全自動(dòng)血細(xì)胞形態(tài)學(xué)識(shí)別系統(tǒng)在惡性血液系統(tǒng)疾病外周血涂片分析中的應(yīng)用評(píng)價(jià)

(祥符區(qū)中醫(yī)院，河南 開(kāi)封 475000)

隨著免疫細(xì)胞學(xué)一級(jí)遺傳學(xué)的發(fā)展，分子生物學(xué)改變了我國(guó)現(xiàn)代醫(yī)療技術(shù)，通過(guò)血液檢查可診斷相關(guān)血液系統(tǒng)疾病。但血液系統(tǒng)及血液分析儀的檢測(cè)準(zhǔn)確度不高，一些樣本依舊需要借助人工顯微鏡。DM96是一種全自動(dòng)血細(xì)胞形態(tài)分析儀器，通過(guò)油鏡觀察血涂片，拍攝涂片中白細(xì)胞的數(shù)碼影像，隨后對(duì)顯示屏的分離結(jié)果進(jìn)行分析即可獲取結(jié)果[1]。本次選取517例血樣探討DM96系統(tǒng)的應(yīng)用價(jià)值，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 樣本來(lái)源

選取祥符區(qū)中醫(yī)院2018年1～11月間的517例惡性血液系統(tǒng)疾病患者樣本。男247例，年齡23～57歲，平均(21.2±62.6)歲；女270例，年齡17～59歲，平均(19.7±67.2)歲；白血病219例，骨質(zhì)增生綜合征157例，骨髓性腫瘤141例。

1.2 儀器與試劑

DM96全自動(dòng)血細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析儀(瑞典 CellaVision AB 公司，軟件版本3.2.1)，SYSMEXSP1000i推染機(jī)(日本SYSMEX公司)，OLYMPUS-BX-51光學(xué)顯微鏡(德國(guó)OLYMPUS)，瑞氏-吉姆薩染液(珠海貝索生物技術(shù)有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 手工鏡檢查法 實(shí)驗(yàn)由2名具有豐富工作經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)主管擔(dān)任，以“雙盲法”、手工鏡檢法分析血涂片，檢查100個(gè)白細(xì)胞后取平均值，檢查紅細(xì)胞和血小板的形態(tài)。

1.3.2 DM96系統(tǒng)檢查法 選取SYSMEXSP1000i推染機(jī)采集、備制血涂片，當(dāng)樣本W(wǎng)BC≤2.5X109/L時(shí)手工備制3片涂片，運(yùn)行DM96系統(tǒng)。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中嚴(yán)格監(jiān)控室內(nèi)質(zhì)量，進(jìn)行樣本分析時(shí)，目標(biāo)檢查100個(gè)以上完整的白細(xì)胞，白細(xì)胞數(shù)量計(jì)數(shù)不達(dá)標(biāo)時(shí)，選用備用血涂片自動(dòng)分類(lèi)分析。形態(tài)學(xué)主管檢查整個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)構(gòu)，紅細(xì)胞形態(tài)大小不均勻/顏色過(guò)淺≥30%判定為陽(yáng)性[2]。

1.3.3 顯微鏡檢陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn) 原始細(xì)胞≥0.01；有核紅細(xì)胞、漿細(xì)胞、早幼粒細(xì)胞≥0.01。

1.3.4 數(shù)據(jù)分析 將顯微鏡的檢測(cè)結(jié)果作為參照。通過(guò)DM96人工矯正異常分析后，對(duì)異常細(xì)胞即早幼粒細(xì)胞、晚幼粒細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、巨大血小板進(jìn)行分析，計(jì)算敏感性、特異性、陰性和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值。具體計(jì)算公式如下：敏感性=真陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)/(真陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)+假陰性細(xì)胞數(shù))×100%；特異性=真陰性細(xì)胞數(shù)/(真陰性細(xì)胞數(shù)+假陽(yáng)性細(xì)胞數(shù))×100%；陽(yáng)性預(yù)測(cè)值 =真陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)/(真陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)+假陽(yáng)性細(xì)胞數(shù))×100%；陰性預(yù)測(cè)值=真陰性細(xì)胞數(shù)/(真陰性細(xì)胞數(shù)+假陰性細(xì)胞數(shù))×100%。

2 結(jié)果(見(jiàn)表1)

表1 對(duì)于DM96矯正后的外周血涂片異常辨別能力分析 n(%)

3 討論

作為一種高質(zhì)量的影像技術(shù)及光電轉(zhuǎn)換數(shù)字技術(shù)，DM96是基于人工智能神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)的全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀。該設(shè)備能夠分析人體細(xì)胞的360多個(gè)參數(shù)。在顯示屏瀏覽DM96分析結(jié)果就可進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，少數(shù)細(xì)胞在人工校正后也可獲取準(zhǔn)確數(shù)據(jù)[3]。

3.1 對(duì)于DM96白細(xì)胞識(shí)別分析

DM將白細(xì)胞分為了桿狀核粒細(xì)胞以及淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞等，原始細(xì)胞的敏感性、一致性、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和特異性均在90%以上。淋巴細(xì)胞和中性核細(xì)胞的檢測(cè)準(zhǔn)確率較高，可識(shí)別大部分細(xì)胞。血小板凝聚不需要人工鏡檢，結(jié)合對(duì)應(yīng)監(jiān)測(cè)分析觀察可判定血小板值。人工鏡檢時(shí)候，僅分析錯(cuò)誤分類(lèi)的細(xì)胞就可將所有白細(xì)胞置于同一電子屏中，這種處理方式可提高工作效率。

3.2 對(duì)于有核紅細(xì)胞的判斷分析

DM96對(duì)于形態(tài)異常的有核紅細(xì)識(shí)別能力不足。DM96對(duì)有核紅細(xì)胞的敏感性和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值均較低主要原因可能為有核紅細(xì)胞在所有病例中的陽(yáng)性率較低。同時(shí)，分析有核紅細(xì)胞在DMS以及血液疾病中沒(méi)有明確分析意義。樣本中假陽(yáng)性、假陰性的有核紅細(xì)胞比例較低，可見(jiàn)有核紅細(xì)胞的檢驗(yàn)不會(huì)影響臨床治療。DM96可將成熟紅細(xì)胞按大小不均、色素濃度不同、多色性程度等級(jí)劃分。

3.3 對(duì)血小板計(jì)量分析

DM96未發(fā)現(xiàn)血小板凝聚時(shí)就需進(jìn)行人工鏡檢。結(jié)合陽(yáng)性檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)和要求，判斷DM96在檢驗(yàn)特別血小板和血小板凝聚等臨床分析，經(jīng)過(guò)判斷分析后，DM96的檢測(cè)值和人工鏡檢預(yù)測(cè)值都大于80%，表明DM96可用于評(píng)價(jià)血小板，但其敏感度判斷可能存在問(wèn)題，可能因?yàn)檠“迥鄢蓤F(tuán)后，分布至涂片邊緣，儀器在掃描時(shí)的瀏覽視角無(wú)法被全面顯示，邊緣血小板的檢測(cè)結(jié)果由此變少，出現(xiàn)了漏檢[4]。對(duì)此可采用人工鏡檢進(jìn)行分析，在全面瀏覽血涂片的基礎(chǔ)上更利于計(jì)數(shù)和形態(tài)分析。

綜上分析，DM95可以幫助分析血液系統(tǒng)惡性疾病的血涂片，對(duì)成熟紅細(xì)胞和白細(xì)胞具有較高的準(zhǔn)確度，但有核紅細(xì)胞的檢查需借助于人工檢查。