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    云南野生大紅菇(Russula vinosa)紅色素的制取、抗氧化性研究及其成分分析

    2020-06-12 11:12:20田文慧李若凡江坤孫麗平孫云
    食品與發(fā)酵工業(yè) 2020年10期
    關(guān)鍵詞:紅菇紅色素粗提物

    田文慧,李若凡,江坤,孫麗平,孫云

    (昆明理工大學(xué) 農(nóng)業(yè)與食品學(xué)院,云南 昆明, 650500)

    云南省地處我國西南邊陲,海拔76.4~6 740 m,屬于低緯高原。全省地形地貌復(fù)雜,氣候多樣,植被豐富,適宜野生菌的分化生長,被稱為“野生食用菌王國”[1]。云南諸多的野生食用菌中,紅菇(Russula)是最常見的一類野生食用菌,據(jù)統(tǒng)計,云南已知的紅菇屬種類有88種,生長期較長,采獲量很大,價格相對較便宜,深受當(dāng)?shù)叵M者的喜愛,也是云南省出口東南亞等國的大宗貿(mào)易品種之一[2]。大紅菇(Russulavinosa)是紅菇屬中可食性較高的一個品種,常見于云南各地野生食用菌市場。大紅菇營養(yǎng)豐富,味道鮮美,民間常以紅菇加肉類燉服治療貧血、水腫、營養(yǎng)不良、產(chǎn)后出血過多等癥狀,常食可增強(qiáng)機(jī)體免疫力[3]。大紅菇菌體色澤紅艷,又被稱為葡酒紅菇。日常食用發(fā)現(xiàn),炒、煮、燉等烹飪過程中,菌體紅色素可溶于湯汁,且色澤保持鮮艷,推斷其可能具有較好的熱、添加劑等穩(wěn)定性,表明大紅菇菌體紅色素可能具有很好的開發(fā)利用價值。本文擬對云南產(chǎn)野生食用大紅菇子實體紅色素進(jìn)行制取,對其穩(wěn)定性影響因素進(jìn)行分析,測定了其抗氧化活性并對其物質(zhì)基礎(chǔ)進(jìn)行了探討。本研究不僅為云南野生食用菌多元化開發(fā)提供新的途徑,還可為天然紅色素的微生物資源利用提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料和試劑

    干紅菇(R.vinosa),購于云南省木水花野生食用菌交易市場,產(chǎn)自云南省普洱墨江片區(qū),干制工藝為鼓風(fēng)熱干。經(jīng)昆明碩擎生物科技有限公司進(jìn)行內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(internal transcribed spacer,ITS)鑒定,確認(rèn)為大紅菇種。

    DPPH、ABTS、三吡啶基三嗪(tripyridyltriazine,TPTZ)(色譜純),美國Sigma公司,過硫酸鉀、硫代巴比妥酸(分析純),上海源葉公司;甲醇、無水乙醇、濃HCl、NaOH、三氯乙酸、H2O2溶液、水楊酸溶液等(分析純或化學(xué)純),上海阿拉丁生化科技公司;乙腈、甲酸(質(zhì)譜級),德國Merck公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    SB5200D超聲波清洗機(jī),寧波新芝生物科技股份有限公司;LGJ-12真空冷凍干燥機(jī),北京松源華興科技發(fā)展有限公司;T9系列雙光束紫外可見分光光度計,北京普析通用儀器有限責(zé)任公司;超高效液相色譜-四級桿-靜電場軌道阱高分辨質(zhì)譜(ultra performance liquid chromatography-quadrupole-orbitrip-mass spectrometry,UPLC-Q-Orbitrap-MS)系統(tǒng),Thermo Fisher Scientific公司。

    1.3 實驗方法

    1.3.1 樣品制備

    將購置的干紅菇研磨粉碎,過40目篩,收集篩下物于棕色真空干燥器中儲存?zhèn)溆谩?/p>

    1.3.2 紅菇紅色素提取劑的篩選

    分別以水、體積分?jǐn)?shù)為20%乙醇、60%乙醇、無水乙醇、乙酸乙酯、丙酮、石油醚作為提取劑,超聲輔助浸提紅菇色素。提取方法為:30 mL提取劑與1 g紅菇粉混合后超聲5 min,靜置5 min,渦旋振蕩30 s,2次循環(huán)后5 000 r/min離心10 min,收集上清液,2次提取,合并上清液定容至100 mL[4]。觀察提取液顏色,并利用雙光束紫外-可見分光光度計對提取液進(jìn)行全波長掃描,確定紅菇色素的最大吸收波長為546 nm,以色澤和A546nm表征不同提取劑對紅菇色素的溶出能力。

    1.3.3 紅菇紅色素最佳提取條件的確定

    根據(jù)單因素實驗結(jié)果,以乙醇體積分?jǐn)?shù)20%、40%、60%、料液比1∶50、1∶70、1∶90(g∶mL)、“超聲5 min、靜置5 min、渦旋振蕩30 s”循環(huán)1、3、5次作為實驗因素,采用3因素3水平設(shè)計正交表(表1),以相同單位濃度(10 mg菇粉/mL溶劑)下A546nm表征紅菇紅色素的提取效果,分析紅菇色素最佳提取條件。

    表1 正交試驗因素與水平Table 1 Factors and levels of orthogonal test

    1.3.4 紅菇紅色素粗提物的制取

    以正交實驗的最優(yōu)提取條件制取紅菇紅色素提取液,將提取液旋蒸濃縮、冷凍干燥后制得紅菇紅色素粗提物,置于干燥器內(nèi)保存供測試。

    1.3.5 紅色素的色價測定

    準(zhǔn)確稱取紅色素粗提物0.1 g,溶于100 mL體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇溶液,并用體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇溶液稀釋一定倍數(shù),在最大吸收波長λmax處測定色素溶液吸光值,使吸光值在0.3~0.8,計算色價,如公式(1)所示:

    (1)

    1.3.6 紅菇紅色素穩(wěn)定性的研究

    1.3.6.1 溫度對色素穩(wěn)定性的影響

    準(zhǔn)確稱取色素粗提物配制成質(zhì)量濃度10 g/L的色素溶液,分別于20、40、60、80、100 ℃下水浴加熱20 min,取出冷卻至室溫后,測定其A546nm。

    1.3.6.2 pH對色素穩(wěn)定性的影響

    分別以NaH2PO4-Na2HPO4(0.1 mol/L)、檸檬酸-檸檬酸鈉(0.05 mol/L)、NaHCO3-Na2CO3(0.1 mol/L)的緩沖溶液調(diào)制為pH 3、4、5、6、7、8、9、10的溶液,溶解色素粗提物,配制質(zhì)量濃度為10 g/L的色素溶液,充分搖勻,靜置1 h后離心,測定其A546nm。

    1.3.6.3 光照對色素穩(wěn)定性的影響

    準(zhǔn)確稱取色素粗提物配制成10 mg/mL的色素溶液,分別用UVB中波紫外線燈管(280~320 nm)照射100 min,每20 min取出1次測定其A546nm;照射30 min,每5 min取出1次測定其A546nm。

    1.3.6.4 金屬離子對色素穩(wěn)定性的影響

    準(zhǔn)確稱取色素粗提物配制成20 mg/mL的色素溶液,分別向其中添加等體積質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.2%的Na+、Fe3+、Ca2+、K+、Al3+溶液,即作用體系中色素濃度為10 mg/mL,金屬離子濃度為0.1%。反應(yīng)1 h后離心、測其A546 nm。

    1.3.6.5 食品添加劑對色素穩(wěn)定性的影響

    準(zhǔn)確稱取色素粗提物配制成20 mg/mL的色素溶液,分別向其中添加等體積質(zhì)量濃度為3 g/L的蔗糖、檸檬酸鈉、抗壞血酸溶液,即作用體系中色素溶液質(zhì)量濃度為10 g/L,食品添加劑質(zhì)量濃度為1.5 g/L。反應(yīng)1 h后離心、測其A546nm。

    1.3.7 紅菇紅色素粗提物抗氧化活性研究

    1.3.7.1 DPPH·清除能力的測定

    參考文獻(xiàn)[5]的方法,準(zhǔn)確稱取色素粗提物配制成濃度梯度的樣品液,用甲醇配制0.1 mmol/L DPPH·工作液。準(zhǔn)確吸取0.4 mL樣品液和2 mL DPPH·工作液于試管中,漩渦振蕩,室溫暗處反應(yīng)30 min,于517 nm下測定吸光值。0.4 mL蒸餾水+2 mL甲醇為空白調(diào)零,0.4 mL蒸餾水+2 mL DPPH工作液作為對照,清除率計算如公式(2)所示,IC50值表示清除率為50%時樣品的濃度。

    (2)

    1.3.7.2 ABTS+·清除能力的測定

    參考文獻(xiàn)[5]的方法,準(zhǔn)確稱取色素粗提物配制成濃度梯度的樣品液,取88 μL過硫酸鉀溶液(140 mmol/L)與5 mL ABTS溶液(7 mmol/L)混合避光反應(yīng)16 h,制得ABTS+·儲備液,使用前稀釋成A734nm為0.70±0.02的工作液。準(zhǔn)確吸取0.5 mL樣品液和4 mL ABTS+·工作液于試管中,漩渦振蕩,30 ℃水浴6 min,于734 nm處測定吸光值。0.5 mL蒸餾水+4 mL乙醇為空白凋零,0.5 mL蒸餾水+4 mL ABTS+·工作液作為對照。清除率計算如公式(3)所示,IC50值表示清除率為50%時樣品的濃度。

    (3)

    1.3.7.3 ·OH清除能力的測定

    參考文獻(xiàn)[6]的方法,準(zhǔn)確稱取色素粗提物配制成濃度梯度的樣品液,準(zhǔn)確吸取1 mL樣品液于試管中,依次加入0.3 mL FeSO4溶液(8 mmol/L),0.25 mL H2O2溶液(20 mmol/L)和1 mL水楊酸溶液(3 mmol/L),混勻,37 ℃水浴30 min,取出,冷卻,加入0.45 mL蒸餾水,混勻后3 000 r/min離心10 min,取上清液于510 nm處測吸光值。1 mL蒸餾水+0.3 mL FeSO4+1 mL無水乙醇+0.25 mL H2O2混合液的吸光值作為空白調(diào)零,1 mL蒸餾水+0.3 mL FeSO4+0.25 mL H2O2+1 mL水楊酸作為對照。清除率計算如公式(4)所示,IC50值表示清除率為50%時樣品的濃度。

    (4)

    1.3.7.4 Fe3+還原能力(FRAP法)的測定

    參考文獻(xiàn)[5]的方法,準(zhǔn)確稱取色素粗提物配制成濃度梯度的樣品液,將醋酸緩沖液(300 mmol/L, pH 3.6),TPTZ溶液(10 mmol/L)和FeCl3溶液(20 mmol/L)按體積比10∶1∶1混勻,制得FRAP試劑,37 ℃水浴備用。準(zhǔn)確吸取0.15 mL樣品液和4.5 mL FRAP試劑于試管中,混勻, 37 ℃水浴反應(yīng)10 min,于593 nm處測定吸光值。EC50值表示還原產(chǎn)生0.5 mmol/L Fe2+時樣品的濃度。

    1.3.7.5 抑制脂質(zhì)體過氧化能力的測定

    參考文獻(xiàn)[1]的方法,準(zhǔn)確稱取色素粗提物配制成濃度梯度的樣品液。準(zhǔn)確吸取1 mL樣品液于試管中,依次加入1 mL脂質(zhì)體磷酸鹽緩沖分散系,1 mL FeCl3溶液(40 μmol/L)和1 mL抗壞血酸溶液(400 μmol/L),混勻,37 ℃避光水浴60 min,再加入2 mL三氯乙酸-硫代巴比妥酸-鹽酸混合液,混勻,沸水浴15 min,立即冷卻,5 000 r/min離心10 min,取上清液于532 nm處測定吸光值。1 mL 蒸餾水代替樣品+1 mL磷酸鹽緩沖液代替脂質(zhì)體分散體系為空白調(diào)零,1 mL蒸餾水代替樣品作為對照。脂質(zhì)體過氧化抑制率計算如公式(5)所示,IC50值表示抑制率為50%時樣品的濃度。

    (5)

    1.3.8 紅菇紅色素粗提物基本組成成分分析

    1.3.8.1 總酚含量測定

    采用Folin-Ciocalteu法測定紅菇色素粗提物中總酚含量,結(jié)果表達(dá)為紅菇色素粗提物中所含沒食子酸當(dāng)量(mg GAE/g DW)。

    1.3.8.2 水溶性總糖含量測定

    采用硫酸-苯酚法測定紅菇色素粗提物中水溶性總糖含量,結(jié)果表達(dá)為%紅菇色素粗提物。

    1.3.8.3 水溶性蛋白質(zhì)含量測定

    采用考馬斯亮藍(lán)法測定紅菇色素粗提物中水溶性蛋白質(zhì)含量,結(jié)果表達(dá)為%紅菇色素粗提物。

    1.3.8.4 UPLC-Q-Orbitrap-MS分析

    樣品處理:準(zhǔn)確稱取色素粗提物配制成4 mg/mL的溶液,過0.45 μm濾膜于棕色液相小瓶中。

    色譜條件:色譜柱,InfinityLab Poroshell 120 EC-C18(2.1×100 mm,1.9 μm,Agilent Technologies),柱溫40 ℃;流動相A,水(0.1%甲酸),流動相B,乙腈;梯度洗脫:0~1 min,5%B,1~5 min,5%~15%B,5~10 min,15%~38%B,10~12 min,38%~72%B,12~18 min,72%~80%B,18~20 min,80%~100%B,20~28 min,100%B,28~29 min,100%~5%B;流速0.2 mL/min,進(jìn)樣量3 μL[7]。

    質(zhì)譜條件:在正離子(ESI+)和負(fù)離子(ESI-)監(jiān)測模式掃描,掃描范圍m/z100~1 000;噴霧電壓3.5 kV,毛細(xì)管傳輸溫度320 ℃,干燥器溫度350 ℃;一級和二級質(zhì)譜的分辨率分別為70 000和35 000。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    每個實驗至少3次重復(fù),使用Microsoft Office Excel 2016進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,采用SPSS 22.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析;正交試驗采用正交設(shè)計助手Ⅱ V3.1進(jìn)行數(shù)據(jù)處理;紫外-可見光譜掃描作圖使用Origin 9.0 軟件,UPLC-Q-Orbitrap-MS采用Thermo Xcalibur Qual Browser軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 紅菇紅色素提取劑的選擇

    如表2所示,水和體積分?jǐn)?shù)為20%、60%的乙醇作為提取劑制得提取溶液呈紅色,而丙酮等制取的提取液為淡黃色。濃縮后經(jīng)紫外-可見光譜分析(圖1),水和乙醇提取液在546 nm有特征吸收峰,被認(rèn)為是花青素的特征吸收峰之一[8]。表明紅菇紅色素極易溶于水、乙醇混合體系等強(qiáng)極性溶劑中,在丙酮等弱極性有機(jī)試劑的溶出能力低,可能是紅菇紅色素或其前體中含有羥基或羰基等極性基團(tuán),屬于水溶性花色苷類物質(zhì)[9]。后續(xù)研究中選用一定濃度的水-乙醇體系作為提取劑。

    表2 不同提取劑對紅菇紅色素的溶出效果Table 2 Solubility of red pigments from R.vinosa in different solvents

    圖1 紅菇色素水提取液的紫外-可見光譜Fig.1 UV-vis spectrum of red pigments from R. vinosa in water

    2.2 紅菇紅色素最佳提取條件的確定

    由表3可知,各因素對紅菇紅色素提取效果的影響主次順序為乙醇濃度(A)>料液比(B)>循環(huán)次數(shù)(C),即乙醇濃度對紅菇紅色素提取效果影響最大。最佳工藝參數(shù)為A2B3C3,即乙醇體積分?jǐn)?shù)為40%,料液比1∶90,循環(huán)提取5次。在此條件下10 mg菇粉/mL溶劑質(zhì)量濃度下提取液的A546nm為0.286。

    表3 正交試驗設(shè)計及結(jié)果Table 3 Design and results of orthogonal experiments

    2.3 紅色素的色價測定

    色價能從一定程度上反映色素含量的高低和產(chǎn)品著色能力的強(qiáng)弱。紅菇紅色素粗提物的色價為57.46。與辣椒紅色素色價51.60~75.60相近[10]。

    2.4 紅菇紅色素穩(wěn)定性的影響因素

    2.4.1 溫度對色素穩(wěn)定性的影響

    由圖2可知,紅菇色素在20~60 ℃時穩(wěn)定性較好,能耐受一定的熱處理。當(dāng)溫度高于80 ℃時,色素溶液A546 nm呈下降趨勢,表明高溫對色素有一定的破壞作用。

    圖2 溫度對色素穩(wěn)定性的影響Fig.2 Effect of temperature on stability of the pigments

    2.4.2 pH對色素穩(wěn)定性的影響

    以未調(diào)pH的色素水溶液作為參比,調(diào)節(jié)色素水溶液在pH 6~9時,溶液顏色為紅色,且在pH 8時,顏色最深,A546 nm最大,如圖3所示。在pH>9或pH<6時,顏色變淡,為橙黃色。因此,紅菇色素在中性及弱堿性條件下色度較好,在酸性、堿性中顯色較差。在pH>9時,色素溶液更澄清透明,而pH<4時,產(chǎn)生沉淀,這也可能說明紅菇紅色素物質(zhì)結(jié)構(gòu)中含有羧基,在弱堿性環(huán)境中溶解性更好。

    圖3 pH對色素穩(wěn)定性的影響Fig.3 Effects of pH on the stability of the pigments

    2.4.3 光照對色素穩(wěn)定性的影響

    由圖4可知,紫外照射100 min時,隨照射時間增加,紅菇色素溶液A546nm逐漸減小,且溶液褪色明顯,由粉紅、橙紅變?yōu)辄S色、橙色。但紫外照射30 min時色素溶液吸光值變化較慢,隨時間的增加逐漸呈現(xiàn)平穩(wěn)趨勢,長時間光照對紅菇色素影響較大,短時間照射對其影響較小。

    A-照射時間100 min,每20 min檢測1次;B-照射時間30 min,每5 min檢測1次圖4 光照對色素穩(wěn)定性的影響Fig.4 Effect of UV irradiation on the stability of the pigments

    2.4.4 金屬離子對色素穩(wěn)定性的影響

    由圖5可知,以未加入金屬離子的色素溶液作參比,色素溶液加入Fe3+、Al3+后溶液變棕黃,且Fe3+加入1 h后的色素溶液產(chǎn)生絮狀沉淀。添加其他金屬離子的溶液無明顯變化。說明Fe3+、Al3+對紅菇色素的穩(wěn)定性影響較大,K+、Na+、Ca2+對紅菇色素的穩(wěn)定性影響較小,因此紅菇色素生產(chǎn)和使用過程中要盡量避免和含鐵、鋁等容器的接觸。

    圖5 金屬離子對色素穩(wěn)定性的影響Fig.5 Effect of metal ions on the stability of the pigments

    2.4.5 食品添加劑對色素穩(wěn)定性的影響

    由圖6可知,以未加食品添加劑的色素溶液作為空白,添加了抗壞血酸的色素溶液吸光度減小,添加了蔗糖的色素溶液吸光度增大,添加了檸檬酸鈉的色素溶液吸光度變化較小。標(biāo)明抗壞血酸對紅菇色素有一定的影響,蔗糖對其有一定的增色作用,檸檬酸鈉對其影響較小。

    圖6 食品添加劑對色素穩(wěn)定性的影響Fig.6 Effect of food additives on the stability of the pigments

    2.5 紅菇紅色素抗氧化性的研究

    2.5.1 DPPH·清除活性

    DPPH·溶于有機(jī)溶劑后顯紫色,加入自由基清除劑時,其孤電子被配對,導(dǎo)致溶液顏色變淺,在 517 nm 處的吸光度變小,其變化程度與自由基清除程度呈線形關(guān)系[11]。紅菇色素提取物對DPPH·具有一定的清除能力(圖7),且隨著色素濃度的增加,DPPH·清除活性也不斷增大,其IC50值為4.252 mg/mL,相同評價體系中VC清除DPPH·的IC50值為14.250 μg/mL。

    A-紅菇色素;B-VC圖7 DPPH·清除能力Fig.7 DPPH·-scavenging capacity

    2.5.2 ABTS+·清除活性

    ABTS+·是一種以氮為中心的自由基,溶于有機(jī)溶劑、水以及水性緩沖液后顯墨綠色,加入自由基清除劑時電子轉(zhuǎn)移導(dǎo)致溶液顏色變淺,在 734 nm 處的吸光度變小,其變化程度與自由基清除程度呈線形關(guān)系[12]。如圖8所示,紅菇色素具有較強(qiáng)的ABTS+·清除能力,隨著色素濃度的增加,ABTS+·清除活性也不斷增大,其IC50值為0.690 mg/mL,相同評價體系中VC清除ABTS+·的IC50值為15.134 μg/mL。

    A-紅菇色素;B-VC圖8 ABTS+·清除能力Fig.8 ABTS+·-scavenging capacity

    2.5.3 ·OH清除活性

    Fenton反應(yīng)生成的·OH與水楊酸反應(yīng),生成紫色的2,3-二羥基苯甲酸,在510 nm處的吸光值與·OH的量成正比,向反應(yīng)體系中加入自由基清除劑時被氧化的水楊酸減少,體系顏色變淺[13]。本試驗通過對·OH的清除能力來評價紅菇紅色素的抗氧化活性,如圖9所示,紅菇色素對·OH清除能力隨著色素濃度的增加而增大,其IC50值為3.605 mg/mL,相同評價體系中VC的IC50值為0.360 mg/mL。

    A-紅菇色素;B-VC圖9 ·OH清除能力Fig.9 ·OH scavenging capacity

    2.5.4 鐵離子還原能力

    在酸性條件下抗氧化劑可以提供電子將Fe3+還原成Fe2+,F(xiàn)e2+與TPTZ結(jié)合生成藍(lán)色絡(luò)合物,在593 nm處有最大吸收峰[14]??寡趸瘎┑倪€原能力被認(rèn)為是提供電子的能力。如圖10所示,紅菇紅色素粗提物還原Fe3+生成Fe2+的能力隨濃度的而增強(qiáng),其EC50值分別為8.430 mg/mL。相同評價體系中VC的EC50值為0.030 mg/mL。

    A-紅菇色素;B-VC圖10 鐵離子還原能力Fig.10 Fe3+ reducing ability

    2.5.5 抑制脂質(zhì)體過氧化能力的測定

    在Fe2+引發(fā)的卵磷脂脂質(zhì)體體系中,紅菇紅色素對脂質(zhì)體有明顯的抑制作用,抑制率隨濃度的增加而增大,其IC50值為17.301 mg/mL,二丁基羥基甲苯(butylated hydroxytoluene,BHT)的IC50值為14.534 μg/mL(圖11)。

    A-紅菇色素;B-BHT圖11 抑制脂質(zhì)體過氧化能力Fig.11 Lipid peroxidation inhibition capacity

    2.6 紅菇紅色素提取物基本組成成分

    2.6.1 基本組成成分

    紅菇色素提取物中總酚含量為26.84 mg GAE/g DW,水溶性總糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5.88%,可溶性蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.69%。多酚質(zhì)量分?jǐn)?shù)與周倩[15]測得的新疆黑桑紅色素的23.18~64.53 mg GAE/g DW相近。多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)低于新疆黑桑紅色素的28.72%~51.59%。

    2.6.2 UPLC-Q-Orbitrap-MS分析

    應(yīng)用UPLC-Q-Orbitrap-MS系統(tǒng)對紅菇紅色素溶液進(jìn)行進(jìn)一步分析,總離子流圖如圖12所示。根據(jù)文獻(xiàn)進(jìn)行化合物定性分析[16-28],結(jié)果如表4所示,主要鑒定到31個化合物,其中有機(jī)酸類成分9個,多元醇類成分1個,多糖類成分1個,維生素類成分1個,花青素類成分9個,確定了紅菇紅色素為花色苷類色素。

    A-負(fù)離子模式;B-正離子模式圖12 紅菇色素在UPLC-Q-Orbitrap-MS系統(tǒng)分析中的總離子流圖Fig.12 UPLC-Q-Orbitrap-MS spectums of the pigments

    3 結(jié)論

    本文制取了云南產(chǎn)野生大紅菇子實體水溶性花色苷類色素粗提物。該色素提取物具有一定的溫度、pH、金屬離子和食品添加劑等因素影響下的穩(wěn)定性。紅菇紅色素提取物在不同的抗氧化評價體系中均表現(xiàn)出一定的自由基清除能力和供電子能力,抗氧化活性較好。經(jīng)UPLC-Q-Orbitrap-MS系統(tǒng)分析,主要鑒定到紅菇色素提取物中的31個化合物,其中有機(jī)酸類成分9個,多元醇類成分1個,多糖類成分1個,維生素類成分1個,花青素類成分9個,確定了紅菇紅色素為水溶性花色苷類色素。后續(xù)可進(jìn)一步對紅菇色素提取物進(jìn)行分離純化,研究紅菇花青素的生理活性,進(jìn)而探討其“補(bǔ)血”的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制,為紅菇的綜合開發(fā)和高值化利用提供理論支撐。

    表4 紅菇紅色素主要化學(xué)成分信息

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