家禽胚蛋注射技術(shù)的應(yīng)用研究(綜述)——礦物質(zhì)篇

賈良梁 夏俊花

摘? 要：礦物質(zhì)對(duì)家禽生長(zhǎng)、骨骼發(fā)育和免疫功能調(diào)節(jié)等起著重要的作用，在出殼前給家禽補(bǔ)充礦物質(zhì)，尤其是補(bǔ)充有機(jī)微量元素，將有利于提高它們的健康和生產(chǎn)性能。

關(guān)鍵詞：胚蛋注射技術(shù);電解質(zhì);有機(jī)微量元素;硒

中圖分類號(hào)：S815 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：C 文章編號(hào)：1001-0769（2020）03-0001-03

1? 電解質(zhì)

為了檢測(cè)電解質(zhì)作為商品化生產(chǎn)的家禽入孵種蛋胚胎注射稀釋液的應(yīng)用潛力，McGruder等測(cè)定了多種生理電解質(zhì)溶液的多個(gè)注射劑量和濃度以及一種電解質(zhì)-碳水化合物復(fù)合溶液（Electrolyte-Carbohydrate Complex Solution，ECC）對(duì)肉雞的入孵種蛋胚胎發(fā)育和所孵出雛雞生產(chǎn)性能的影響。他們將不注射的入孵種蛋和僅注射117 mmol生理鹽水的入孵種蛋作為對(duì)照組，將注射一種電解質(zhì)溶液或ECC的入孵種蛋作為試驗(yàn)組。這些電解質(zhì)分別為枸櫞酸三鉀、氯化鉀和磷酸二氫鈉，ECC含有氯化鉀、枸櫞酸三鉀、氯化鎂、醋酸鋅、硫酸銅、枸櫞酸鈉、氯化鈉、葡萄糖和蔗糖。雖然入孵種蛋注射電解質(zhì)或ECC后胚胎的含水量提高了，但在孵化第18天將200 μL含5.0 mmol枸櫞酸鈉或含1∶400亦或1∶800 ECC的溶液注入入孵種蛋胚胎的羊膜腔中，孵化第18天時(shí)胚胎相對(duì)于種蛋的重量（簡(jiǎn)稱“胚胎相對(duì)重”，%）未受到有害的影響;此外，注射200 μL的生理鹽水溶液（含量為117 mmol）、氯化鉀溶液（含量為? ? ? ? ?4.0 mmol～5.5 mmol）或磷酸二氫鈉溶液（含量為0.5 mmol～2.0 mmol）不會(huì)影響入孵種蛋胚胎的發(fā)育或所孵出雛雞的生產(chǎn)性能。雖然注射的200 μL或2 000 μL生理鹽水（含量為117 mmol）可以減少孵化第0天到第18天入孵種蛋的重量損失量，并可提高胚胎的含水量，但是注射200 μL的氯化鉀溶液（含量為5.5 mmol）、枸櫞酸三鈉溶液（含量為5.0 mmol）、磷酸二氫鈉溶液（含量為1.0 mmol）或ECC溶液（濃度為1∶400）? 不會(huì)影響這兩項(xiàng)指標(biāo)。

于孵化第18天給試驗(yàn)組入孵種蛋的胚胎注射含5.5 mmol氯化鉀的ECC 溶液（1∶400）或注射濃度為117 mmol的生理鹽水溶液，所孵出雛雞3日齡和10日齡時(shí)的血漿折射率高于對(duì)照組入孵種蛋所孵出雛雞的，但是注射氯化鉀濃度為5.5 mmol的枸櫞酸三鉀溶液（含量為5.0 mmol）不會(huì)出現(xiàn)上述情況。我們可以斷定，給入孵的肉雞種蛋胚胎單獨(dú)注入200 μL的氯化鉀溶液（濃度為5.5 mmol）或枸櫞酸三鉀溶液（濃度為5.0 mmol）或兩者聯(lián)合注射具有較大的商用價(jià)值。McGruder等進(jìn)一步指出，在進(jìn)行入孵種蛋胚胎注射時(shí)，注射液的劑量應(yīng)小于2 000 μL，這些溶液中的氯化鉀實(shí)際上起到了電解質(zhì)的作用，且該作用優(yōu)于氯化鈉的。

2? 微量元素

硒是一種非金屬必需微量元素，對(duì)家禽的健康具有重要的作用。Lee等給入孵的肉雞種蛋胚胎注射了硒，隨后將所孵出雛雞置于壞死性腸炎感染的試驗(yàn)性環(huán)境下后進(jìn)行攻毒，并檢測(cè)硒的胚胎注射效果。他們將試驗(yàn)種蛋分成不添加硒組、添加10 μg硒組和添加20 μg硒組，在孵化第18天用消毒的注射針和真空注射系統(tǒng)分別將不含、含10 μg亞硒酸鈉或含20 μg亞硒酸鈉的100 μL磷酸鹽緩沖生理鹽水注入入孵種蛋的胚胎羊膜腔內(nèi)，隨后于所孵出雛雞14日齡時(shí)，用巨型艾美耳球蟲（Eimeria maximaoocysts）以及18日齡時(shí)用產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌（Clostridium perfringens）進(jìn)行攻毒，每羽雛雞的巨型艾美尓球蟲和產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌攻毒劑量分別為1.0×104個(gè)孢子化卵囊和1.0×109 CFU。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，由孵化期間注射不含硒的溶液的種蛋所孵出的雛雞和用上述兩種病原體攻毒的雛雞20日齡時(shí)的體重均輕于孵化期間入孵種蛋或雛雞出雛殼后采用其他處理方式處理的雛雞的體重。然而，與孵化期間種蛋胚胎注射不含硒的溶液并在出殼后接受上述兩種病原體攻擊的雛雞相比，孵化期間種蛋胚胎注入20 μg硒可以顯著提高所孵出雛雞的體重。在接受兩種病原體攻毒的雛雞中，孵化期間種蛋胚胎注入10 μg硒可以使雛雞的病變?cè)u(píng)分值明顯小于孵化期間種蛋胚胎注射不含硒的溶液的。此外，10 μg硒組雛雞的血清過氧化氫酶活性以及丙二醛和過氧化物歧化酶的水平下降，20 μg硒組雛雞的血清過氧化物酶活性和丙二醛水平降低。10 μg硒組和20 μg硒組入孵種蛋所孵出的雛雞體內(nèi)的白細(xì)胞介素-8轉(zhuǎn)錄水平、一氧化氮合成酶表達(dá)水平以及血清中抗產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌α-毒素和抗NetB毒素的抗體水平提高，但谷胱甘肽過氧化物酶7的mRNA表達(dá)水平下降。因此，當(dāng)生長(zhǎng)環(huán)境受到壞死性腸炎等致病因子污染時(shí)，雛雞的生長(zhǎng)速度、免疫應(yīng)答水平和抗氧化反應(yīng)水平可以通過在孵化第18天向入孵種蛋胚胎注射硒元素來改善。

在兩篇姐妹論文中，Oliveira等報(bào)道了給羅斯708肉雞的入孵種蛋胚胎注射微量元素鋅、錳和銅后對(duì)種蛋孵化率、所孵出雛雞的生產(chǎn)性能和脛骨特性的影響。研究人員將上述三種微量元素的有機(jī)態(tài)溶于150 μL含有商用稀釋劑的溶液中，隨后用一次可同時(shí)注射56枚種蛋的商用自動(dòng)多蛋注射機(jī)于孵化第17天將注射液注入種蛋胚胎的羊膜腔或肌內(nèi)中。Oliveira等發(fā)現(xiàn)，在孵化的第21.5天，與不注射有機(jī)微量元素的對(duì)照組種蛋相比，注射含最高濃度有機(jī)微量元素（鋅、錳和銅的含量分別為0.544 mg/mL、? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 0.260 mg/mL和0.030 mg/mL）的稀釋液會(huì)降低種蛋的孵化率。然而，由注射最高濃度有機(jī)微量元素的種蛋所孵出雛雞在骨骼灰分含量上要高于僅注射稀釋液的對(duì)照組種蛋所孵出的雛雞以及注射較低濃度（鋅、錳和銅的含量分別為0.544 mg/mL、0.260 mg/mL和0.030 mg/mL）有機(jī)微量元素的種蛋所孵出的雛雞。雖然向入孵種蛋胚胎注射較高濃度的有機(jī)微量元素可能會(huì)對(duì)孵化率產(chǎn)生不利影響，但是這三種有機(jī)微量元素具有增強(qiáng)骨骼礦化的潛在作用。有人建議，注射略低濃度的有機(jī)礦物質(zhì)很有可能會(huì)促進(jìn)種蛋胚胎骨骼的礦化而不會(huì)影響種蛋的孵化率。

在另一篇論文所述的試驗(yàn)中，Oliveira等（2015a）采用相同的肉雞品系和微量元素處理方案，但測(cè)定了等待入舍的時(shí)間（禁飼禁水）對(duì)雛雞生產(chǎn)性能的影響。結(jié)果表明，24 h的等待入舍時(shí)間和營(yíng)養(yǎng)攝入受限會(huì)對(duì)雛雞出殼后前21 d的生產(chǎn)性能產(chǎn)生不良影響：增重和采食量減少，飼料轉(zhuǎn)化率變差。與Oliveira等（2015b）的發(fā)現(xiàn)相似，種蛋入孵時(shí)注射低濃度的或高濃度的有機(jī)微量元素不會(huì)影響所孵出雛雞的生產(chǎn)性能。然而，注射最高濃度有機(jī)微量元素的種蛋所孵出雛雞1日齡時(shí)的骨骼灰分含量高于不注射有機(jī)微量元素而僅注射稀釋液的對(duì)照組種蛋所孵出雛雞的以及注射較低濃度有機(jī)微量元素的種蛋所孵出雛雞的。此外，入孵種蛋胚胎注射最高濃度的有機(jī)微量元素后，所孵出雛雞21日齡時(shí)的骨骼灰分含量高于不注射有機(jī)微量元素的入孵種蛋所孵出的雛雞的。與兩個(gè)對(duì)照組的種蛋所孵出雛雞相比，兩個(gè)有機(jī)微量元素注射組的種蛋所孵出雛雞1日齡時(shí)脛骨中的錳含量更高，且較高濃度有機(jī)微量元素注射組的種蛋所孵出雛雞7日齡時(shí)骨骼中的錳含量高于不注射對(duì)照組的入孵種蛋所孵出雛雞的，21日齡時(shí)骨骼中的鋅含量高于不注射組和稀釋液注射組種蛋所孵出雛雞的。總而言之，研究表明對(duì)入孵種蛋胚胎進(jìn)行的兩種有機(jī)微量元素方法均有利于所孵出雛雞的骨骼礦化作用，但是均不能消除雛雞等待24 h入舍時(shí)禁飼禁水對(duì)其增重和飼料轉(zhuǎn)化率的危害。兩篇系列論文的綜合結(jié)果表明，將3種有機(jī)微量元素作為入孵種蛋胚胎注射方案組成部分對(duì)所孵出肉雞21日齡前的骨骼礦化作用有潛在的功效，但是這些處理可能無法消除雛雞推遲24 h入舍對(duì)隨后生長(zhǎng)性能的不利影響。

原題名：In ovo applications in poultry： a review（英文）

原作者：E. D. Peebles （美國(guó)密西西比州立大學(xué)）