KL-6 對(duì)老年人間質(zhì)性肺疾病的評(píng)價(jià)作用

翟勝爽，白夏芬，陳瑞林，王丹丹，鄭洋洋，孫琳林

(1.牡丹江醫(yī)學(xué)院，黑龍江 牡丹江；2.牡丹江醫(yī)學(xué)院附屬紅旗醫(yī)院，黑龍江 牡丹江；3.河北燕達(dá)醫(yī)院，河北 廊坊)

0 引言

間質(zhì)性肺疾病(interstitial lung diseases，ILD)是一組累及肺間質(zhì)和肺泡腔的彌漫性肺疾病，最終會(huì)發(fā)展為彌漫性肺纖維化和蜂窩肺，導(dǎo)致呼吸衰竭而死亡[1]。該病發(fā)病率近年來(lái)有逐漸增加趨勢(shì)，其特點(diǎn)為老年人高發(fā)、治療困難、預(yù)后差，并且缺乏特異性診斷方法。許多國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，表達(dá)于Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞的涎液化糖鏈抗原-6(KL-6)對(duì)于ILD 的診斷具有較高應(yīng)用價(jià)值[2,3]，有關(guān)KL-6 與各種類型ILD 的研究逐漸成為近年來(lái)的熱點(diǎn)。但由于老年人群的特殊性，KL-6 在老年ILD 中是否依然具有很好臨床應(yīng)用價(jià)值，有關(guān)這方面的研究較少。本研究通過(guò)比較老年ILD組與老年健康組血清KL-6 的表達(dá)水平，探討KL-6 用于老年間質(zhì)性肺疾病診斷的臨床意義，同時(shí)，將血清KL-6 與肺功能指標(biāo)及HRCT 所示疾病嚴(yán)重程度進(jìn)行相關(guān)性分析，初步衡量血清KL-6 用于評(píng)價(jià)老年間質(zhì)性肺疾病嚴(yán)重程度的可行性。

1 資料與方法

1.1 入組篩查

收集2018 年7 月至2019 年7 于牡丹江醫(yī)學(xué)院附屬紅旗醫(yī)院確診的34 例老年ILD 患者作為老年ILD 組(年齡均≥60 歲)，其中皆為特發(fā)性肺纖維化(IPF)或結(jié)締組織病相關(guān)間質(zhì)性肺疾病(CID-ILD)病例。同期選擇30 例于我院體檢的健康老年人作為老年健康組(年齡均≥60 歲)。取得我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)并經(jīng)患者簽署知情同意書(shū)后進(jìn)行此研究。

納入標(biāo)準(zhǔn)：ILD 的診斷結(jié)合臨床、肺功能及影像學(xué)檢查，需滿足以下條件：①主要癥狀表現(xiàn)為干咳和活動(dòng)后呼吸困難。②患側(cè)肺部可聞及Velcro 啰音。③胸部HRCT 表現(xiàn)以胸膜下、基底部分布為主的網(wǎng)格影和蜂窩影，伴或不伴牽拉性支氣管擴(kuò)張。④肺功能檢查表現(xiàn)為限制性通氣功能障礙和(或)彌散功能的降低。其中，特發(fā)性肺纖維化(IPF)診斷參照2018 年發(fā)布的《中國(guó)特發(fā)性肺纖維化臨床-影像-病理診斷規(guī)范》[4]。結(jié)締組織病相關(guān)間質(zhì)性肺疾病(CTD-ILD)為根據(jù)國(guó)際性診斷標(biāo)準(zhǔn)確診的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)[5]、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)[6]、多發(fā)性肌炎/皮肌炎(PM/DM)[7]、系統(tǒng)性硬化(SSc)[8]、干燥綜合征(pSS)[9]加上符合上述ILD的表現(xiàn)即可診斷。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①由職業(yè)、環(huán)境、藥物引發(fā)的肺部病變；②合并腫瘤的患者；③存在嚴(yán)重心功能不全及嚴(yán)重呼吸衰竭的患者；④不能夠良好配合完成HRCT 及肺功能檢查的患者。

1.2 研究方法

1.2.1 一般資料

對(duì)所有入組人員進(jìn)行基本病史釆集及查體。記錄性別、年齡、病程、臨床診斷、癥狀及體征，詳細(xì)詢問(wèn)職業(yè)及家居環(huán)境史、藥物應(yīng)用史、吸煙史、既往病史等。

1.2.2 KL-6 檢測(cè)方法

所有納入對(duì)象在空腹條件下抽取外周靜脈血，在4℃條件下、以3000rpm 的轉(zhuǎn)速離心10 分鐘，留取血清，置于-80℃的冰箱內(nèi)保存等待一起檢測(cè)。應(yīng)用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)血清KL-6 水平，試劑盒選用上海篤瑪生物公司的KL-6 ELISA 檢驗(yàn)試劑盒，按照說(shuō)明書(shū)操作。使用美國(guó)Molecular Devices 公司所產(chǎn)的酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度，所有樣本均采取復(fù)孔檢測(cè)。最后，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)校正曲線計(jì)算血清樣本KL-6 濃度。

1.2.3 肺功能檢查指標(biāo)

老年ILD 患者均接受肺功能檢查，使用德國(guó)耶格Master Screen Diffusion 肺功儀，全程由專業(yè)的肺功能測(cè)定技術(shù)人員規(guī)范操作。收集如下指標(biāo)：一氧化碳彌散量占預(yù)計(jì)值百分比(DLCO%pred)、彌散系數(shù)占預(yù)計(jì)值的百分比(DLCO/VA%pred)、肺活量占預(yù)計(jì)值百分比(VC%pred)、用力肺活量占預(yù)計(jì)值百分比(FVC%pred)、肺總量占預(yù)計(jì)值百分比(TLC%pre)、殘氣量占預(yù)計(jì)值百分比(RV%pred)、第一秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值百分比(FEV1%pred)及第一秒用力呼氣容積/用力肺活量(FEV1/FVC)。

1.2.4 肺CT 評(píng)估方法

對(duì)納入的ILD 患者完善胸部高分辨CT(HRCT)檢查并對(duì)肺部病變受累范圍進(jìn)行評(píng)估。將患者HRCT 圖像分為主動(dòng)脈弓、氣管分叉、四腔心及膈上1cm 四個(gè)層面，再將每個(gè)層面按照左右肺分為左上、左下、右上、右下四個(gè)象限。計(jì)分方法為：未受累記為0 分，受累范圍≤25%記1 分，25%-50%記為2 分，50%-75%記3 分，≥75%記4 分，總體受累范圍評(píng)分為4 個(gè)層面各個(gè)象限評(píng)分之和。由2 名副主任級(jí)別以上影像科醫(yī)師進(jìn)行評(píng)分。

1.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 25.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示，兩組間均數(shù)比較，滿足正態(tài)分布且方差齊采用t 檢驗(yàn)，若不滿足采用Wilcoxon 秩和檢驗(yàn)。繪制受試者工作曲線(ROC)得到KL-6 臨界值及其敏感性和特異性。對(duì)于成正態(tài)分布的連續(xù)計(jì)量資料采用Pearson 相關(guān)進(jìn)行相關(guān)分析，不服從正態(tài)分布的變量采用Spearman 秩相關(guān)，以P＜0.05 判定為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 老年ILD 組與老年健康組一般情況比較

兩組患者在年齡、性別、有無(wú)吸煙史方面的差異不具顯著性(P＞0.05)。

2.2 老年ILD 組及老年健康組血清KL-6 水平比較

老年ILD 組患者平均KL-6 水平明顯高于老年健康組[(1026.36±304.57)VS(384.83±182.42)U/mL，差 異 具 有 顯 著性(P＜0.001)。根據(jù)老年ILD 組和老年健康組血清KL-6 不同水平的靈敏度和特異性繪制ROC 曲線(見(jiàn)圖1)，曲線下面積AUC為0.958，當(dāng)KL-6 取569.05U/mL 時(shí)，此時(shí)KL-6 對(duì)于老年ILD 診斷的靈敏度和特異性分別為91.20%和90.0%。

圖1 根據(jù)KL-6 靈敏度和特異度制作的受試者工作特征曲線

2.3 老年ILD 患者血清KL-6 水平與HRCT 的相關(guān)情況

對(duì)34 例老年ILD 患者的HRCT 進(jìn)行評(píng)估，肺部病變總體受累范圍評(píng)分在12-48 分之間。將其血清KL-6 水平與其HRCT評(píng)分進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示KL-6 與HRCT 評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.686，P＜0.001)(見(jiàn)圖2)。

圖2 老年ILD 組血清KL-6 與其HRCT 評(píng)分的關(guān)系

2.4 老年ILD 患者血清KL-6 水平與肺功能指標(biāo)的相關(guān)情況

老年ILD 患者KL-6 水平與反映肺部彌散功能障礙的主要指標(biāo)DLCO SB%pred、DLCO/VA%pred 呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)，僅與反映限制性通氣功能障礙的一個(gè)指標(biāo)TLC%pred 呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)，與VC%pred、FVC%pred、RV%pred 未顯示相關(guān)性(P＞0.05)。與反映阻塞性通氣功能障礙的主要指標(biāo)FEV1%pred、FEV1/FVC 未顯示相關(guān)性(P＞0.05)(見(jiàn)表1)。

表1 血清KL-6 與肺功能指標(biāo)的相關(guān)性分析結(jié)果

3 討論

間質(zhì)性肺疾病(ILD)可以發(fā)生在各年齡階段，由于人口老齡化的加劇該病發(fā)病率隨之增加，尤其是特發(fā)性間質(zhì)性肺炎中的特發(fā)性肺纖維化(IPF)更多發(fā)生于老年人[10]。老年患者群體較為特殊，病情綿延不愈，更加需要一種簡(jiǎn)單無(wú)創(chuàng)的血清學(xué)檢查來(lái)早期診斷疾病[11]。本研究著重于間質(zhì)性肺疾病患者中的老年人群，檢測(cè)了老年ILD 患者及老年健康人群的血清KL-6 水平，發(fā)現(xiàn)老年ILD 組平均KL-6 水平明顯高于老年健康組(P＜0.001)，提示KL-6 在老年ILD 中具有較高的表達(dá)性，可能為老年ILD 的診斷提供了有力的證據(jù)。并且，得出KL-6 對(duì)于老年ILD 診斷的截?cái)嘀禐?69.05U/mL，此時(shí)對(duì)其診斷的靈敏度和特異性最好，這與以往文獻(xiàn)報(bào)道的在ILD 所有人群中將KL-6 截?cái)嘀翟O(shè)定為500U/mL的結(jié)論類似[12]。

KL-6 屬于MUCl 基因編碼的一種高分子量黏蛋白，最初由日本學(xué)者發(fā)現(xiàn)，研究證實(shí)KL-6 主要存在于由增殖、再生或受損的Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞表面，KL-6 水平可以作為肺泡上皮細(xì)胞破壞和再生的指標(biāo)[13]。各種類型ILD 病理表現(xiàn)大致相同，患者肺組織基底膜受損，KL-6 的表達(dá)隨Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞增生而增加，進(jìn)而釋放入肺泡間隙，ILD 患者因炎性物質(zhì)等刺激導(dǎo)致血管通透性增強(qiáng)，KL-6 移行至血液使得血液中KL-6 水平升高[14]。KL-6 與ILD發(fā)病機(jī)制的關(guān)系尚未完全清楚，Ohshimo 等[15]研究發(fā)現(xiàn)過(guò)量的KL-6 可抑制抗纖維化因子生成，導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)成分沉積增多和重塑，進(jìn)而發(fā)展至肺纖維化。

老年ILD 多數(shù)起病隱匿，呈進(jìn)行性加重，常于首診時(shí)即發(fā)現(xiàn)較嚴(yán)重的肺部影像學(xué)改變。目前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者一致認(rèn)為肺部HRCT在ILD 的診斷方面有著不可替代的作用，并在判斷ILD 患者的病情程度、活動(dòng)狀態(tài)、治療效果和預(yù)后方面具有重要價(jià)值[16]。本研究發(fā)現(xiàn)，老年ILD 患者血清中KL-6 與肺部HRCT 中網(wǎng)格影和蜂窩影評(píng)分呈正相關(guān)，且相關(guān)性良好。這與國(guó)內(nèi)外學(xué)者Yamakawa[17]、朱晨等[18]發(fā)現(xiàn)的ILD 患者血清KL-6 水平與HRCT 所示疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān)的結(jié)論一致。

同樣，肺功能指標(biāo)對(duì)于ILD 病情嚴(yán)重程度和治療效果的評(píng)估具有重要作用。ILD 患者常表現(xiàn)為限制性通氣功能障礙和彌散性功能降低。與文獻(xiàn)報(bào)道一致[19,20]，本研究發(fā)現(xiàn)老年ILD 患者KL-6 水平與彌散功能指標(biāo)和TLC%pred 呈負(fù)相關(guān)，提示KL-6 可以用來(lái)評(píng)估老年ILD 的病情嚴(yán)重程度。但KL-6 與VC%pred、FVC%pred、RV%pred 未顯示相關(guān)性，這很可能與老年人的呼吸系統(tǒng)器官的正常生理老化有關(guān)。例如，肺活量(VC)以及用力肺活量(FVC)隨增齡而減少，殘氣量和功能殘氣量隨著增齡變化而增加。有研究表明60 歲以后，肺活量下降的最多，殘氣量占肺總量的百分比可以增大到40%[21]。故患有ILD 的老年人可能受到正常老化和病理兩因素的綜合刺激，使得KL-6 與上述三項(xiàng)指標(biāo)未成一定相關(guān)性。

綜上所述，我們認(rèn)為血清KL-6 對(duì)老年人間質(zhì)性肺疾病的診斷以及病情評(píng)估具有較好的評(píng)價(jià)作用。但本研究入組的患者例數(shù)偏少，這可能對(duì)得出的KL-6 截?cái)嘀涤幸欢ǖ挠绊懀式窈笥写_(kāi)展多中心大樣本的臨床研究來(lái)制定中國(guó)老年人群的KL-6 截?cái)嘀?，有待通過(guò)隨訪來(lái)探究KL-6 用于評(píng)估老年ILD 療效及判斷預(yù)后的作用。