特香型白酒中甲醇和丙酸乙酯同時檢測的研究

彭思妮，熊秋萍，羅 莉，熊自琦

（四特酒有限責任公司，江西樟樹 331200）

特香型白酒是以大米為主要原料，以面粉、麥麩和酒糟培制的大曲為糖化發(fā)酵劑，經(jīng)紅褚條石窖池固態(tài)發(fā)酵，固態(tài)蒸餾、陳釀、勾調(diào)而成的白酒[1]。特香型白酒獨具特色，享譽全國，由中國白酒泰斗周恒剛先生親自領(lǐng)導(dǎo)的專家組定義為“特香型”，是我國十二大典型香型之一的白酒。

根據(jù)國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局和國家標準化管理委員會發(fā)布的國標GB/T 20823—2017《特香型白酒》要求，明確對不同酒精度、不同級別的特香型白酒中丙酸乙酯的含量作出具體要求，由此可見，丙酸乙酯檢測在特香型白酒中是必備的檢測項。同時甲醇作為安全性指標，由衛(wèi)生部發(fā)布的國標GB 2757—2012《食品安全國家標準蒸餾酒及其配制酒》求，對甲醇含量也做出了明確的限量規(guī)定，因特香型白酒是糧食發(fā)酵類白酒，發(fā)酵過程中不可避免的產(chǎn)生甲醇，甲醇是一種強烈的神經(jīng)和血管性有毒物質(zhì)，可直接影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)[2]。特香型白酒每年銷售額幾十億，質(zhì)量問題關(guān)乎重大，故甲醇也是必檢項目。

根據(jù)國家衛(wèi)生和計劃生育委員會和國家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布的GB 5009.266—2016《食品安全國家標準 食品中甲醇的測定》，使用聚乙二醇毛細柱，用叔戊醇作為內(nèi)標物，用氣相色譜儀FID 檢測器能夠?qū)Π拙浦械募状歼M行準確的定性定量檢測，根據(jù)國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局和國家標準化管理委員會發(fā)布的GB/T 10345—2007 中丙酸乙酯的檢測，用LZP930 白酒專用柱，乙酸正戊酯或乙酸正丁酯為內(nèi)標，用氣相色譜儀FID 檢測器能夠單獨對丙酸乙酯進行檢測，兩種物質(zhì)都可以單獨檢測，但如果將兩種物質(zhì)同時進行檢測，將節(jié)約大量人力和物力，同時檢測這兩種物質(zhì)的研究，目前未見文獻報道。本研究使用氣相色譜儀，尋求甲醇和丙酸乙酯同時檢測的方法。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

酒樣：特香型白酒，45%vol四特酒。

試劑及耗材：無水乙醇，色譜純（西隴科學(xué)）；標準品，甲醇（99.9%）、叔戊醇（100.0%）、乙酸正戊酯(99.7%）、丙酸乙酯（99.8%）（西格瑪）。

儀器設(shè)備：氣相色譜儀，配FID 檢測器，自動進樣器（安捷倫GC7820）；色譜柱，聚乙二醇毛細柱（CNW，CD-WAX：30 m×0.32 mm×1.0 μm），LZP930 白酒專用柱（中科安泰LZP930.2，30 m×320 μm×0.5 μm），聚硅氧烷毛細管色譜柱（安捷倫DB-624UI，30 m×0.53 mm×3 μm）；分析天平，梅特勒AL204，精確至0.0001 g。

1.2 實驗方法

1.2.1 標準溶液配制

乙醇溶液（60%）：量取300 mL 無水乙醇，用水定容至500 mL，混勻。

甲醇溶液：稱取0.1 g 甲醇至100 mL 容量瓶中,用乙醇溶液定容至刻度,混勻為1 g/L甲醇溶液。

丙酸乙酯溶液：稱取0.1 g 丙酸乙酯至100 mL容量瓶中,用乙醇溶液定容至刻度,混勻為1 g/L 丙酸乙酯溶液。

叔戊醇溶液：稱取2 g 叔戊醇至100 mL 容量瓶中,用乙醇溶液定容至刻度,混勻為叔戊醇內(nèi)標溶液。

乙酸正戊酯溶液：稱取2 g乙酸正戊酯至100 mL容量瓶中,用乙醇溶液定容至刻度,混勻為乙酸正戊酯內(nèi)標溶液。

甲醇、丙酸乙酯混合溶液：稱取甲醇和丙酸乙酯各0.1 g 至100 mL 容量瓶中,用乙醇溶液定容至刻度,混勻為甲醇、丙酸乙酯混合液。

叔戊醇、乙酸正戊酯混合溶液：稱取叔戊醇和乙酸正戊酯各2 g 至100 mL 容量瓶中，用乙醇溶液定容至刻度,混勻為叔戊醇、乙酸正戊酯內(nèi)標混合溶液。

1.2.2 測試

將甲醇溶液稀釋10倍定容至10 mL容量瓶中，加100 μL 叔戊醇內(nèi)標溶液混勻；將丙酸乙酯溶液稀釋10 倍定容至10 mL 容量瓶中，加100 μL 乙酸正戊酯內(nèi)標溶液混勻。分別用不同色譜柱單獨測試。

1.2.3 驗證性試驗

選定能同時檢測甲醇、叔戊醇、丙酸乙酯及乙酸正戊酯的柱子，取甲醇、丙酸乙酯混合溶液10 mL，加100 μL 乙酸正戊酯和叔戊醇內(nèi)標混合溶液混勻進樣，并且使用特香型白酒進行驗證性試驗。

2 結(jié)果與分析

2.1 柱子選擇結(jié)果分析

CD-WAX柱子：使用廠家推薦色譜條件：檢測器250 ℃、進樣口230 ℃、分流比60∶1、流速1.5 mL/min、程序升溫35 ℃（5min）→（3 ℃/min）62 ℃（4 min）→（3.5 ℃/min）200 ℃（10 min），甲醇、叔戊醇、乙酸正戊酯峰能分離出，峰形較好，但丙酸乙酯峰無法分離出。

LZP930.2柱子：使用廠家推薦色譜條件：檢測器230 ℃、進樣口200 ℃、分流比40∶1、流速1 mL/min、程序升溫35 ℃（5min）→（5 ℃/min）55 ℃（4 min）→（10 ℃/min）200 ℃（10 min），甲醇、叔戊醇、乙酸正戊酯峰能分離出，峰形較好，丙酸乙酯峰也能分離出，但緊跟在乙醇峰后，由于白酒中乙醇含量高造成乙醇峰拖尾，導(dǎo)致丙酸乙酯峰分離度不好，小于1.0。

DB-624UI 柱子：使用廠家推薦色譜條件：檢測器230 ℃、進樣口220 ℃、分流比60∶1、流速2 mL/min、程序升溫35 ℃（8 min）→（10 ℃/min）160 ℃（5 min）→（10 ℃/min）200 ℃（10 min），甲醇、叔戊醇、乙酸正戊酯峰、丙酸乙酯全部能分離出，且分離度高，峰形較好，見圖1。

2.2 使用特香型白酒驗證結(jié)果分析

由GB/T 20823《特香型白酒》可知，特香型白酒中丙酸乙酯含量不高，最低含量為10 mg/L，含量較低，故選擇分離度較好的DB-624UI 柱子。取45%vol四特酒10 mL，加入100 μL 乙酸正戊酯和叔戊醇內(nèi)標混合溶液混勻進樣1 μL，使用2.1 中相同色譜條件，分離出的譜圖見圖2。

表1 加標回收試驗結(jié)果

表2 精密度試驗結(jié)果

由圖2 對比圖1 可知，特香型白酒中甲醇、叔戊醇、丙酸乙酯及乙酸正戊酯4 個峰能夠使用DB-624UI 柱子進行有效的分離，為確定峰性質(zhì)，以45%vol 四特酒為本底，對甲醇和丙酸乙酯進行了加標回收試驗，結(jié)果見表1，譜圖見圖3，由圖3 可知，甲醇峰和丙酸乙酯峰明顯增大。為驗證在其他樣品中的效果，同時使用其他不同樣品進行了精密度重復(fù)試驗，結(jié)果見表2。加標回收率結(jié)果都在優(yōu)秀范圍內(nèi)，RSD 值都小于5%，由此可見，結(jié)果準確可靠。眾所周知，白酒中呈香呈味物質(zhì)豐富，酸類、酯類、醛類、醇類等物質(zhì)多達上百種，含量較低且化學(xué)性質(zhì)較類似的組分之間分離較難，丙酸乙酯就屬于此類物質(zhì)。本研究的成果應(yīng)用于特香型白酒中甲醇和丙酸乙酯的檢測，效果顯著，不但分離效果好，同時準確度和精密度均達到要求，有效利用儀器并節(jié)約大量人力物力。