巨細(xì)胞病毒IgM抗體及巨細(xì)胞病毒DNA聯(lián)合檢測(cè)診斷嬰幼兒巨細(xì)胞病毒肝炎的價(jià)值分析

毋樂樂

焦作市婦幼保健院檢驗(yàn)科，河南 焦作 454000

巨細(xì)胞病毒（CMV）又稱人類皰疹病毒5型，可通過唾液、宮內(nèi)、圍生期與性接觸傳播，當(dāng)機(jī)體發(fā)生原發(fā)性感染時(shí)后，CMV不能完全被宿主清除，而潛伏在宿主體內(nèi)，可由多種情況引發(fā)感染而在活化［1］。嬰幼兒因?yàn)槊庖呦到y(tǒng)發(fā)育不完善與抵抗力較弱，容易感染CMV發(fā)展為巨細(xì)胞病毒肝炎（HCMV）。患兒感染HCMV無臨床癥狀，且感染嚴(yán)重的情況下會(huì)損害多種臟器［2］。感染CMV的診斷主要依據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢查，包括血清特異性抗體檢測(cè)、DNA的PCR技術(shù)檢測(cè)、抗原血癥、基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物與病毒培養(yǎng)等，其中最常見的實(shí)驗(yàn)室檢查是血清特異性抗體檢測(cè)與PCR技術(shù)檢測(cè)CMV-DNA。但抗原血癥檢測(cè)是巨細(xì)胞病毒感染早期的診斷指標(biāo)。多形核白細(xì)胞中低基質(zhì)的磷酸化蛋白抗原（pp65）是活動(dòng)性感染的標(biāo)志，CMV-pp65是CMV的被膜蛋白，其表達(dá)與病毒復(fù)制有關(guān)，但國內(nèi)很少開展［3］。基于此，本研究旨在探討CMV-IgM及CMV-DNA聯(lián)合檢測(cè)診斷嬰幼兒巨細(xì)胞病毒肝炎的價(jià)值分析?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性研究2018年3月—2019年4月間焦作市婦幼保健院收治的200例嬰幼兒巨細(xì)胞病毒肝炎患兒的臨床資料作為觀察組，同期選擇100例無感染癥狀健康嬰幼兒作為對(duì)照組。觀察組中男120例，女80例；年齡1～3歲，平均年齡（1.66±0.22）歲。對(duì)照組中男55例，女45例；年齡1～3歲，平均年齡（1.68±0.13）歲。比較兩組一般資料，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。此次研究已正式通過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的審核，所有患兒及其家屬均知情且簽署了知情同意書。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）觀察組經(jīng)單克隆抗體檢查病毒抗原檢查確診為巨細(xì)胞病毒肝炎者；（2）臨床資料、影像學(xué)資料均完整者；（3）凝血功能正常者。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）嚴(yán)重器官功能衰竭者；（2）感染單純皰疹病毒者；（3）合并其他原因引起的肝炎者。

1.3 方法

標(biāo)本采集處理：靜脈采集患兒的清晨空腹血3 ml，置于促凝管中，然后靜置離心，取上層血清分別檢測(cè)CMV-IgM、CMV-DNA。CMV-IgM檢測(cè)：用化學(xué)發(fā)光儀及其配套試劑（美國雅培公司）檢測(cè)CMV-IgM；CMV-DNA檢測(cè)：用ABI stepone Plus儀（中山大學(xué)達(dá)安基股份有限公司），熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)CMV-DNA。

1.4 評(píng)價(jià)指標(biāo)

CMV-IgM＞22 U/ml為陽性，≤22 U/ml為陰性；CMV-DNA≥2000 IU/ml為陽性，CMV-DNA＜2000 IU/ml為陰性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 24.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，全部計(jì)量資料均經(jīng)正態(tài)檢驗(yàn)，均符合正態(tài)分布，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果比較

觀察組患兒CMV-IgM、CMV-DNA的檢測(cè)結(jié)果均顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 不同檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果比較（±s）

表1 不同檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果比較（±s）

組別對(duì)照組(n=100)觀察組(n=200)tP CMV-IgM（U/ml）12.66±1.05 25.65±1.35 84.291 0.000 CMV-DNA（IU/ml）130.56±28.66 2500.86±58.65 381.765 0.000

2.2 不同檢測(cè)方法陽性率比較

觀察組患兒CMV-IgM陽性率、CMV-DNA陽性率、聯(lián)合檢測(cè)陽性率均顯著高于對(duì)照組，且聯(lián)合檢測(cè)陽性率均高于CMV-IgM陽性率、CMV-DNA陽性率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 不同檢測(cè)方法檢測(cè)陽性率比較 例（%）

3 討論

嬰幼兒感染病毒性肝炎的病原體有很多，包括：CMV、單純皰疹病毒、乙型肝炎病毒與柯薩奇病毒等，因此準(zhǔn)確診斷感染何種病原體與有效的治療是關(guān)鍵。嬰幼兒感染CMV和傳播的途徑有母乳、胎盤、產(chǎn)道等，且可分為：先天性感染、獲得性感染與圍生期感染［4-5］。CMV-pp65抗原是CMV活動(dòng)性感染的主要蛋白，具有敏感度好與特異度高的優(yōu)點(diǎn)，是早期快速的診斷指標(biāo)，是國際公認(rèn)的檢測(cè)CMV活性感染的方法，因此可以作為診斷CMV感染的金標(biāo)準(zhǔn)［6］。但是，目前對(duì)于HCMV的診斷主要依據(jù)CMV-IgM檢測(cè)與CMV-DNA檢測(cè)。

血清特異性抗體檢測(cè)是用于診斷HCMV最常用的方法。當(dāng)患兒感染CMV后，機(jī)體產(chǎn)生一些特異性抗體如CMV-IgM、CMV-IgE、CMV-IgG，因此檢測(cè)患兒血清中的抗體可證實(shí)患兒機(jī)體感染了CMV?；純簷z測(cè)出IgM抗體陽性，表示感染CMV，但是其陽性率較低，因?yàn)镮gM抗體在感染CMV后的2～4周才能被檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，又受患兒免疫力低下的影響，會(huì)出現(xiàn)假陰性的結(jié)果。人CMV-IgM與CMV-DNA無關(guān)，表示CMV-IgM與病毒的復(fù)制無關(guān)［7］。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)CMV是最主要的方法，其中用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)CMV-IgM具有一定的優(yōu)勢(shì)，與傳統(tǒng)酶聯(lián)免疫吸附法比較，化學(xué)發(fā)光法速度快、自動(dòng)化好、敏感度與特異度高，且檢測(cè)結(jié)果更可靠。熒光定量PCR技術(shù)通過在反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，用熒光信號(hào)檢測(cè)PCR的進(jìn)程，可以定量分析未知模板。熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)CMV-DNA對(duì)診斷CMV具有很好的診斷價(jià)值，但也存在一定的問題，主要是DNA抽提、PCR反應(yīng)條件與檢測(cè)位點(diǎn)的選擇等方面存在差異，影響檢測(cè)結(jié)果，且定性PCR會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果，不能準(zhǔn)確的判斷是否感染CMV［8］。本研究結(jié)果顯示，觀察組患兒CMV-IgM、CMV-DNA的檢測(cè)結(jié)果均顯著高于對(duì)照組；觀察組患兒CMV-IgM陽性率、CMV-DNA陽性率、聯(lián)合檢測(cè)陽性率均顯著高于對(duì)照組，且聯(lián)合檢測(cè)陽性率均高于CMV-IgM陽性率、CMV-DNA陽性率。提示聯(lián)合檢測(cè)CMV-IgM及CMV-DNA，對(duì)診斷嬰幼兒巨細(xì)胞病毒肝炎具有重要意義，可提高檢測(cè)陽性率。

綜上所述，CMV-IgM及CMV-DNA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)嬰幼兒巨細(xì)胞病毒肝炎具有診斷意義，可提高檢測(cè)陽性率，對(duì)嬰幼兒巨細(xì)胞病毒肝炎的早期診斷、治療、預(yù)防并發(fā)癥的發(fā)生具有重要意義，值得在臨床廣泛推廣應(yīng)用。