光照、氮素和高鹽脅迫對(duì)雨生紅球藻積累蝦青素的影響研究

陳家宇，李嘉儀，竇勇，*，吳琳，任虹燁，閆永芳，周文禮，于士國(guó)

（1.天津農(nóng)學(xué)院天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津300384；2.天津蘊(yùn)華農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司，天津 301823）

雨生紅球藻（Haematococcus pluvialis）是一種單細(xì)胞微藻，在分類(lèi)學(xué)上隸屬于綠藻門(mén)、綠藻綱、團(tuán)藻目、紅球藻科、紅球藻屬。細(xì)胞寬約 19 μm～51 μm，長(zhǎng)約28 μm～63 μm，生殖方式為單細(xì)胞孢子生殖或合子生殖。雨生紅球藻的生活史呈現(xiàn)多樣性，但主要分為游動(dòng)階段細(xì)胞和不動(dòng)階段細(xì)胞兩種狀態(tài)。游動(dòng)階段細(xì)胞呈卵圓形或橢圓形，細(xì)胞運(yùn)動(dòng)依靠?jī)蓷l頂生、等長(zhǎng)的鞭毛，這一階段的細(xì)胞大多呈綠色，偶爾也呈紅色；不動(dòng)階段細(xì)胞呈圓形，沒(méi)有鞭毛不能運(yùn)動(dòng)，主要呈現(xiàn)紅色，在此階段微藻細(xì)胞開(kāi)始逐漸合成并積累蝦青素。雨生紅球藻細(xì)胞內(nèi)蝦青素含量占到干重的1.5%～10%，因此被公認(rèn)為自然界中生產(chǎn)天然蝦青素的最佳生物[1]。2010年11月11日國(guó)家衛(wèi)生部批準(zhǔn)將雨生紅球藻納入新資源食品目錄，成為少數(shù)幾種獲得國(guó)家認(rèn)可的食品級(jí)微藻。在水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域雨生紅球藻同樣有著廣泛應(yīng)用，由于粒徑適中、營(yíng)養(yǎng)豐富常用作魚(yú)蝦育苗的開(kāi)口餌料。另外雨生紅球藻在生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生堿性物質(zhì)，可以有效中和養(yǎng)殖水體的酸度，起到調(diào)節(jié)水質(zhì)維持環(huán)境健康的作用，因此是水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中最常用的植物性生物餌料之一[2]。

蝦青素（Astaxanthin）是一種脂溶性類(lèi)胡蘿卜素，屬于萜烯類(lèi)不飽和化合物，分子式為C40H52O4。蝦青素最早是從水產(chǎn)動(dòng)物組織、螯蝦外殼及海藻細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，是目前為止在自然界有機(jī)體中發(fā)現(xiàn)的抗氧化能力最強(qiáng)的物質(zhì)，它清除自由基和單線態(tài)氧淬滅的能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于維生素E，比玉米黃質(zhì)、番茄紅素及β-胡蘿卜素等常見(jiàn)抗氧化物質(zhì)的抗氧化能力也要高10倍以上，因此蝦青素具有抑制腫瘤、提高肌體免疫力、清除活性氧和自由基等作用[3-4]。此外蝦青素還有良好的著色效果，可以進(jìn)入生物體并貯存在組織中，使某些動(dòng)物的肌肉和皮膚呈現(xiàn)鮮亮的顏色（如紅鱔魚(yú)、大馬哈魚(yú)等）[5]，我國(guó)農(nóng)業(yè)部318號(hào)文中指定天然蝦青素為水產(chǎn)動(dòng)物唯一著色劑。另外蝦青素在在食品、保健品、藥品、化妝品等領(lǐng)域都有很好的應(yīng)用前景。

本研究利用試驗(yàn)生態(tài)學(xué)方法，探索了光照強(qiáng)度、NaNO3和NaCl濃度對(duì)雨生紅球藻光合作用和積累蝦青素的影響，為雨生紅球藻作為“生物反應(yīng)器”高產(chǎn)蝦青素提供一定的數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

1.1.1 材料與試劑

KOH、甲醇、丙酮（均為分析純）：天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司。

1.1.2 設(shè)備

光照培養(yǎng)箱（KCLP-1000CCFL-CT）：東樂(lè)生命科學(xué)公司；浮游植物分類(lèi)熒光儀（PHYTO-PAM WALZ）：德國(guó)WALZ有限公司；生物顯微鏡（E200）：日本Nikon有限公司；冷凍箱（HYCD-205）：青島海爾有限公司；高壓滅菌鍋（HVE-50）：北京興盛恒創(chuàng)有限公司；超凈工作臺(tái)（SW-CJ-1FD）：上海博訊有限公司；分析天平（TOLEDO PL203）：梅特勒-托利公司。

1.2 試驗(yàn)藻種

雨生紅球藻來(lái)自天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。試驗(yàn)培養(yǎng)雨生紅球藻采用pH 7的BBM培養(yǎng)基[6]。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3.1 對(duì)照組培養(yǎng)條件

將培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期（5×105個(gè)/mL）的雨生紅球藻接種到BBM培養(yǎng)基，光照強(qiáng)度設(shè)置為55 μmol/m2/s，光暗比為 12 h∶12 h，培養(yǎng)溫度為（22±1）℃，每個(gè)試驗(yàn)組設(shè)置3個(gè)平行，每天搖動(dòng)培養(yǎng)瓶6次，防止細(xì)胞附壁或下沉。

1.3.2 光照脅迫培養(yǎng)條件

將培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期（5×105個(gè)/mL）的雨生紅球藻接種到BBM培養(yǎng)基，光照強(qiáng)度設(shè)置5個(gè)梯度，分別為73、127、182、236、291 μmol/m2/s，其它培養(yǎng)條件同 1.3.1。

1.3.3 NaNO3脅迫培養(yǎng)條件

將培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期（5×105個(gè)/mL）的雨生紅球藻接種到不含有NaNO3的BBM培養(yǎng)基，NaNO3濃度設(shè)置 5 個(gè)梯度，分別為 0、0.032、0.065、0.13、0.25 g/L，光照強(qiáng)度設(shè)置為55 μmol/m2/s，其它培養(yǎng)條件同1.3.1。

1.3.4 NaCl脅迫培養(yǎng)條件

將培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期（5×105個(gè)/mL）的雨生紅球藻接種到不含有NaCl的BBM培養(yǎng)基，NaCl濃度設(shè)置5 個(gè)梯度，分別為 0、5、7.5、10、12.5 g/L，光照強(qiáng)度設(shè)置為 55 μmol/m2/s，其它培養(yǎng)條件同 1.3.1。

1.4 測(cè)定指標(biāo)

試驗(yàn)周期為26 d，每2 d取樣測(cè)定雨生紅球藻細(xì)胞的葉綠素?zé)晒鈪?shù)和蝦青素含量。

1.4.1 葉綠素?zé)晒鈪?shù)測(cè)定

利用熒光分析儀（PHYTO-PAM WALZ）測(cè)定葉綠素?zé)晒鈪?shù)，在測(cè)定開(kāi)始前將取得的樣品避光暗處理15 min，然后通過(guò)讀取參數(shù)得出最大光能轉(zhuǎn)化效率（Fv/Fm）、實(shí)際光能轉(zhuǎn)化效率（PSⅡ）、有效光能轉(zhuǎn)化效率值（Yield）。

1.4.2 蝦青素含量測(cè)定

參照李嘉儀等[7]以及韋韜等[8-9]的方法測(cè)定蝦青素含量。取5 mL藻液進(jìn)行離心，棄去上清液，加入5 mL超純水清洗，重復(fù)兩次。然后用5 mL的5%氫氧化鉀+30%甲醇水混合溶液破壞葉綠素5 min，棄去上清液后加5 mL超純水清洗兩次。棄去上清液后將收集到的藻泥中加入2 mL丙酮，用細(xì)胞破碎儀處理10 min，4℃離心15 min（10 000 r/min），保留上清液，重復(fù)以上操作，直至藻團(tuán)呈白色，色素提取完全為止。

蝦青素的含量參照Davies等的采用公式[10]：

蝦青素（mg/L）=4.6×A480ast×稀釋倍數(shù)

1.5 數(shù)據(jù)處理

使用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan’s多重比較檢驗(yàn)處理組均值的差異顯著性，顯著性水平設(shè)定為0.05。利用EXCEL 2016進(jìn)行繪圖。

田力（1965.06.15-），女，漢族，河南人，博士，河南中醫(yī)藥大學(xué)副校長(zhǎng)，研究方向：超聲醫(yī)學(xué)，e-mail：tianli@hactcm.edu.cn。

2 結(jié)果與分析

2.1 光照脅迫對(duì)雨生紅球藻葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響

光照脅迫對(duì)雨生紅球藻葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響見(jiàn)圖1。

圖1 光照強(qiáng)度對(duì)雨生紅球藻熒光參數(shù)的影響Fig.1 Effect of light intensity on fluorescence parameters of Haematococcus pluvialis

隨脅迫時(shí)間延長(zhǎng)，光照脅迫處理組微藻Fv/Fm和Yield參數(shù)均低于對(duì)照組，而對(duì)照組的Fv/Fm值一直維持在0.5～0.6之間。隨著試驗(yàn)的進(jìn)行，雨生紅球藻Fv/Fm值在第4天后出現(xiàn)明顯下降，在第10天后趨于穩(wěn)定，在第26天各試驗(yàn)組微藻Fv/Fm較初始水平下降了8%～37.9%。在第16、18、24和26天光照脅迫處理組的Fv/Fm顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），光照脅迫處理組Fv/Fm在第10天后顯著上升然后逐漸趨于穩(wěn)定，且不同強(qiáng)度的光照脅迫組之間并差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 光照脅迫對(duì)雨生紅球藻積累蝦青素的影響

光照脅迫對(duì)雨生紅球藻積累蝦青素的影響見(jiàn)圖2。

圖2 光照強(qiáng)度對(duì)雨生紅球藻積累蝦青素的影響Fig.2 Effect of light intensity on accumulation of astaxanthin in Haematococcus pluvialis

由圖2可知，在光照脅迫處理下雨生紅球藻胞內(nèi)蝦青素含量逐漸升高，各光照脅迫處理組與對(duì)照組相比均存在顯著差異（P＜0.05）。當(dāng)光照強(qiáng)度較低時(shí)（55 μmol/m2/s～73 μmol/m2/s） 微藻細(xì)胞內(nèi)蝦青素含量較低僅為2.5 mg/L～4 mg/L，而高強(qiáng)度光照能夠促進(jìn)雨生紅球藻積累蝦青素的過(guò)程，光照強(qiáng)度127、182、236 μmol/m2/s條件下雨生紅球藻胞內(nèi)蝦青素水平明顯上升。在試驗(yàn)的第24天光照強(qiáng)度為236 μmol/m2/s的處理組微藻積累蝦青素水平達(dá)到最高值9.01 mg/L，較對(duì)照組提高了55.5%。

2.3 NaNO3脅迫對(duì)雨生紅球藻葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響

NaNO3脅迫對(duì)雨生紅球藻葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響見(jiàn)圖3。

由圖3可知，微藻細(xì)胞Fv/Fm整體呈先上升后逐漸下降的趨勢(shì)，各NaNO3脅迫處理組較對(duì)照組有顯著差異（P＜0.05），無(wú)NaNO3處理組Fv/Fm在第10天達(dá)到最高值。NaNO3濃度為0.13和0.25 g/L時(shí)，雨生紅球藻細(xì)胞的Fv/Fm和Yield與對(duì)照組相比差異并不顯著（P＞0.05）。

圖3 NaNO3濃度對(duì)雨生紅球藻熒光參數(shù)的影響Fig.3 Effect of NaNO3concentration on fluorescence parameters of Haematococcus pluvialis

2.4 NaNO3脅迫對(duì)雨生紅球藻積累蝦青素含量的影響

NaNO3脅迫對(duì)雨生紅球藻積累蝦青素的影響如圖4所示。

由圖4可知，NaNO3濃度為0時(shí)微藻細(xì)胞內(nèi)積累蝦青素的水平顯著高于其他試驗(yàn)組（P＜0.05）。氮缺乏是雨生紅球藻積累蝦青素的主要影響因子之一，但雨生紅球藻細(xì)胞在綠色游動(dòng)階段會(huì)積累一定水平的氮源，當(dāng)細(xì)胞處于缺氮環(huán)境時(shí)會(huì)首先消耗自身儲(chǔ)存的氮源，等氮素全部消耗完畢后才開(kāi)始積累蝦青素。無(wú)NaNO3處理組雨生紅球藻在前14 d積累蝦青素速率較低，第14天到第22天蝦青素合成速率明顯加快，并于第22天達(dá)到峰值5.60 mg/L，此時(shí)微藻胞內(nèi)蝦青素含量較第14天時(shí)增高了34%。

2.5 NaCl脅迫對(duì)雨生紅球藻葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響

圖4 NaNO3濃度對(duì)雨生紅球藻積累蝦青素的影響Fig.4 Effect of NaNO3concentration on accumulation of astaxanthin in Haematococcus pluvialis

由圖5可知，試驗(yàn)期間NaCl脅迫處理的雨生紅球藻細(xì)胞Fv/Fm和Yield基本維持穩(wěn)定，NaCl濃度為10和12.5 g/L時(shí)雨生紅球藻的Fv/Fm和Yield值均低于對(duì)照組，而NaCl濃度為5 g/L時(shí)微藻細(xì)胞Fv/Fm和Yield值均高于對(duì)照組。

2.6 NaCl脅迫對(duì)雨生紅球藻積累蝦青素的影響

NaCl脅迫對(duì)雨生紅球藻積累蝦青素的影響如圖6所示。

由圖6可知，在NaCl脅迫處理下雨生紅球藻細(xì)胞內(nèi)蝦青素含量呈先逐漸升高后趨于穩(wěn)定的變化趨勢(shì)，其中5、7.5、10 g/L濃度組胞內(nèi)蝦青素含量與對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.05），12.5 g/L濃度組與對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05）。從試驗(yàn)第12天后7.5 g/L濃度組微藻細(xì)胞積累蝦青素水平顯著高其它試驗(yàn)組（P＜0.05），在第24天微藻細(xì)胞內(nèi)積累蝦青素含量達(dá)到峰值，較其它試驗(yàn)組提高了13%～45%。當(dāng)5、7.5、10 g/L濃度組時(shí)雨生紅球藻積累蝦青素的水平顯著高于12.5g/L濃度組（P＜0.05）。

圖5 NaCl濃度對(duì)雨生紅球藻熒光參數(shù)的影響Fig.5 Effect of NaCl concentration on fluorescence parameters of Haematococcus pluvialis

圖6 NaCl濃度對(duì)雨生紅球藻積累蝦青素的影響Fig.6 Effect of NaCl concentration on accumulation of astaxanthin in Haematococcus pluvialis

3 討論

3.1 光照脅迫對(duì)雨生紅球藻熒光參數(shù)和積累蝦青素的影響

微藻細(xì)胞葉綠素?zé)晒鈪?shù)主要受PSⅡ光合反應(yīng)中心結(jié)合的醌受體QA的氧化還原狀態(tài)以及光合電子傳遞過(guò)程中產(chǎn)生的熱耗散控制[11]。Hernando等研究表明高強(qiáng)度的光照會(huì)抑制微藻細(xì)胞PSⅡ光合反應(yīng)中心的活性，當(dāng)超出PSII自我修復(fù)的能力時(shí)，藻細(xì)胞會(huì)受到明顯的傷害[12]。

雨生紅球藻的生長(zhǎng)、繁殖與蝦青素的積累與光照強(qiáng)度關(guān)系密切。在適宜的光強(qiáng)范圍內(nèi)，光照強(qiáng)度提高可促進(jìn)雨生紅球藻的光合作用，加強(qiáng)藻細(xì)胞生理代謝和物質(zhì)合成，但當(dāng)光照強(qiáng)度超過(guò)雨生紅球藻的承受能力，微藻光合作用將受到抑制[13]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在第24天，光照強(qiáng)度為236 μmol/m2/s的處理組藻細(xì)胞內(nèi)蝦青素水平最高達(dá)9.01 mg/L，且顯著高于其它試驗(yàn)組（P＜0.05），但是當(dāng)光照強(qiáng)度達(dá)到291 μmol/m2/s時(shí)微藻細(xì)胞內(nèi)蝦青素的積累量下降，僅為7.91 mg/L。有發(fā)現(xiàn)在光照強(qiáng)度為 50 μmol/m2/s～240 μmol/m2/s時(shí)，雨生紅球藻細(xì)胞中的蝦青素含量隨著光照強(qiáng)度增強(qiáng)而上升，與本研究的結(jié)論一致。才金玲等[14]認(rèn)為高光強(qiáng)使雨生紅球藻光合作用和含氮化合物的生物合成減弱，微藻細(xì)胞出現(xiàn)脅迫應(yīng)激，細(xì)胞內(nèi)與蝦青素合成相關(guān)的基因被激活，微藻開(kāi)始合成并積累蝦青素，而蝦青素具有保護(hù)細(xì)胞免受脅迫傷害的作用[15]。

3.2 NaNO3脅迫對(duì)雨生紅球藻熒光參數(shù)和積累蝦青素的影響

氮是微藻不可或缺元素，氮缺乏會(huì)影響微藻的生長(zhǎng)繁殖，干擾葉綠素、蛋白質(zhì)及核酸等大分子的生物合成，并削弱光合反應(yīng)速率和水平[16-17]。Marin等[18]發(fā)現(xiàn)氮脅迫使杜氏鹽藻的Fv/Fm水平下降，與本研究的結(jié)果一致。在氮脅迫初期雨生紅球藻葉綠素?zé)晒鈪?shù)均有不同程度變化，說(shuō)明微藻受到缺氮脅迫時(shí)光化學(xué)活性會(huì)瞬時(shí)升高，脅迫時(shí)間延長(zhǎng)藻細(xì)胞因?yàn)榈厝狈ζ涔夂献饔檬艿揭种?，葉綠素?zé)晒鈪?shù)逐漸恢復(fù)穩(wěn)定。

低氮脅迫可誘導(dǎo)雨生紅球藻細(xì)胞啟動(dòng)合成蝦青素的保護(hù)機(jī)制。Borowitzka等[19]、鄒寧等[20]研究均發(fā)現(xiàn)當(dāng)?shù)卦诘蜐舛认戮煽焖倜{迫雨生紅球藻積累蝦青素。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)隨著培養(yǎng)環(huán)境中氮素含量的減少，雨生紅球藻積累蝦青素的水平明顯提高，缺氮可促進(jìn)微藻內(nèi)蝦青素的合成，當(dāng)培養(yǎng)基氮源濃度為0時(shí)，經(jīng)過(guò)22 d培養(yǎng)雨生紅球藻細(xì)胞中的蝦青素含量達(dá)到峰值。莊惠如等[21]、楊瑾等[22]研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)雨生紅球藻培養(yǎng)基中氮元素的濃度減少一半時(shí)有利于蝦青素積累，且微藻細(xì)胞內(nèi)的蝦青素水平與氮濃度呈反比，這與本研究的結(jié)論一致。

3.3 NaCl脅迫對(duì)雨生紅球藻熒光參數(shù)和積累蝦青素的影響

細(xì)胞葉綠素?zé)晒鈪?shù)的變化可在一定程度反映環(huán)境因子對(duì)微藻的影響。有研究表明在適宜的環(huán)境條件下Fv/Fm趨于穩(wěn)定，當(dāng)微藻細(xì)胞受到高鹽脅迫處理后該值明顯下降[23]，本研究中高鹽脅迫下NaCl濃度為10、12.5 g/L，雨生紅球藻細(xì)胞的Fv/Fm均低于對(duì)照組的結(jié)果正印證了這一點(diǎn)。高鹽脅迫抑制藻類(lèi)光合作用的影響機(jī)制主要表現(xiàn)在PSⅡ受到氧化損傷[24]以及轉(zhuǎn)換態(tài)轉(zhuǎn)換而引起的損傷[25]。

高鹽脅迫是誘導(dǎo)雨生紅球藻合成蝦青素常用方法，探究適宜鹽濃度范圍對(duì)雨生紅球藻高效合成蝦青素有重要的實(shí)踐意義[26]。雖然高鹽脅迫對(duì)雨生紅球藻細(xì)胞的生長(zhǎng)存在抑制，但能促進(jìn)雨生紅球藻綠色細(xì)胞快速轉(zhuǎn)變?yōu)榧t色孢子狀并累積蝦青素。本研究發(fā)現(xiàn)高鹽脅迫處理促進(jìn)雨生紅球藻細(xì)胞積累蝦青素，在試驗(yàn)第22天試驗(yàn)組微藻細(xì)胞積累蝦青素水平達(dá)到峰值并趨于穩(wěn)定，第24天高鹽脅迫使雨生紅球藻細(xì)胞全部由綠色游動(dòng)階段轉(zhuǎn)變?yōu)榧t色不動(dòng)孢子，與Huang的研究結(jié)果一致。Huang等[27]的研究發(fā)現(xiàn)濃度低于10 g/L的NaCl能誘導(dǎo)雨生紅球藻快速積累蝦青素。Boussiba等[28]的研究表明當(dāng)培養(yǎng)環(huán)境中的NaCl濃度增加3倍時(shí)，雨生紅球藻合成蝦青素的速率明顯上升。然而高鹽脅迫促進(jìn)雨生紅球藻合成蝦青素的具體調(diào)控機(jī)制制目前尚不清楚，有待進(jìn)一步探究。

4 結(jié)論

1）光照脅迫處理組微藻Fv/Fm和Yield參數(shù)均低于對(duì)照組。在光照脅迫處理下雨生紅球藻胞內(nèi)蝦青素含量逐漸升高，各光照脅迫處理組與對(duì)照組相比均存在顯著差異（P＜0.05）。高強(qiáng)度光照能夠促進(jìn)雨生紅球藻積累蝦青素的過(guò)程，在試驗(yàn)的第24天光強(qiáng)為236 μmol/m2/s的處理組微藻積累蝦青素水平達(dá)到最高值9.01 mg/L，較對(duì)照組提高了55.5%。

2）NaNO3脅迫處理使雨生紅球藻細(xì)胞Fv/Fm整體呈先上升后逐漸下降的趨勢(shì)，各NaNO3脅迫處理組較對(duì)照組有顯著差異（P＜0.05）。NaNO3濃度為0 g/L時(shí)微藻細(xì)胞內(nèi)積累蝦青素的水平顯著高于其他試驗(yàn)組（P＜0.05）。無(wú)NaNO3處理組雨生紅球藻在前14 d積累蝦青素速率較低，第14天到第22天蝦青素合成速率明顯加快，并于第22天達(dá)到峰值5.60 mg/L。

3）NaCl脅迫處理下的雨生紅球藻細(xì)胞Fv/Fm和Yield基本維持穩(wěn)定。在NaCl脅迫處理下雨生紅球藻細(xì)胞內(nèi)蝦青素含量呈先逐漸升高后趨于穩(wěn)定的變化趨勢(shì)，其中5、7.5、10 g/L濃度組胞內(nèi)蝦青素含量與對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.05），12.5 g/L濃度組與對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05）。從試驗(yàn)第12天后7.5 g/L濃度組微藻細(xì)胞積累蝦青素水平顯著高其它試驗(yàn)組（P＜0.05），在第24天微藻細(xì)胞內(nèi)積累蝦青素含量達(dá)到峰值。