亞精胺處理對桃果實貯藏品質(zhì)及內(nèi)源乙烯和多胺代謝的影響

汪開拓，雷長毅，韋盼盼，劉群，黎春紅，蔣永波

1(重慶三峽學(xué)院 生物與食品工程學(xué)院，重慶， 404000)2(重慶三峽學(xué)院 環(huán)境與化學(xué)工程學(xué)院，重慶， 404000) 3(南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科技學(xué)院，江蘇 南京， 210095)

植物體在生長發(fā)育過程中可通過一系列信號識別和傳導(dǎo)機(jī)制感知外界環(huán)境變化，從而及時對生物性或非生物性因子做出反應(yīng)，形成應(yīng)激性的形態(tài)或生理生化特性的改變[1]。乙烯作為一種重要的植物激素類小分子，廣泛參與到植物各級信號傳導(dǎo)通路中，調(diào)節(jié)植物生長、發(fā)育和繁殖以及抗逆反應(yīng)等各項生命活動[2]。另一方面，多胺是生物體內(nèi)一類低分子脂肪族含氮堿，植物體中主要有腐胺(putrescine，Put)、精胺(spermine，Spm)和亞精胺(spermidine，Spd)，多胺可作為生長調(diào)節(jié)物質(zhì)調(diào)控植物生長發(fā)育，也可作為滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)在植物遭受脅迫時起保護(hù)作用[3]。從合成路徑上看，乙烯在植物體中主要以蛋氨酸(Met)為底物，循Met—S-腺苷蛋氨酸(S-adenosyl methionine，SAM)—1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸(ACC)—乙烯途徑進(jìn)行合成[4]；但在乙烯合成期間，SAM不僅可由ACC合成酶(ACS)的催化作用合成ACC，還可經(jīng)S-腺苷蛋氨酸脫羧酶(SAMDC)的作用合成多胺[5]。因此，多胺和乙烯共享一個合成前體物質(zhì)—SAM。乙烯抑制劑氨基乙基乙烯基甘氨酸(AVG)可降低西番蓮中SAM合成ACC的速率，同時促進(jìn)Spm和Spd的合成[6]。而多胺合成抑制劑二氟甲基精氨酸(DFMA)或甲基乙二醛-雙脒基腙(MGBG)則可反向促進(jìn)白蛾藤花瓣外植體中乙烯的合成[7]。

水蜜桃為我國夏季大宗時令水果，因其鮮艷的色澤和鮮甜多汁的口感深受大眾青睞。但水蜜桃作為典型的躍變型果實，貯藏期間存在明顯的呼吸和乙烯峰及后熟軟化效應(yīng)，導(dǎo)致果實采后品質(zhì)劣變和生理病害問題突出，因此降低乙烯峰值或推遲其峰值的出現(xiàn)時間有利于維持水蜜桃的采后品質(zhì)，延長果實貨架期[8]。已有相關(guān)研究證實外源多胺處理可明顯抑制西葫蘆[9]和杏[10]等果蔬采后品質(zhì)的衰敗并延長貨架期。但現(xiàn)階段多胺對桃果實采后常溫貯藏品質(zhì)及內(nèi)源性乙烯合成的影響還未進(jìn)行詳細(xì)的量化分析?？紤]到多胺和乙烯在合成途徑中存在底物競爭關(guān)系，因此，本研究以“白鳳”水蜜桃為試材，從乙烯釋放、多胺含量變化及二者消長關(guān)聯(lián)方面著手，分析外源Spd處理對采后桃果實生理及貯藏品質(zhì)的影響，以期為揭示多胺延緩果實采后衰老進(jìn)程的機(jī)理提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

本研究以“白鳳”水蜜桃(PrunuspersicaBatsch. cv. ‘Baifeng’)為試材，分別于2019年6月3日和7月10日采自四川省遂寧市船山區(qū)有機(jī)水蜜桃種植基地，采收后3 h內(nèi)運回實驗室。先剔除有機(jī)械傷和霉菌斑點果實，再挑選果柄完整、果實大小一致、著色均勻的八成熟果實，攤開置于實驗臺，通風(fēng)散去田間熱。采摘當(dāng)天測定桃果實可溶性固形物(TSS)和可滴定酸(TA)含量，其數(shù)值分別為(8.74±0.45)%和(0.44±0.03)%。

β-巰基乙醇、苯甲酰氯，上?；瘜W(xué)試劑公司；Follin-酚試劑、蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品、亞精胺標(biāo)品、精胺標(biāo)品、腐胺標(biāo)品，美國Sigma公司；乙烯，重慶瑞信特種氣體有限公司；沒食子酸、高氯酸、三氯乙酸、硫代巴比妥酸等(分析純)，中國國藥集團(tuán)有限公司；RNAprep Pure Kit，北京天根公司；DCF-DA試劑盒，南京建成生物工程研究所；chamQ universal SYBR qPCR master mix、HiScript III RT SuperMix，南京Vazyme公司。

PAL-1型手持?jǐn)?shù)顯折光儀，日本Atago公司；HQF-20型便攜式紅外線二氧化碳分析儀，金壇市瑞華儀器有限公司；GL-20G-II型冷凍離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠；DW-86L型超低溫冰箱，海爾公司；Technologies 7280A型氣相色譜儀，美國Agilent公司；LC-20A型液相色譜分析儀，日本島津公司；Epoch型全波長酶標(biāo)儀，美國Biotek公司；SM-24單細(xì)胞懸液制備儀，上海凈信公司；F-4600型熒光分光光度計，日本日立公司；ABI QuantStudio7型實時熒光定量PCR儀，美國Thermofisher公司。

1.2 處理

2019年6月實驗主要探討Spd處理對桃果實采后腐爛和品質(zhì)的影響，以篩選最適Spd處理濃度。對上述挑選出的桃果實用75%(體積分?jǐn)?shù))乙醇進(jìn)行表面消毒后，隨機(jī)分成4組：(1)對照組，桃果實浸泡于無菌蒸餾水中，持續(xù)10 min(20 ℃)；(2)0.5 mmol/L Spd處理組，桃果實浸泡于預(yù)先制備好的0.5 mmol/L Spd溶液中，持續(xù)10 min(20 ℃)；(3)和(4)組Spd處理濃度為1和2 mmol/L，方法同(2)。上述處理完成后將桃果實取出放置于不銹鋼鋼網(wǎng)上，20 ℃下晾干后分裝于60 μm厚的聚乙烯袋中，每袋4顆果實，袋口用橡皮筋纏繞2圈，于(20±1)℃、80%～90%相對濕度的條件下貯藏8 d，期間每2 d取鮮樣測定果實腐爛率及品質(zhì)參數(shù)以確定外源Spd的最適處理濃度。各處理組10袋果實，重復(fù)3次，整個實驗重復(fù)2次。

2019年7月實驗著重分析Spd處理對桃果實多胺合成和乙烯代謝的影響。將挑選出的桃果實隨機(jī)分為4組，分別用無菌蒸餾水(對照)和0.5、1和2 mmol/L的Spd溶液進(jìn)行處理，處理方法和分裝同預(yù)試驗。處理完成后，桃果實同樣在(20±1) ℃、80%～90%相對濕度的條件下貯藏8 d，期間每2 d取鮮樣測定果實乙烯釋放量和呼吸速率，并同時取樣經(jīng)液氮速凍后置于-80 ℃超低溫冰箱中保存以測定多胺含量以及相關(guān)酶活性和基因表達(dá)水平。各處理組16袋果實，重復(fù)3次，整個實驗重復(fù)2次。

1.3 測定指標(biāo)及方法

1.3.1 腐爛率和褐變度的測定

當(dāng)桃果實表面出現(xiàn)水漬狀斑點或霉菌性病灶即被記為爛果，爛果所占百分比即為腐爛率。

褐變度的測定參考JIANG等[11]的方法，略有改動。稱取2 g鮮果肉，研磨后加入10 mL 0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液(PBS，pH 7.5)，充分勻漿后于4 ℃ 10 000×g離心25 min，于410 nm處測定上清吸光值，并以吸光值表示樣品褐變度。

1.3.2 可溶性固形物、可滴定酸和pH值的測定

可溶性固形物(total soluble solid，TSS)、可滴定酸(titratable acid，TA)及pH值的測定采用汪開拓等[12]的手持折光儀法、酸堿滴定法及pH計法。

1.3.3 總酚、總黃酮、總花色苷含量測定

取10 g鮮樣于20 mL含0.2%(體積分?jǐn)?shù))甲酸的冷丙酮浸提液，充分勻漿后于4 ℃ 12 000×g離心20 min，收集上清液，再往沉淀中加入20 mL浸提液振蕩混勻后再次冷凍離心，合并上清液，定容至50 mL以供總酚、總黃酮和總花色苷含量的測定?？偡雍繙y定參考Flion-Ciocalteu法[13]，總黃酮和總花色苷含量按WANG等[14]的方法測定，結(jié)果均以μg/gFW表示。

1.3.4 乙烯釋放量和呼吸速率測定

乙烯釋放量參考BREGOLI等[15]的方法進(jìn)行測定。在每個取樣時間點從各處理組隨機(jī)取5個桃果實密閉于4.5 L塑料盒1 h抽氣取樣，經(jīng)氣相色譜檢測乙烯濃度。色譜條件：Porapak Q 80/100 SS安捷倫色譜填充柱，氫火焰離子化檢測器，柱溫、進(jìn)樣口和檢測室溫度分別為70、120、150 ℃，載體為N2，外標(biāo)法定量，結(jié)果以μL/(kg FW·h)表示。

呼吸速率參考汪開拓等[12]的方法進(jìn)行測定，略有調(diào)整。從各處理組中隨機(jī)取5個桃果實密閉于4.5 L塑料盒，用便攜式紅外線二氧化碳測定儀直接測定30 min內(nèi)CO2的釋放量，以mgCO2/(kg FW·h)表示。

1.3.5 內(nèi)源多胺含量測定

內(nèi)源多胺含量按BREGOLI[15]的HPLC方法進(jìn)行測定，略有修改。取5 g凍樣于10 mL 5%(體積分?jǐn)?shù))高氯酸冰浴研磨勻漿，浸提2 h后于4 ℃ 10 000×g離心25 min。取500 μL上清于10 mL離心管中，加入7 μL苯甲酰氯及1 mL 2 mol/L NaOH，渦漩后于37 ℃水浴0.5 h。隨后加入2 mL飽和NaCl溶液，混勻后經(jīng)2 mL乙醚萃取，離心后取醚相水浴干燥，殘留物再經(jīng)甲醇溶解后備用。流動相由去離子水(A)和甲醇(B)組成。梯度洗脫：0～1 min，50%A: 50% B；15～25 min，20%A: 80%B；26～35 min，70%A: 30%B。流速0.8 mL/min，柱溫30 ℃。HPLC裝備XBridge反向C18柱(250 mm×4.6 mm，5.0 μm填料粒徑)，檢測波長230 nm。外標(biāo)法計算樣品中內(nèi)源Spd、Spm和Put含量。

1.3.6PpSAMDC、PpSPDS、PpADC、PpACS1和PpACO1基因表達(dá)量測定

取5 g凍樣于液氮充分研磨后用RNAprep Pure Kit提取總RNA，再使用HiScript III RT試劑盒將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA第一條鏈。參照PpSAMDC、PpSPDS、PpADC、PpACS1、PpACO1基因序列設(shè)計特異性引物(表1)，以單鏈cDNA為模板，以管家基因Pp18SrRNA為內(nèi)參照進(jìn)行SYBR Green實時熒光定量PCR(qRT-PCR)試驗。根據(jù)各基因的循環(huán)閾值(Ct值)用定量法(2-ΔΔCt)分析各基因mRNA表達(dá)豐度，將零點表達(dá)量設(shè)置為1以校準(zhǔn)各基因的相對表達(dá)量[16]。

表1相關(guān)基因特異性引物序列Table 1 The sequences of the gene primers used in this study

1.3.7 丙二醛、相對電導(dǎo)率和活性氧水平測定

丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量與相對電導(dǎo)率的分別采用硫代巴比妥酸(TBA)法及電導(dǎo)率儀法進(jìn)行測定[12]。果實組織內(nèi)活性氧水平參考LESHEM等[17]的2′,7′-二氯二氫熒光素二乙酸酯(DCFH-DA)熒光探針法來測定，略有改動。將5 g果實鮮樣用20 mL無菌生理鹽水勻漿后置于單細(xì)胞懸浮制備儀中旋切2 min。吸取2 mL懸液并用300目微孔尼龍膜過濾以獲取單細(xì)胞懸液并用10 μmol/L DCFH-DA溶液將細(xì)胞密度調(diào)整至1×107個/mL，最后使用熒光分光光度計(λem 510 nm，λex 525 nm)測定單細(xì)胞懸液熒光強(qiáng)度來表示胞內(nèi)活性氧水平。

1.4 數(shù)據(jù)處理

以上各指標(biāo)測定除腐爛率、TSS、TA和pH值重復(fù)測定10 次外，其余指標(biāo)重復(fù)3 次。數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差表示，用Origin 8.5軟件作圖。運用SAS 8.2軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，使用Duncan多重比較法分析差異顯著性(5%水平)。

2 結(jié)果與分析

2.1 外源Spd處理對桃果實采后腐爛率及果肉褐變度的影響

采后貯藏期間桃果實腐爛率呈現(xiàn)不斷上升趨勢，對照果實在20 ℃貯藏8 d后腐爛率達(dá)22.33%，基本喪失商品價值(圖1-a)。而適宜濃度的Spd處理(0.5或1 mmol/L Spd)可顯著(P<0.05)延緩桃果實采后腐爛的發(fā)生，尤其是經(jīng)1 mmol/L Spd處理過的桃果實于20 ℃貯藏8 d后的腐爛率為13.27%，僅為對照組的0.59倍。同期，0.5或1 mmol/L Spd處理組桃果肉的褐變度較對照組顯著(P<0.05)下降，在采后貯藏的8 d內(nèi)，1 mmol/L Spd處理組果肉的褐變度均顯著(P<0.05)低于對照組水平(圖1-b)。但2 mmol/L Spd處理反而加劇了桃果實腐爛及果肉褐變癥狀的發(fā)展。

a-腐爛率；b-褐變度圖1 外源Spd處理對桃果實貯藏期間腐爛率及褐變度的影響Fig.1 Effects of Spd treatments on the decay incidence and browning degree in peaches during the storage注：同一貯藏時間下不同小寫字母表示顯著性差異(P<0.05)(下同)

2.2 不同濃度Spd處理對桃果實采后貯藏品質(zhì)的影響

如表2所示，貯藏期間，桃果實TSS及pH值呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢，TA含量逐漸下降。其中，0.5或1 mmol/L Spd可顯著(P<0.05)促進(jìn)果實TSS和TA的積累并延緩pH值的上升，2 mmol/L Spd處理則降低了桃果實的可溶性固形物及有機(jī)酸含量。同時，0.5或1 mmol/L Spd可有效提高果實總酚、總黃酮和總花色苷含量；在貯藏6 d后，1 mmol/L Spd處理最為顯著(P<0.05)地促進(jìn)了上述抗氧化物質(zhì)的積累。因此，1 mmol/L Spd處理對桃果實采后貯藏品質(zhì)和抗氧化物質(zhì)含量的維持效果最佳。

表2 不同濃度Spd處理對桃果實采后貯藏品質(zhì)的影響Table 2 Effects of Spd treatments at different concentrations on the quality of postharvest peaches

注：同一貯藏時間點，各處理與對照組比較，*表示顯著性差異(P<0.05)

2.3 外源Spd處理對桃果實MDA含量、相對電導(dǎo)率及活性氧水平的影響

桃果實采后貯藏期間，MDA含量、相對電導(dǎo)率和活性氧水平均呈現(xiàn)出遞增趨勢(圖2)。外源0.5或1 mmol/L Spd處理可一定程度延緩果肉MDA含量及膜透性的上升，其中1 mmol/L Spd處理的作用效果最為顯著。2 mmol/L Spd處理反而加劇了貯藏期間桃果肉的膜脂過氧化程度。DCFH-DA作為特異性探針可準(zhǔn)確監(jiān)測細(xì)胞活性氧水平[18]。桃果實采后貯藏期間活性氧水平呈現(xiàn)出線性增長模式，但經(jīng)0.5或1 mmol/L Spd，尤其是經(jīng)1 mmol/L Spd處理后的桃果實所產(chǎn)生的DCF熒光強(qiáng)度在貯藏期間顯著(P<0.05)低于對照果實。

a-MDA含量；b-相對電導(dǎo)率：c-活性氧水平圖2 外源Spd處理對桃果實MDA含量、相對電導(dǎo)率及活性氧水平的影響Fig.2 Effects of Spd treatments on the MDA content, relative electric conductivity and ROS production in peaches during the storage

2.4 外源Spd處理對桃果實內(nèi)源多胺含量的影響

采后貯藏期間，對照桃果實中內(nèi)源亞精胺(Spd)及精胺(Spm)含量均呈逐漸上升趨勢，二者極顯著正相關(guān)(r=0.92**，P<0.05)；而腐胺(Put)含量呈現(xiàn)逐漸下降的變化趨勢(圖3)。外源Spd處理可促進(jìn)桃果實內(nèi)源性游離多胺的積累，其中1 mmol/L Spd處理最為顯著的誘導(dǎo)了桃果實內(nèi)源Spd及Spm的合成，該處理組果實內(nèi)源Spd及Spm含量在整個貯藏期間均顯著(P<0.05)高于0.5或2 mmol/L Spd處理組水平。同期，0.5或1 mmol/L Spd處理可顯著延緩Put含量的下降，1 mmol/L Spd處理組果實在貯藏期間始終保持著最高的Put含量。2 mmol/L Spd處理反而導(dǎo)致了桃果實內(nèi)源多胺的消耗。

a-Spd；b-Spm；c-Put圖3 外源Spd處理對桃果實亞精胺、精胺和腐胺含量的影響Fig.3 Effects of Spd treatments on the contents of Spd, Spm and Put in peaches during the storage

2.5 外源Spd處理對桃果實乙烯釋放量及呼吸速率的影響

由圖4可看出，對照果實均于貯藏的第4天出現(xiàn)乙烯和呼吸峰，其數(shù)值為23.64 μL/(kg FW·h)和53.64 mgCO2/(kgFW·h)，分別是貯藏前的2.29和1.51倍。外源Spd處理組(0.5或1 mmol/L Spd)果實的呼吸速率的變化趨勢同對照保持一致，且適宜濃度的Spd處理(0.5或1 mmol/L Spd)可顯著(P<0.05)降低桃果實的乙烯和呼吸峰并始終保持果實乙烯釋放量及呼吸速率在較低水平。然而，較高濃度的Spd處理(2 mmol/L Spd)卻加劇了采后桃果實的乙烯釋放及呼吸速率。

2.6 外源Spd處理對桃果實PpSAMDC、PpSPDS、PpADC相對表達(dá)量的影響

由圖5可知，除貯藏第8天外，對照果實采后貯藏期間PpSAMDC、PpSPDS及PpADC的相對表達(dá)量呈現(xiàn)逐漸上升的變化趨勢。0.5或1 mmol/L Spd處理可顯著(P<0.05)上調(diào)貯藏期間桃果實PpSAMDC、PpSPDS及PpADC的轉(zhuǎn)錄；但較高濃度對PpSPDS及PpADC的轉(zhuǎn)錄表達(dá)有一定抑制作用。

a-乙烯釋放量；b-呼吸速率圖4 外源Spd處理對桃果實乙烯釋放量及呼吸速率的影響Fig.4 Effects of Spd treatments on the ethylene production and respiratory rate in peaches during the storage

a-PpSAMDC；b-PpSPDS；c-PpADC圖5 外源Spd處理對桃果實PpSAMDC、PpSPDS和PpADC表達(dá)豐度的影響Fig.5 Effects of Spd treatments on the expression levels of PpSAMDC, PpSPDS and PpADC in peaches during the storage

2.7 外源Spd處理對桃果實PpACS1、PpACO1相對表達(dá)量的影響

對照果實采后貯藏期間PpACS1及PpACO1的相對表達(dá)量大體呈現(xiàn)逐漸上升的變化趨勢；外源Spd處理(0.5或1 mmol/L Spd)顯著(P<0.05)下調(diào)了PpACS1、PpACO1的表達(dá)量，而2 mmol/L Spd處理組果實相應(yīng)基因的表達(dá)量則在貯藏期間顯著上調(diào)(圖6)。

a-PpACS1；b-PpACO1圖6 外源Spd處理對桃果實PpACS1和PpACO1表達(dá)豐度的影響Fig.6 Effects of Spd treatments on the expression levels of PpACS1 and PpACO1 in peaches during the storage

2.8 外源Spd處理對桃果實乙烯釋放量和內(nèi)源多胺消長關(guān)系的影響

在多胺生物合成途徑中，Spd和Spm與乙烯共同競爭底物S-腺苷-L-蛋氨酸(SAM)，桃果實采后貯藏期間乙烯釋放量和內(nèi)源多胺的比值(E/Spd和E/Spm)可反映底物SAM的主要去向[19]。隨著采后貯藏時間的延長，E/Spd及E/Spm大體均呈現(xiàn)出與乙烯釋放量一致的變化趨勢。較對照而言，0.5或1 mmol/L Spd處理組的E/Spd及E/Spm得以大幅下降，然而2 mmol/L Spd處理組的E/Spd及E/Spm始終保持在最高水平(圖7)。

a-E/Spd；b-E/Spm圖7 外源Spd處理對桃果實乙烯釋放量與亞精胺或精胺含量比值的影響Fig.7 Effects of Spd treatments on E/Spd and E/Spm values in peaches during the storage

3 討論

多胺作為一類具有獨特生物活性的小分子物質(zhì)，在果實的生理衰老和脅迫響應(yīng)方面起著重要的調(diào)控作用[3]。本研究中，1 mmol/L Spd處理較其他處理濃度更為顯著地降低了桃果實在貯藏期間腐爛率和褐變度的上升(圖1)，并且經(jīng)1 mmol/L Spd處理的果實中感官品質(zhì)和抗氧化物質(zhì)含量也顯著高于對照果實(表2)。同時，經(jīng)1 mmol/L Spd處理的桃果實中呼吸速率、乙烯釋放量、MDA含量、相對電導(dǎo)率和細(xì)胞活性氧水平等生理參數(shù)均顯著低于對照水平。這說明，1 mmol/L Spd處理可有效維持桃果實活性氧代謝平衡和細(xì)胞膜完整性，延緩生理衰老和品質(zhì)劣變速度。多胺屬于直鏈陽離子化合物，相對高濃度的Spd(2 mmol/L)處理則可能造成果實內(nèi)部滲透壓和細(xì)胞膜電位的改變，故導(dǎo)致其對桃果實的保鮮效果不佳。與本結(jié)果相類似，適宜濃度的外源Spd處理(0.5～1 mmol/L)可有效維持葡萄[20]、梨[21]及獼猴桃[22]等果實的采后貯藏品質(zhì)以延長貨架期，而高濃度Spd反而不利于植物次生代謝物的合成[23]。

乙烯與呼吸躍變型果實的后熟、生理衰老和腐爛密切相關(guān)[2]。抑制呼吸躍變型果實如香蕉[24]和芒果[25]中內(nèi)源乙烯合成可有效降低呼吸峰值，延緩后熟進(jìn)程或品質(zhì)劣變速率，延長果實貨架期。在多胺合成路徑中，SAMDC酶可將SAM脫羧為deSAM從而為多胺合成提供底物，ADC和SPDS酶則是合成Put和Spd的關(guān)鍵酶[26]，而ACO和ACS酶則是將SAM催化為乙烯的關(guān)鍵酶[27]，故乙烯和多胺在合成路徑上存在對共同底物SAM的競爭關(guān)系。在本研究中，外源1 mmol/L Spd處理可顯著誘導(dǎo)PpSAMDC、PpSPDS和PpADC等多胺合成相關(guān)基因表達(dá)量的上升(圖5)，從而促進(jìn)果實中游離多胺(Spd、Spm和Put)的積累(圖3)，而經(jīng)Spd處理的水蜜桃果實中PpACS1和PpACO1基因表達(dá)豐度以及乙烯釋放量則顯著低于對照果實，從而導(dǎo)致E/Spd和E/Spm的下降。這些數(shù)據(jù)表明，Spd處理可通過下調(diào)乙烯合成相關(guān)基因并上調(diào)多胺合成相關(guān)基因的表達(dá)使得SAM趨于多胺合成方向，從而促進(jìn)果實多胺合成并降低乙烯釋放量和呼吸速率，維持貯藏品質(zhì)。這與前人的在番茄[28]及中黃瓜[29]中的研究結(jié)果保持一致。另一方面，內(nèi)源多胺常以多聚陽離子狀態(tài)存在，可中和細(xì)胞膜上帶負(fù)電荷的磷脂，提高細(xì)胞膜還原勢，避免活性氧自由基的過度積累，從而降低細(xì)胞膜中不飽和脂肪酸的過氧化程度，維持膜脂滲透性和流動性[23]；外源Spd處理也被證實具有改善由高鹽和高溫脅迫導(dǎo)致的膜介導(dǎo)的氫離子外滲現(xiàn)象的作用，阻止植物體細(xì)胞結(jié)構(gòu)的崩潰[30]。本研究中，1 mmol/L Spd處理可顯著降低水蜜桃胞內(nèi)活性氧水平并抑制MDA含量和相對電導(dǎo)率的上升，這說明外源多胺處理具有維持桃果實細(xì)胞膜穩(wěn)定性、延緩采后衰老速度的作用，這與乙烯峰值的降低和游離多胺合成量的增加密切相關(guān)。

4 結(jié)論

1 mmol/L Spd處理可顯著維持桃果實中可溶性固形物及有機(jī)酸的含量，促進(jìn)總酚、黃酮與花色苷物質(zhì)的合成，并有效抑制貯藏期間果肉褐變及腐爛的發(fā)生。其誘導(dǎo)桃果實PpSAMDC、PpSPDS及PpADC高表達(dá)的同時下調(diào)PpACS1及PpACO1的轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)果實內(nèi)源性Spd、Spm和Put的合成并抑制內(nèi)源乙烯的合成，減緩膜脂過氧化程度，從而維持果實采后品質(zhì)。