeTM-C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動(dòng)相為乙腈-0.5%氨水溶液，等度洗脫（80∶20），體積流量0.5 mL/min；檢測波長235 nm；柱溫25 ℃；進(jìn)樣量5 μL。ESI離子源，正離子檢出模式，掃描范圍m/z 95～800。

在室溫25 ℃條件下，以美藤果油為油相，卵磷脂、蒸餾單硬脂酸甘油脂和硬脂酰乳酸鈉以2∶2∶1的質(zhì)量比混合，作為復(fù)合乳化劑制備納米乳液。先將蒸餾單硬脂酸甘油脂和硬脂酰乳酸鈉添加到70 ℃的去離子水中，利用磁力攪拌器攪拌15 min，然后添加卵磷脂進(jìn)行攪拌5 min，最后添加美藤果油，進(jìn)行磁力攪拌乳化15 min，攪拌過程中，轉(zhuǎn)速保持在2 000 r/min。利用高速分散機(jī)10 000 r/min 分散5 min，形成粗乳液。再將制得的粗乳液在不同高壓均質(zhì)壓力下均質(zhì)不同次數(shù), 得到相應(yīng)的美藤果油納米乳液。

85-2WS型磁力攪拌器，上海滬析實(shí)業(yè)有限公司；FJ200型高速分散均質(zhì)攪拌器，上海弗魯克流體機(jī)械制造有限公司；scientz-150型高壓均質(zhì)機(jī)，寧波新芝生物科技股份有限公司；UV-1200型紫外可見分光光度計(jì)，上海美普達(dá)儀器有限公司；Zetasizer Nano ZS90型納米粒度及Zeta電位分析儀，英國Malvern公司；LUM6112型LUMiSizer穩(wěn)定性分析測試儀，德國羅姆公司。

1.2.1 美藤果油納米乳液的制備

(1)

1.2.3 美藤果油納米乳液SRI的測定方法

由圖2可知，隨著均質(zhì)次數(shù)的增加，美藤果油納米乳液的粒徑、PDI和SRI呈現(xiàn)下降的趨勢，Zeta電位呈現(xiàn)上升的趨勢，表明在一定范圍內(nèi)隨著均質(zhì)次數(shù)的增加，乳液的粒徑會(huì)趨向更小和更穩(wěn)定。這可能是因?yàn)楦邏壕|(zhì)機(jī)均質(zhì)一次具有一定的破碎顆粒概率，壓力在均質(zhì)閥中產(chǎn)生的能量并不均勻，處于高能區(qū)的粒子就被破碎，而低能區(qū)的粒子不能被破碎，因此需要多次均質(zhì)使得粒徑破碎更均勻[17]。乳液在均質(zhì)5次時(shí)，Zeta電位達(dá)到最大，SRI達(dá)到最小，隨后繼續(xù)增加均質(zhì)次數(shù)，盡管粒徑會(huì)繼續(xù)減小，但是乳液會(huì)逐漸呈現(xiàn)一個(gè)不穩(wěn)定的狀態(tài)。這可能是因?yàn)殡S著高壓均質(zhì)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)次數(shù)的增加，機(jī)械產(chǎn)熱的溫度升高，破壞了本已形成的納米包埋運(yùn)載體系，導(dǎo)致了乳液穩(wěn)定性下降。綜合考慮，最終選定均質(zhì)次數(shù)為5次。

用去離子水將適量的待測納米乳液稀釋1 000倍以后，利用紫外分光光度計(jì)分別在400、800 nm波長下測其吸光度A，用分光比SRI=A800/A400表示美藤果油納米乳液的穩(wěn)定性，每個(gè)待測樣品平行測定3次，取平均值。

隨后，另有眉清目秀的童子，接過左邊門童手中包袱；又有老成的賬房先生，接過右邊門童手中的銀錠。拿包袱的童子引峋四爺先到茶室，落座后，先上一小碗熱騰騰的養(yǎng)生粥，暖胃、熱身。

1.2.4 單因素實(shí)驗(yàn)

采用1.2.1所述方法制備美藤果油納米乳液, 進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn), 考察以下因素對(duì)納米乳液乳化性能的影響。

1.2.4.1 均質(zhì)壓力

固定制備條件為美藤果油添加量15%(質(zhì)量分?jǐn)?shù)，下同)，去離子水的添加量83.25%，復(fù)合乳化劑添加量1.75%，均質(zhì)2次，考察不同高壓均質(zhì)壓力(60、70、80、90、100 MPa)對(duì)納米乳液粒徑、電位、PDI和SRI的影響。

1.2.4.2 均質(zhì)次數(shù)

固定制備條件為美藤果油添加量為15%，去離子水的添加量為83.25%，復(fù)合乳化劑添加量為1.75%，取1.2.4.1得到的最優(yōu)的均質(zhì)壓力，考察不同均質(zhì)次數(shù)(2、3、4、5、6、7)對(duì)納米乳液粒徑、電位、PDI和SRI的影響。

1.2.4.3 乳化劑含量

由于全球經(jīng)濟(jì)一體化，企業(yè)能夠在互聯(lián)網(wǎng)平臺(tái)上及時(shí)了解國內(nèi)外本行業(yè)的當(dāng)期信息狀況，從國際財(cái)務(wù)準(zhǔn)則角度出發(fā)，建設(shè)出滿足多個(gè)國家?guī)欧N與語言的通用財(cái)務(wù)內(nèi)控制度，并保持和國外有關(guān)企業(yè)的緊密合作。

固定制備條件為美藤果油添加量為15%，去離子水的添加量為83.25%，取1.2.4.1和1.2.4.2得到的最優(yōu)的均質(zhì)壓力和均質(zhì)次數(shù)，考察不同的復(fù)合乳化劑含量(1.5%、1.75%、2.00%、2.25%、2.50%)對(duì)納米乳液粒徑、電位、PDI和SRI的影響。

1.2.4.4 美藤果油添加量

均質(zhì)壓力、均質(zhì)次數(shù)和乳化劑含量取1.2.4.1、1.2.4.2和1.2.4.3實(shí)驗(yàn)中所得到的最優(yōu)值，考察不同的美藤果油添加量(5%、10%和15%)對(duì)納米乳液粒徑、電位、PDI和SRI的影響。

1.2.5 不同美藤果油添加量的納米乳液長期物理穩(wěn)定性評(píng)價(jià)

利用單因素實(shí)驗(yàn)得到的最優(yōu)工藝制作3種美藤果油添加量(5%、10%和15%)的納米乳液，通過LUMiSizer穩(wěn)定性分析儀評(píng)估美藤果油納米乳液的模擬長期物理穩(wěn)定性。取400 μL待測納米乳液樣品均勻注入到PC管樣品皿底部，溫度設(shè)定為40 ℃，離心轉(zhuǎn)速為4 000 r/min，樣品的透射率的特征線每 30 s 記錄1次，共 255 次。通過得到不同時(shí)間的樣品透光率-位置圖譜(指紋圖)，可定性分析納米乳液的相分離行為；通過不穩(wěn)定指數(shù)柱狀圖和曲線圖，可定性分析納米乳液樣品的模擬長期物理穩(wěn)定性。

1.2.6 不同美藤果油添加量的納米乳液90 d貯藏穩(wěn)定性評(píng)價(jià)

二是在命題時(shí)，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)知識(shí)廣度和貫通度的考查，增加考試的靈活度.舉例來說，可以考慮初等數(shù)學(xué)中的數(shù)系、方程和不等式、函數(shù)等相關(guān)內(nèi)容在高等代數(shù)、數(shù)學(xué)分析中的延伸；初等幾何中歐氏幾何體系在高等數(shù)學(xué)，如解析幾何、微分幾何、拓?fù)涞葍?nèi)容的拓展[7]等，適當(dāng)調(diào)整一些知識(shí)點(diǎn)所占比例，規(guī)避相似，如此選拔出高素養(yǎng)的人才，而非某種程度上記憶或者背誦的“高手”.

2.1.1 均質(zhì)壓力對(duì)納米乳液性質(zhì)的影響

2 結(jié)果與分析

2.1 美藤果油納米乳液單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果

利用單因素實(shí)驗(yàn)得到的最優(yōu)工藝制作3種美藤果油添加量(5%、10%和15%)的納米乳液,分別在室溫25 ℃和4 ℃下密封避光貯藏90 d，在0、10、20、30、40、50、60和90 d的時(shí)候，單獨(dú)取出2管測定納米乳液的粒徑、電位、PDI和SRI，觀察貯藏穩(wěn)定性。

由圖1可知，隨著高壓均質(zhì)壓力的增加，美藤果油納米乳液的粒徑、PDI和SRI呈現(xiàn)下降的趨勢，Zeta電位呈現(xiàn)上升的趨勢，表明在一定范圍內(nèi)隨著均質(zhì)壓力的增加，乳液的粒徑會(huì)趨向更小和更穩(wěn)定。這可能是因?yàn)樵诟邏壕|(zhì)過程中，均質(zhì)壓力越大，粗乳液受到的作用力越大，乳液乳化、細(xì)化越明顯，所形成的納米乳液的粒徑就越小且均一，有利于形成均相分散體系，納米乳液穩(wěn)定性提高[13]。由于均質(zhì)壓力為100 MPa時(shí)對(duì)高壓均質(zhì)機(jī)的設(shè)備要求較高，且均質(zhì)壓力過高會(huì)導(dǎo)致乳液溫度顯著升高，加大油脂被氧化的風(fēng)險(xiǎn)，考慮到90與100 MPa對(duì)納米乳液各項(xiàng)指標(biāo)的影響相差不大，所以最終選定的高壓均質(zhì)壓力為90 MPa。

圖1 不同高壓均質(zhì)壓力下納米乳液的平均粒徑和分散系數(shù)(PDI)、電位和分光比(SRI)Fig.1 Effects of homogenization pressure on particle sizeand PDI， zeta-potential and SRI of nanoemulsions

由圖4可知，隨著美藤果油添加量的增加，美藤果油納米乳液的粒徑、PDI和SRI呈現(xiàn)上升的趨勢，Zeta電位呈現(xiàn)下降的趨勢，表明美藤果油納米乳液的粒徑會(huì)隨著油添加量的增加而趨向更大和更不穩(wěn)定。這可能是因?yàn)殡S著美藤果油添加量的增加，定量的乳化劑為了能乳化更多的油脂，需要增大所乳化的油滴體積，降低油滴與水相的接觸面積，從而導(dǎo)致乳液體系的粒徑增大，乳液穩(wěn)定性下降[17, 19-20]。

推進(jìn)巡視工作持續(xù)健康發(fā)展，關(guān)鍵是要建設(shè)一支高素質(zhì)的巡視干部隊(duì)伍。要積極適應(yīng)巡視工作面臨的新的形勢任務(wù)對(duì)巡視干部提出的更高要求，嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)、嚴(yán)格要求、嚴(yán)格管理，嚴(yán)格監(jiān)督，把巡視干部隊(duì)伍建設(shè)好，讓黨委放心，讓被巡視單位認(rèn)可，讓職工群眾滿意。

儀器：燒杯、濾紙、電子萬用電爐、臺(tái)式恒溫震蕩儀錐形瓶、漏斗、錐形瓶、500 ml容量瓶、50 ml的移液管、TAS-990原子吸收分光光度計(jì)、烘烤箱、組織攪拌機(jī)、精密ph計(jì)、電子天平、篩網(wǎng)、玻璃棒

圖2 不同均質(zhì)次數(shù)下納米乳液的平均粒徑和分散系數(shù)(PDI)、電位和分光比(SRI)Fig.2 Effects of homogenization number of cycles on particlesize and PDI, zeta-potential and SRI of nanoemulsions

2.1.3 復(fù)合乳化劑含量對(duì)納米乳液性質(zhì)的影響

13例急性腦卒中患者各個(gè)時(shí)間段治療發(fā)病越早到療效越好，致殘率越低。并且不需要長期治療。三到五個(gè)療效治愈，并發(fā)癥患者除外。需要康復(fù)36例患者，完全康復(fù)4例，病情改善26例其中需要治療肌力增加7例，無效3例，3例放棄治療，急性期1例死亡因年齡87歲，心臟，肺臟退形改變，心衰死亡。

由圖3可知，隨著復(fù)合乳化劑含量的增加，美藤果油納米乳液的粒徑、PDI和SRI呈現(xiàn)下降的趨勢，Zeta電位呈現(xiàn)上升的趨勢，表明在一定范圍內(nèi)乳液的粒徑會(huì)隨著乳化劑含量的增加而趨向更小和更穩(wěn)定。這可能是因?yàn)槿榛瘎┛山档陀退缑娴慕缑鎻埩?，提高了界面膜的?qiáng)度，并且隨著濃度的增加，能夠緊密包裹在油滴的表面，防止油滴發(fā)生聚合現(xiàn)象，增強(qiáng)納米乳液的穩(wěn)定性[18]。由圖3可知，復(fù)合乳化劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.5%時(shí)，乳液的粒徑最小，乳液性能最穩(wěn)定，因此選定復(fù)合乳化劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.5%。

2.1.4 美藤果油添加量對(duì)納米乳液性質(zhì)的影響

2.1.2 均質(zhì)次數(shù)對(duì)納米乳液性質(zhì)的影響

圖3 不同乳化劑含量下的納米乳液的平均粒徑和分散系數(shù)、電位和分光比Fig.3 Effects of different emulsifier content on particle sizeand PDI， zeta-potential and SRI of nanoemulsions

圖4 不同美藤果油添加量下的納米乳液的平均粒徑和分散系數(shù)(PDI)、電位和分光比(SRI)Fig.4 Effects of different oil content on particle size andPDI,zeta-potential and SRI of nanoemulsions

由圖4可知，油質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%時(shí)，乳液的粒徑、PDI和SRI最小，Zeta電位最大，乳液最穩(wěn)定，因此最佳的美藤果油添加量為5%。

2.2 LUMiSizer分析美藤果油納米乳液模擬長期物理穩(wěn)定性結(jié)果

美藤果油添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%、10%和15%納米乳液的指紋圖譜見圖5，透光率曲線隨著時(shí)間變化由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)榫G色。圖譜變化越大，表明納米乳液的穩(wěn)定性就越差[21]。由圖5-a～5-c可以看出，美藤果油添加量為15%的納米乳液的透光率變化最大，5%油添加量和10%油添加量透光率變化相當(dāng)，表明5%和10%油添加量的納米乳液較為穩(wěn)定。乳液的穩(wěn)定性還可利用不穩(wěn)定指數(shù)值來量化，它與納米乳液的穩(wěn)定性成反相關(guān)，即不穩(wěn)定指數(shù)越小，乳液越穩(wěn)定[22]。由圖5-d可以看出，隨著時(shí)間的增加，3種不同美藤果油添加量的納米乳液的不穩(wěn)定指數(shù)逐漸增加，其中15%油添加量的納米乳液不穩(wěn)定性指數(shù)增加最快。由圖5-e可以看出，15%油添加量的納米乳液不穩(wěn)定指數(shù)(0.631)最大，5%油添加量(0.483)和10%油添加量(0.424)的不穩(wěn)定指數(shù)相當(dāng)。綜上結(jié)果表明，美藤果油添加量為5%和10%的納米乳液的長期物理穩(wěn)定性相對(duì)更好。

a～c-指紋圖譜；d-納米乳液的不穩(wěn)定指數(shù)時(shí)間曲線圖;e-柱狀圖圖5 LUMiSizer穩(wěn)定性分析儀評(píng)價(jià)不同美藤果油添加量的納米乳液長期物理穩(wěn)定性結(jié)果Fig.5 Physical stability test results of nanoemulsions with different oil contents

2.3 不同美藤果油添加量的納米乳液90 d貯藏穩(wěn)定性結(jié)果分析

2.3.1 粒徑

方案實(shí)施過程中，通過及時(shí)跟蹤分析動(dòng)態(tài)資料，對(duì)原有方案進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整和完善，使其最優(yōu)化。在此基礎(chǔ)上，按照探明或控制儲(chǔ)量的規(guī)范對(duì)儲(chǔ)量上報(bào)方案進(jìn)行研究和優(yōu)選，確定儲(chǔ)量參數(shù)，最終完成儲(chǔ)量的上報(bào)工作，并對(duì)整個(gè)精細(xì)勘探研究過程進(jìn)行總結(jié)，指導(dǎo)下一步的勘探和開發(fā)。

由圖6-a可知，隨著貯藏時(shí)間的增加，不同美藤果油添加量和不同貯藏溫度的納米乳液的粒徑都呈上升趨勢，90 d后乳液粒徑上升范圍最終在18～55 nm。由圖6-b可知，貯藏90 d后不同貯藏溫度不同油添加量的納米乳液粒徑增長率大小排列為：4 ℃ 15%(粒徑增長37.08%)>4 ℃ 10%(27.52%)>室溫15%(26.77%)>4 ℃ 5%(24.74%)>室溫10%(20.04%)>室溫5%(10.67%)。以上結(jié)果表明，無論是室溫還是4 ℃冷藏，在美藤果油添加量為5%～15%范圍內(nèi)，美藤果油添加量越少，納米乳液的粒徑增長越少，乳液越穩(wěn)定；在貯藏溫度影響方面，4 ℃冷藏乳液的粒徑增長要比室溫貯藏的粒徑增長要大，表明美藤果油納米乳液更適合在室溫下保存。從總體上來看，所有乳液貯藏90 d后，肉眼觀察沒有發(fā)生分層現(xiàn)象，平均粒徑均在300 nm以下，表明所制美藤果油納米乳液的貯藏穩(wěn)定性較好，粒徑變化較少，其中美藤果油添加量為5%和10%在室溫下貯藏90 d的粒徑增長相對(duì)較少，表明美藤果油添加量為5%和10%的納米乳液在室溫下貯藏更為穩(wěn)定。

2.3.2 PDI

PDI值表示納米乳液的粒子分布情況，PDI值越小表示乳液粒子分布越均勻。由圖7可知，隨著貯藏時(shí)間的增加，不同油添加量，不同貯藏溫度的納米乳液的粒徑分散系數(shù)PDI都呈現(xiàn)上升的趨勢，表明隨著貯藏時(shí)間的增加，乳液粒子逐漸變大，乳液變得不均勻。在油添加量影響方面，無論是室溫還是4 ℃冷藏，美藤果油添加量為5%和10%的乳液PDI值較為接近。在貯藏溫度影響方面，4 ℃冷藏的PDI增長要比室溫貯藏增長要多，表明所制美藤果油納米乳液在室溫下保存粒徑更均勻穩(wěn)定。

圖6 不同美藤果油添加量的納米乳液室溫和4 ℃貯藏期間粒徑變化圖(a)和粒徑增長率(b)Fig.6 Particle size change of sacha inchi oil nanoemulsionwith different oil content at room temperature and 4 ℃(a),particle size charge rate(b)

圖7 不同美藤果油添加量的納米乳液室溫和4℃貯藏期間粒徑分散系數(shù)(PDI)變化圖Fig.7 PDI change of sacha inchi oil nanoemulsionwith different oil content at room temperatureand 4 ℃

從總體上來看，所有乳液貯藏90 d后，PDI值均小于0.3，表明所制美藤果油納米乳液的分布還是相對(duì)均勻和穩(wěn)定的，其中美藤果油添加量為5%和10%時(shí)，在室溫下貯藏90 d的納米乳液的PDI結(jié)果相對(duì)更好，表明美藤果油添加量為5%和10%的納米乳液在室溫下貯藏更為穩(wěn)定。

2.3.3 Zeta電位

Zeta電位是用來表征油滴之間靜電斥力的一種方法。從理論上來說，Zeta電位的絕對(duì)值>30 mV，表明乳液的穩(wěn)定性較強(qiáng)。由圖8可知，隨著貯藏時(shí)間的增加，不同美藤果油添加量，不同貯藏溫度的納米乳液的Zeta電位都呈現(xiàn)下降的趨勢，表明隨著貯藏時(shí)間的增加，乳液粒子之間的靜電斥力在逐漸變小，乳液的穩(wěn)定性逐漸下降。在油添加影響方面，無論是室溫還是4 ℃冷藏，5%與10%油添加量的Zeta電位較為接近，且都>15%油添加量乳液。在貯藏溫度影響方面，4 ℃冷藏的納米乳液的Zeta電位要比室溫貯藏下降的多，表明所制美藤果油納米乳液在室溫下保存粒徑較為穩(wěn)定。從總體上來看，所有乳液貯藏90 d后，Zeta電位的絕對(duì)值均>30 mV，表明所制美藤果油納米乳液的貯藏穩(wěn)定性相對(duì)較強(qiáng)[23]，其中美藤果油添加量為5%和10%在室溫下貯藏90 d后的納米乳液的Zeta電位相對(duì)更高，表明美藤果油添加量為5%和10%的納米乳液在室溫下貯藏更為穩(wěn)定。

學(xué)生是課堂授課的主體，在開展“對(duì)分課堂”教學(xué)的前期，要與學(xué)生進(jìn)行充分的溝通.一方面，傳達(dá)“對(duì)分課堂”的教學(xué)理念，目的是在于讓學(xué)生充分的參與到物理課堂中，親自動(dòng)手模擬物理實(shí)驗(yàn)，生成數(shù)據(jù)，通過計(jì)算和繪制圖表最終得到物理定理.另一方面，初次課程實(shí)踐時(shí)應(yīng)選取已經(jīng)學(xué)過的知識(shí)開展.突然的模式轉(zhuǎn)變可能會(huì)對(duì)學(xué)生的接受能力受到影響，尤其是涉及《選修2》和《選修3》的內(nèi)容，十分深?yuàn)W難懂，不適合作為教學(xué)探索階段的實(shí)驗(yàn)課.每節(jié)體驗(yàn)課結(jié)束后要對(duì)學(xué)生的學(xué)習(xí)成果進(jìn)行匯總，聽取學(xué)生意見，例如對(duì)教材的理解，講課思路的意見等，做好收集記錄.

圖8 不同美藤果油添加量的納米乳液室溫和4 ℃貯藏期間Zeta電位變化圖Fig.8 Zeta-potentia change of sacha inchi oilnanoemulsion with different oil content at roomtemperature and 4 ℃

2.3.4 SRI

實(shí)驗(yàn)組經(jīng)新輔助放化療后，出現(xiàn)骨髓抑制 3例、惡心 2例、嘔吐 2例、乏力 3例、腹瀉 1例、肛周皮膚反應(yīng)3例，不良反應(yīng)發(fā)生率為26.42%，經(jīng)對(duì)癥處理后均順利完成后續(xù)手術(shù)治療。

由圖9可知，隨著貯藏時(shí)間的增加，不同美藤果油添加量，不同貯藏溫度的納米乳液的SRI呈現(xiàn)上升的趨勢，表明隨著貯藏時(shí)間的增加，乳液的穩(wěn)定性在逐漸下降，SRI在逐漸升高。

圖9 不同美藤油添加量納米乳液室溫和4 ℃貯藏期間分光比(SRI)變化圖Fig.9 Absorption ratio SRI change of sacha inchi Oilnanoemulsion with different oil content at roomtemperature and 4 ℃

在美藤果油添加量影響方面，無論是室溫還是4 ℃冷藏，5%與10%油添加量的SRI較為接近，且都<15%油添加量的乳液，表明油添加量為5%和10%的納米乳液較為穩(wěn)定。在貯藏溫度影響方面，4 ℃冷藏的納米乳液的SRI要比室溫貯藏高很多，表明所制美藤果油納米乳液在室溫下保存會(huì)較為穩(wěn)定，所得結(jié)論與粒徑、PDI、Zeta電位變化相一致。從總體上來看，所有乳液貯藏90 d后，除4 ℃冷藏油添加量為15%的納米乳液的SRI>0.3之外，其他乳液SRI均<0.3，表明所制美藤果油納米乳液的貯藏穩(wěn)定性相對(duì)較強(qiáng)[24]，其中美藤果油添加量為5%和10%在室溫下貯藏90 d后的納米乳液的SRI相對(duì)更小，表明美藤果油添加量為5%和10%的納米乳液在室溫下貯藏更為穩(wěn)定。

3 結(jié)論

本研究經(jīng)過單因素實(shí)驗(yàn)得到美藤果油納米乳液的最佳工藝參數(shù)為：高壓均質(zhì)壓力90 MPa，均質(zhì)次數(shù)5次，復(fù)合乳化劑含量2.5%(蒸餾單硬脂酸甘油酯1%、卵磷脂1%、硬脂酰乳酸鈉0.5%)，美藤果油添加量為5%。在最佳工藝參數(shù)下制備的美藤果油納米乳液的平均粒徑為(169.33±7.60) nm，PDI為(0.115±0.02)，Zeta電位為(-56.8±0.56) mV，SRI為(0.12±0.02)；LUMiSizer穩(wěn)定性分析、90 d室溫和4 ℃貯藏穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，美藤果油添加量為5%和10%的納米乳液的不穩(wěn)定指數(shù)、粒徑、PDI和SRI相對(duì)更小，Zeta電位相對(duì)更大，表明美藤果油添加量為5%和10%的納米乳液的長期物理穩(wěn)定性和貯藏穩(wěn)定性更好，其中以室溫下進(jìn)行貯藏質(zhì)量更佳。本研究所得結(jié)果為美藤果油納米乳液產(chǎn)品開發(fā)及其穩(wěn)定性研究提供了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，同時(shí)促進(jìn)了美藤果油在食品加工領(lǐng)域中的應(yīng)用。