亞低溫聯(lián)合促紅細胞生成素檢測對缺氧缺血性腦病新生兒血清炎性因子和腦組織損傷標志物的影響

楊昭君，朱法榮

新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)是患兒在圍生期窒息引起的腦組織部分或完全缺氧、腦血流減少或暫停，導致的患兒腦部受損，該病易引起患兒出現(xiàn)各種神經系統(tǒng)疾病甚至死亡[1]。據(jù)報道，全球新生兒HIE發(fā)生率為0.1%～0.3%，占新生兒死亡的22%[2]；我國新生兒HIE發(fā)生率為0.3%～0.6%，高于全球發(fā)病水平，死亡率為15%～20%，而25%～30%存活患兒伴有腦癱、智力低下、癲癇等疾病[3]。因此，有效控制HIE患兒死亡及預防后遺癥發(fā)生是HIE治療的關鍵。高壓氧治療和亞低溫治療是臨床常用的兩種物理治療方法，但是高壓氧壓力和時間等指標若控制不當，則可能對患兒的視網膜發(fā)育造成損害[4]。亞低溫治療對新生兒HIE是一種安全有效的方法，但仍有40%以上接受亞低溫治療的新生兒發(fā)生中度或重度神經功能缺損甚至死亡，尚需更深入的研究來提高亞低溫治療新生兒HIE的臨床療效[5-6]。促紅細胞生成素(EPO)是一種影響紅細胞生成的細胞因子，能夠促進血管生成，對腦損傷神經具有一定的保護作用，可促進神經發(fā)育，但臨床上關于亞低溫聯(lián)合EPO對新生兒HIE療效、血清炎性因子及腦組織損傷標志物影響的研究較少。本研究觀察亞低溫治療聯(lián)合EPO對新生兒HIE的臨床療效、細胞因子和腦組織損傷指標的影響，為臨床治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2014年1月—2017年1月收治的新生兒HIE 136例，按照隨機數(shù)字表法分為觀察組(68例)和對照組(68例)。納入標準：所有患兒均符合2005年中華醫(yī)學會兒科學會新生兒組修訂的新生兒HIE診斷標準[7]；胎齡≥35周，且出生體重≥2 kg；出生后6 h內，存在神經性腦病的臨床表現(xiàn)；患兒家屬知情同意。排除標準：嚴重顱內出血或顱骨骨折者；先天性異常或遺傳代謝性疾病者；嚴重感染性疾病者；母親具有吸毒史者；放棄治療者。兩組患兒的胎齡、性別、出生體重、Apgar評分、臨床分度和分娩方式等方面比較，差異無統(tǒng)計學意義 (P>0.05)。

1.2 方法 對照組患兒在常規(guī)治療的基礎上，給予亞低溫治療；觀察組給予亞低溫聯(lián)合EPO治療?；純撼錾? h內，應用德國Allon體溫調節(jié)系統(tǒng)進行亞低溫治療，給患兒放置低溫墊，根據(jù)患兒體溫設定初始溫度，每10 min測定1次肛溫，使患兒肛溫在1 h內達到(33.5±0.5)℃，維持72 h后自然復溫，如果6 h后患兒體溫仍未恢復至36 ℃，則用遠紅外輻射進行復溫。EPO治療，每次300 U/ kg，2 d 1次，連續(xù)治療6次，首次采用皮下注射，以后改為靜脈注射。

1.3 樣本采集及檢測 在治療前后，分別采集患兒靜脈血5 mL，按照3 000 r/min速度離心10 min，吸取上清液，檢測細胞因子血清炎性因子白介素-10(IL-10)、白介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和腦組織損傷指標血清S100β蛋白、髓鞘堿性蛋白(MBP)、神經元特異性烯醇化酶(NSE)水平的變化情況。血清IL-6、IL-10、TNF-α、NSE、MBP和S100β蛋白水平采用Elisa法，檢測所有指標嚴格按照相應試劑盒說明書進行操作。

1.4 療效評定標準[8]根據(jù)患兒治療后癥狀、體征及神經評分法(NBNA)評分評定。 顯效：治療后神經系統(tǒng)癥狀及相關體征完全消失，NBNA評分≥35分；有效：治療后臨床癥狀及體征有所改善，NBNA評分≥30分；無效：治療后臨床癥狀體征未改善或者加重，NBNA評分<30分。

1.5 不良反應 觀察兩組患兒治療期間不良反應情況。

2 結 果

2.1 兩組臨床療效比較 治療后觀察組臨床療效高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=4.755，P=0.029)。詳見表1。

表1 兩組臨床療效比較 單位： 例(%)

2.2 兩組血清炎性因子水平比較 治療前，兩組血清IL-6、IL-10和TNF-α水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。治療后，兩組血清IL-6、IL-10和TNF-α水平較治療前均明顯下降(P<0.05)，而且觀察組血清IL-6、IL-10和TNF-α水平明顯低于對照組(P<0.05)。詳見表2。

表2 兩組血清炎性因子水平比較(±s)

2.3 兩組腦組織損傷指標比較 治療前，兩組血清NSE、MBP和S100β水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。治療后，兩組血清NSE、MBP和S100β水平較治療前均明顯下降(P<0.05)，而且觀察組血清NSE、MBP和S100β水平明顯低于對照組(P<0.05)。詳見表3。

表3 兩組腦組織損傷指標比較(±s)

2.4 兩組不良反應 兩組患兒治療期間未見明顯的不良反應。

3 討 論

HIE發(fā)病機制較為復雜，具體機制尚不明確，但有研究認為該病的發(fā)生與急性炎癥反應密切相關，并且受到多種細胞因子、神經調節(jié)物質的影響，引起患兒腦組織病理性損害[9]。當缺血性損傷發(fā)生時，機體釋放多種細胞因子和趨化因子，引起炎癥反應，造成炎性因子向腦損傷部位遷移，進一步加劇神經元細胞損傷。

在HIE早期或急性期，血清IL-10水平會升高。IL-10作為抗炎性因子，能抑制小膠質細胞和白細胞分泌TNF-α等細胞因子，并能抑制白細胞聚集和趨化因子產生，降低缺血后大腦遲發(fā)性損傷[10]。腦損傷早期TNF-α水平迅速上升，引起血腦屏障損傷或開放，誘發(fā)IL-6等細胞因子釋放，加速炎癥反應，導致腦細胞凋亡，從而加重腦損傷[11]。NSE是一種糖酵解酶，存在于神經元、神經內分泌細胞和少突膠質細胞內，當患兒發(fā)生缺氧缺血性腦損傷時，引起腦部能量明顯降低和各種不良神經反應，導致神經元壞死及神經末梢崩解，細胞質中NSE進入血液和腦脊液中，使得NSE大量釋放[12-13]。MBP作為一種堿性蛋白主要存在于少突神經膠質和髓鞘組織，正常情況下血清含量很少，當腦組織缺氧缺血累及髓鞘時，引起髓鞘堿性蛋白釋放入腦脊液中；血腦屏障破壞或通透性發(fā)生改變，引起血清MBP水平大幅升高[14]。S100β蛋白由兩個β單位組成的二聚體，主要存在星形膠質細胞和神經膜細胞中，由于血-腦屏障的作用，血液中S100β蛋白水平極低，當腦組織受到損傷時，血-腦屏障被破壞，腦脊液中S100β蛋白進入血液循環(huán)，致使血液中S100β蛋白水平上升[15-16]。

本研究發(fā)現(xiàn)，治療后觀察組臨床有效率明顯高于對照組(88.24% 與73.53%，P<0.05)；兩組血清IL-6、IL-10、TNF-α、NSE、MBP和S100β水平明顯低于治療前(P<0.05)；觀察組血清IL-6、IL-10、TNF-α、NSE、MBP和S100β水平明顯低于對照組(P<0.05)，說明亞低溫聯(lián)合促紅細胞生成素通過抑制HIE患兒的炎癥反應，降低腦組織損傷，提高臨床療效。這是由于患兒體溫每降低1 ℃，腦部代謝率便可降低6.7%，當患兒體溫降到33 ℃左右時，腦細胞耗氧量便可降低約33.33%，從而有效地減少機體腦細胞能量耗損，抑制氧化應激反應，減少氧自由基生成，減輕腦組織缺氧缺血狀態(tài)，延緩神經細胞凋亡的發(fā)生，并抑制IL-6、IL-10、TNF-α等炎性因子的釋放，緩解炎性損傷，保護神經細胞的功能[17]。EPO作為一種糖蛋白，可通過受損的血-腦屏障改善神經元的損傷，并通過刺激腦血流自主調節(jié)作用，增加腦內谷胱甘肽過氧化物酶的活性來抑制腦神經細胞氧化應激的損害，從而減少腦組織炎癥細胞的聚集，發(fā)揮抗炎癥反應；同時還可抑制谷氨酸介導的神經毒性作用，抑制炎癥反應降低水腫性腦損傷；EPO能直接調節(jié)神經元祖細胞和干細胞的增殖與分化，促進神經祖細胞的產生，增加神經前體細胞生成，發(fā)揮對神經元和神經膠質細胞再生和修復的作用[18-20]。

綜上所述，亞低溫聯(lián)合EPO治療HIE患兒的效果優(yōu)于亞低溫單獨應用。但本研究仍存在一定的局限性，研究樣本量較少，未觀察治療后不同時間點HIE患兒細胞因子和腦組織損傷標志物的變化情況及腦脊液中的水平。因此，尚需在以后的研究中進一步完善。