烏蘭溫都蘇-10 活血膠囊丹參酮提取工藝研究

韓風雨通訊作者，王亞輝，于秀玲，孟令江，上官同強

（1.內蒙古天奇中蒙制藥股份有限公司，內蒙古 赤峰 024000；2.內蒙古博奧蒙中藥工程研究院有限公司，內蒙古 赤峰 024000）

0 引言

烏蘭溫都蘇-10 活血膠囊具有活血化淤，通絡止痛之功效，是蒙醫(yī)臨床使用多年的驗方[1]。臨床用于治療冠心病，心絞痛。將冠心活血湯散劑改革為烏蘭溫都蘇-10 活血膠囊，具有提高藥物穩(wěn)定性、起效快的特點。研發(fā)該品種對推動蒙醫(yī)藥的現(xiàn)代化發(fā)展和提高蒙藥的質量可控性具有一定的意義。烏蘭溫都蘇-10 活血膠囊主要由丹參、檀香、降香、山柰等十味蒙藥材組成，丹參為處方中主藥。該藥所含藥材味數(shù)多，成分較復雜。現(xiàn)代研究表明丹參酮ⅡA 在治療冠心病、修復心肌、調節(jié)微循環(huán)等方面都具有重要的應用價值，本文重點就丹參中丹參酮提取進行研究，采用醇提方法對丹參酮進行單獨提取，并通過正交試驗確定提取工藝最優(yōu)參數(shù)[2]。

1 儀器與試藥

美國Thermo Fisher U3000 高效液相色譜儀；瑞士梅特勒MS105DU 電子天平（十萬分之一）等。

甲醇（VBS 公司，批號934002），娃哈哈純凈水（杭州娃哈哈集團有限公司），其他試劑均為分析純。

丹參酮ⅡA（批號：110766-201721），購于中國食品藥品檢定研究院。檢定樣品來源于內蒙古天奇中蒙制藥股份有限公司。

2 方法與結果

2.1 正交設計優(yōu)化丹參酮醇提工藝。根據文獻資料確定考察因素為：醇濃度、加液量、回餾時間和回餾次數(shù)，各因素確定三個水平，詳見表1。

表1 烏蘭溫都蘇-10 活血膠囊丹參酮提取工藝考察因素及水平

實驗方法。取樣品9 份，每份精密稱取丹參300 g，按照正交試驗L9（34）表的條件安排試驗，提取完成后，回收乙醇，濃縮，定容至1000 mL 容量瓶中，得9 份提取液樣品。各樣品液搖勻，各取1 mL，分別置三角瓶中蒸干，加入甲醇50 mL，回流1h，過濾，定容，備用。

2.2 丹參酮ⅡA 的含量測定。精密稱取丹參酮ⅡA（批號：110766-201721）2.04 mg 于10 mL 容量瓶中，精密吸取2 mL，用甲醇定容至25 mL，備用。將上述提取的9 份樣品液，用微孔濾膜過濾，棄去初濾液，收集續(xù)濾液于EP 管中，進樣10μl，以甲醇/水=75：25 為流動相，氣體壓力3.0 kpa，檢測器溫度70℃，測定丹參酮ⅡA 的含量，結果見表2。

表2 9 份樣品所含丹參酮ⅡA 實驗結果

2.3 數(shù)理統(tǒng)計得出結果。將表2 中含量測定結果，經數(shù)理統(tǒng)計學處理，結果見表3。

表3 L9（34）正交實驗設計表及實驗結果

從表中數(shù)據可以看出，各因素的影響規(guī)律為：B＞D＞C＞A，最佳工藝條件為A3B3C3D3。即90%的乙醇溶液，10 倍加液量，回流提取2.5h，提取3 次。將表3 數(shù)據經統(tǒng)計學處理后進行方差分析，結果見表4。

方差分析結果表明：B 因素水平之間具有顯著性的差異，A、C、D 因素水平之間無顯著性的差異。

結合直觀分析結果和方差分析結果，冠心活血膠囊中丹參醇提最佳工藝條件為：A3B3C3D3，即藥材每次加入10 倍量的90%乙醇，回流提取2.5 小時，提取3 次。

表4 方差分析表

3 討論

本實驗采用HPLC 法測定經過正交試驗后丹參中丹參酮ⅡA 的含量，能夠綜合評價最終提取工藝的好壞[3]。該提取方法簡便，可用于烏蘭溫都蘇-10 活血膠囊的提取工藝中對丹參酮的提取，并為生產烏蘭溫都蘇-10 活血膠囊提供質量保證和依據。