邁瑞CL-6000I化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)系統(tǒng)性能驗(yàn)證

謝菊紅 何沛 郭炫

[摘要] 目的 驗(yàn)證邁瑞CL-6000I化學(xué)發(fā)光分析儀檢測(cè)系統(tǒng)的性能。方法 參照國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS）等相關(guān)文件對(duì)邁瑞CL-6000I化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)甲狀腺激素：三碘甲狀腺原氨酸（T3）、四碘甲狀腺原氨酸（T4）、游離三碘甲狀腺原氨酸（FT3）、游離四碘甲狀腺原氨酸（FT4）、促甲狀腺素（TSH）5個(gè)項(xiàng)目的精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍、生物參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果 檢測(cè)的5個(gè)項(xiàng)目批內(nèi)精密度變異系數(shù)CV%在1.837%～4.07%，批間精密度變異系數(shù)CV%在2.634%～7.49%，準(zhǔn)確度比對(duì)偏倚范圍為6.289%～9.62%，線性范圍斜率在0.981 2～1.013，r2在0.951 7～0.999 2，均滿足相關(guān)文件的要求;參與生物參考區(qū)間驗(yàn)證的樣本檢測(cè)結(jié)果均在廠家標(biāo)注的范圍內(nèi)。結(jié)論 邁瑞CL-6000I化學(xué)發(fā)光分析儀檢測(cè)系統(tǒng)精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍、生物參考區(qū)間驗(yàn)證通過。滿足臨床診斷與預(yù)后監(jiān)測(cè)的需要。

[關(guān)鍵詞] 化學(xué)發(fā)光;性能驗(yàn)證;甲狀腺激素

[中圖分類號(hào)] R446 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1672-5654（2020）03（a）-0001-03

[Abstract] Objective To verify the performance of Mindray CL-6000I chemiluminescence analyzer detection system. Methods According to the National Clinical Laboratory Standardization Committee（NCCLS） and other relevant documents， the Mindray CL-6000I chemiluminescence immunoassay detection system was used to detect thyroid hormones： triiodothyronine （T3）， tetraiodothyronine （T4）， Free triiodothyronine （FT3）， free tetraiodothyronine （FT4）， and thyroid stimulating hormone （TSH） were tested for precision， accuracy， linear range， and biological reference interval. Results The precision variation coefficient CV% of the five items tested was 1.837%-4.07%， the precision variation coefficient CV% between batches was 2.634%-7.49%， the accuracy comparison bias range was 6.289%-9.62%， and the linear range slope was 0.981 2-1.013， r2 of 0.951 7-0.999 2， all met the requirements of relevant documents; the test results of the samples participating in the biological reference interval verification were within the range marked by the manufacturer. Conclusion Mindray CL-6000I chemiluminescence analyzer detection system precision， accuracy， linear range and biological reference interval have been verified， which meets the needs of clinical diagnosis and prognosis monitoring.

[Key words] Chemiluminescence; Performance verification; Thyroid hormone

在臨床工作中，準(zhǔn)確可靠的檢測(cè)結(jié)果是疾病診斷治療必不可少的依據(jù)，也是健康檢查的一部分，是檢驗(yàn)科工作的核心和基本要求。為了保證檢驗(yàn)質(zhì)量，臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)在正式投入使用前對(duì)檢驗(yàn)儀器及檢驗(yàn)方法進(jìn)行性能驗(yàn)證。各項(xiàng)指標(biāo)在生產(chǎn)廠家所標(biāo)注的范圍或有關(guān)文件要求范圍內(nèi)即為驗(yàn)證合格，才能應(yīng)用于臨床工作[1-2]。該實(shí)驗(yàn)室對(duì)CL-6000I（中國(guó)）化學(xué)發(fā)光分析儀檢測(cè)甲狀腺激素：三碘甲狀腺原氨酸（T3）、四碘甲狀腺原氨酸（T4）、游離三碘甲狀腺原氨酸（FT3）、游離四碘甲狀腺原氨酸（FT4）、促甲狀腺素（TSH）進(jìn)行了性能驗(yàn)證。驗(yàn)證內(nèi)容包括精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍、生物參考區(qū)間[3]，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 ?材料與方法

1.1 ?實(shí)驗(yàn)樣本

選取2018年5—7月西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院長(zhǎng)安區(qū)醫(yī)院就診和健康體檢者不同濃度的新鮮血清樣本。空腹靜脈采血后，靜置待其凝固后3 500 r/min，離心10 min。分離血清，密封-20℃冷凍備用[4]。要求血清外觀清亮，無溶血無黃疸，無脂肪血等。依據(jù)NCCLSEP5-A2文件對(duì)儀器進(jìn)行性能驗(yàn)證。

1.2 ?儀器與試劑

邁瑞CL-6000I化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品和耗材均為儀器配套產(chǎn)品。實(shí)驗(yàn)過程中所有試劑耗材未更換批號(hào)。試劑批號(hào)：T3 2018040121，T4 2018040121，F(xiàn)T3 2018040121，F(xiàn)T4 2018060111，TSH 2018040121;校準(zhǔn)品批號(hào)：T3 2018030100，T4 2018060100， FT3 2018060100，F(xiàn)T4 2018050100，TSH 2018060100，邁瑞復(fù)合質(zhì)控品低值批號(hào)2018060101，復(fù)合質(zhì)控品高值批號(hào)2018020101，發(fā)光底物液，清洗液，反應(yīng)杯均在有效期內(nèi)。

1.3 ?驗(yàn)證方法

1.3.1 精密度驗(yàn)證 ?依據(jù)NCCLS EP5-A2文件對(duì)待驗(yàn)證儀器進(jìn)行精密度驗(yàn)證，選取三碘甲狀腺原氨酸（T3）、四碘甲狀腺原氨酸（T4）、游離三碘甲狀腺原氨酸（FT3）、游離四碘甲狀腺原氨酸（FT4）、促甲狀腺素（TSH）高、低濃度兩個(gè)水平的患者血清樣本在1 d內(nèi)連續(xù)檢測(cè)20次。計(jì)算其均值（x±s），變異系數(shù)（CV%），驗(yàn)證其批內(nèi)精密度[5];利用高值、低值兩個(gè)水平的室內(nèi)質(zhì)控品連續(xù)20 d的質(zhì)控結(jié)果，統(tǒng)計(jì)其均值（x±s）和變異系數(shù)（CV%），驗(yàn)證其批間精密度[6-7]。檢測(cè)的批內(nèi)精密度CV%應(yīng)該≤1/4CLIA88′TEa 允許的總誤差（6.25），批間精密度CV%應(yīng)該≤1/3 CLIA88′TEa（8.25），該檢測(cè)系統(tǒng)精密度即為驗(yàn)證通過[5-6]。

1.3.2 準(zhǔn)確度驗(yàn)證 ?T3、T4、FT3、FT4、TSH每個(gè)項(xiàng)目收集低于生物參考區(qū)間、生物參考區(qū)間內(nèi)和高于生物參考區(qū)間的血清樣本各7份，經(jīng)待驗(yàn)證儀器邁瑞CL-6000I檢測(cè)3次，計(jì)算平均值為A值。與已通過ISO15189認(rèn)證的西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比對(duì)[5-6，8-9]，每個(gè)樣本檢測(cè)3次，計(jì)算其平均值B。計(jì)算公式：相對(duì)偏倚=[（A-B）/B]×100.00%，平均偏倚=21次相對(duì)偏倚絕對(duì)值的和的平均數(shù)。判斷標(biāo)準(zhǔn)為平均偏倚≤1/2CLIA88′TEa（12.50）即為準(zhǔn)確度驗(yàn)證通過[5-6，9]。

1.3.3 線性范圍 ?參照EP6-A2文件選取T3、T4、TSH 低值高值血清各1份[4]。將高值H和低值L按照5H、4H+1L3H+2L、2H+3L、1H+4L、5L的比例配成6份同體積不同濃度的樣本。以預(yù)期值Y為縱坐標(biāo)，每份樣本連續(xù)檢測(cè)3次。計(jì)算其平均值X作為橫坐標(biāo)，將所有結(jié)果數(shù)據(jù)繪制于X-Y坐標(biāo)圖中，計(jì)算回歸方程Y=aX+b，斜率 a在0.97～1.03，并且r2≥0.95，即可判斷為驗(yàn)證通過[5，10]。

1.3.4 生物參考區(qū)間驗(yàn)證 ?參照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[11]進(jìn)行生物參考區(qū)間的小樣本驗(yàn)證，收集男性和女性健康體檢者各10名（年齡在18～60歲之間）血清樣本及時(shí)檢測(cè)，計(jì)算出比率R，R=檢驗(yàn)結(jié)果在廠家提供的生物參考區(qū)間內(nèi)的樣本數(shù)/20，若R≥90%，即為驗(yàn)證通過。

1.4 ?統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)量資料采用（x±s）表示，相關(guān)性檢驗(yàn)采用線性分析和回歸分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 ?結(jié)果

2.1 ?精密度驗(yàn)證結(jié)果

T3、T4、FT3、FT4、TSH共5個(gè)項(xiàng)目，批內(nèi)精密度CV%在1.837%～4.07%，見表1。批間精密度CV%在2.634%～7.49%，見表2。精密度驗(yàn)證符合要求。

2.2 ?準(zhǔn)確度驗(yàn)證

5個(gè)項(xiàng)目共21份樣本，準(zhǔn)確度比對(duì)結(jié)果平均偏倚范圍為6.289%～9.62%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。驗(yàn)證通過。

2.3 ?線性范圍

T3斜率為1.002、T4斜率為0.9812、TSH斜率為1.013。T3 r2為0.999 2、T4r2為0.951 7、TSHr2為0.985 8。驗(yàn)證結(jié)果見表4。驗(yàn)證通過。

2.4 ?生物參考區(qū)間驗(yàn)證

參與該次驗(yàn)證的20份樣本檢測(cè)數(shù)據(jù)見表5，結(jié)果均在廠家提供的生物參考區(qū)間內(nèi)。驗(yàn)證結(jié)果見表6。驗(yàn)證通過。

3 ?討論

精密度是在相同條件下對(duì)同一樣本多次重復(fù)檢測(cè)所得結(jié)果的一致性程度，反映檢測(cè)系統(tǒng)的隨機(jī)誤差，用變異系數(shù)CV%來表示。是實(shí)驗(yàn)方法、儀器、試劑等性能的重要指標(biāo)，也是進(jìn)行性能驗(yàn)證的基礎(chǔ)，該次實(shí)驗(yàn)T3、T4、FT3、 FT4、TSH的批內(nèi)精密度CV%為1.837～4.07%，均<1/4 CLIA′88TEa（6.25%）。批間精密度CV%為2.634～7.49%，<1/3 CLIA88′TEa（8.25%）。該次參與驗(yàn)證的5個(gè)項(xiàng)目，精密度驗(yàn)證全部合格。

準(zhǔn)確度是檢測(cè)結(jié)果與其“真值”之間的差異大小，用“偏倚”表示，反映檢測(cè)系統(tǒng)的系統(tǒng)誤差[6-9]，該次參與驗(yàn)證的5個(gè)項(xiàng)目其平均偏倚范圍為6.289%～9.62%，<1/2 CLIA′88TEa（%）（12.5），準(zhǔn)確度驗(yàn)證合格。在實(shí)際工作中，重復(fù)檢測(cè)樣本的幾率很小，因此分析系統(tǒng)的準(zhǔn)確度非常關(guān)鍵。精密度和準(zhǔn)確度是對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)最基本的性能驗(yàn)證。因?yàn)镕T3和FT4稀釋過后的反應(yīng)不成線性[4]，因此，沒有進(jìn)行二者的線性實(shí)驗(yàn)。

進(jìn)行性能驗(yàn)證，必須保證足夠的在有效期內(nèi)的同一批號(hào)試劑和耗材，實(shí)驗(yàn)過程中忌更換批號(hào)，盡量減少可能引起的誤差。每一瓶新啟用試劑均應(yīng)先做校準(zhǔn)和質(zhì)控，質(zhì)控在控的情況下才能進(jìn)行工作，所有操作均應(yīng)按儀器及試劑說明操作。參與實(shí)驗(yàn)的樣本采集者不應(yīng)服用藥物，特別是內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病患者和孕婦應(yīng)排除。由于孕婦樣本收集要求更嚴(yán)格[12]，短時(shí)間內(nèi)無法收集到足夠的合格樣本，此次未進(jìn)行孕婦生物參考區(qū)間的驗(yàn)證，此工作后續(xù)進(jìn)行。通過該次實(shí)驗(yàn)，邁瑞CL-6000I化學(xué)發(fā)光分析儀檢測(cè)系統(tǒng)在精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍、參考區(qū)間四個(gè)方面達(dá)到相應(yīng)要求，可用于臨床工作。

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（收稿日期：2019-12-03）