每年9-10月,浙江龍游等地的當(dāng)年草魚(yú)種經(jīng)常會(huì)暴發(fā)草魚(yú)出血病,俗稱“十月草魚(yú)瘟”,給草魚(yú)種的養(yǎng)殖造成較大的危害。2019年10月初,浙江魚(yú)老大農(nóng)業(yè)科技有限公司的1口草魚(yú)魚(yú)種池塘出現(xiàn)大量死亡的情況,每天死亡1000多尾,經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)確診為草魚(yú)出血病病毒并發(fā)維氏氣單胞菌感染,經(jīng)處理后取得了較好的效果,現(xiàn)介紹如下。
浙江魚(yú)老大農(nóng)業(yè)科技有限公司的1口草魚(yú)魚(yú)種塘,面積5畝,水深1.5米,共放養(yǎng)草魚(yú)夏花6萬(wàn)尾。前期吃食較好,最多時(shí)每天投喂80千克飼料。9月初白露節(jié)氣期間發(fā)生死魚(yú)之后停料15天,從9月20日開(kāi)始恢復(fù)投喂,每天喂40千克飼料,9月底開(kāi)始每天有3~5尾草魚(yú)死亡現(xiàn)象,發(fā)現(xiàn)有部分指環(huán)蟲(chóng)和錨頭鳋,外潑殺蟲(chóng)劑加硫酸銅的第3天,死亡量迅猛增加,至10月3日,每天死亡增加到1000多尾?,F(xiàn)場(chǎng)觀察,病魚(yú)規(guī)格在100克/尾左右,部分病魚(yú)體表發(fā)紅,尾鰭外周一圈發(fā)白,有明顯爛鰓現(xiàn)象(圖1),解剖發(fā)現(xiàn)肝臟土黃色,腸道被脂肪包裹,剝開(kāi)發(fā)現(xiàn)腸道充血發(fā)紅,附著在腸管上的脂肪也有發(fā)紅(圖2)。腸壁有彈性,腸內(nèi)無(wú)食物,病魚(yú)鰾壁充血。將病魚(yú)組織用無(wú)菌袋加冰包送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。
圖1 患病草魚(yú)外表
圖2 患病草魚(yú)解剖
1.細(xì)菌檢測(cè) 無(wú)菌操作,取肝、腎組織劃線于TSA培養(yǎng)基,30℃培養(yǎng)24小時(shí),培養(yǎng)基上有少量表面光滑濕潤(rùn)、向上隆起的乳白色圓形菌落,為革蘭氏陰性桿菌。純化培養(yǎng)后,經(jīng)梅里埃VITEK2 Compact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀鑒定為維氏氣單胞菌。
2.病毒檢測(cè) 取病魚(yú)的肝、脾、腎等內(nèi)臟組織于無(wú)菌培養(yǎng)皿中,用無(wú)菌眼科剪剪碎,加入10倍體積(V/W)的DPBS(Sigma)轉(zhuǎn)入玻璃均化器內(nèi)并在冰浴下研磨成組織勻漿液,使用TakaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit試劑盒(TaKaRa)提取RNA,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄為病毒cDNA,以草魚(yú)出血病病毒基因Ⅱ型引物(F1-TATGTCACAGCCAGAGGTGG, R1-AAATGCTNAGTACCATGTTCTGC)進(jìn) 行PCR擴(kuò)增,獲得約590 bp的特異性條帶,檢測(cè)為草魚(yú)出血病病毒陽(yáng)性。
3.水質(zhì)檢測(cè) 經(jīng)檢測(cè),水質(zhì)指標(biāo)基本正常,pH 8.2,氨氮0.3毫克/升,亞硝酸鹽0.1毫克/升。
4.診斷 經(jīng)臨床檢查和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),該病診斷為草魚(yú)出血病,病原為草魚(yú)出血病病毒感染,并發(fā)維氏氣單胞菌的細(xì)菌感染。病因可能為草魚(yú)種前期吃料過(guò)猛,生長(zhǎng)太快,導(dǎo)致肝胰臟等代謝障礙嚴(yán)重,加上使用了硫酸銅等刺激性藥物后,誘發(fā)草魚(yú)出血病病毒的增殖而染病死亡。
1.治療用藥 由于發(fā)病比較嚴(yán)重,先外用有機(jī)酸、應(yīng)激素等抗應(yīng)激穩(wěn)水,內(nèi)服抗應(yīng)激藥物應(yīng)激素,加上抗病毒的板藍(lán)根、金銀花,增強(qiáng)免疫的黃芪多糖及保肝膽中藥,連續(xù)投喂3天,緩解魚(yú)體壓力,提高病魚(yú)體質(zhì),然后再添加敏感抗菌藥物10%恩諾沙星繼續(xù)內(nèi)服3天,停兩天后繼續(xù)內(nèi)服上述中藥5天。
2.效果 10月3日死亡1000多尾,10月4日開(kāi)始用藥,當(dāng)天死亡800多尾,10月9日死亡30多尾,到10月15日僅死亡3尾,之后未見(jiàn)死亡。
1.草魚(yú)出血病的流行規(guī)律 草魚(yú)出血病主要在水溫為20~30℃的季節(jié)發(fā)病,尤其是水溫為25~30℃時(shí)發(fā)病最為嚴(yán)重。草魚(yú)出血病全年具有兩個(gè)明顯的高峰階段:第一個(gè)高峰期是5月底-7月初,此時(shí)水溫超過(guò)25℃,主要危害養(yǎng)殖2齡草魚(yú),即前一年春季投放的夏花魚(yú)種經(jīng)過(guò)一年飼養(yǎng)并越冬以后的春片魚(yú)種,造成大量死亡,該階段的草魚(yú)以細(xì)菌性感染為主,同時(shí)有病毒的介導(dǎo),完全以細(xì)菌性治療,時(shí)間很長(zhǎng),在江浙一帶直至出梅以后才會(huì)停止;第二個(gè)高峰期是9-10月,此時(shí)水溫下降到30℃以下,主要侵害當(dāng)年的草魚(yú)種,規(guī)格為6~10尾/千克及100多尾/千克,規(guī)格越大死亡率越高,直至水溫下降至20℃以下才會(huì)停止。
2.對(duì)十月草魚(yú)瘟的控制 十月草魚(yú)瘟以病毒感染為主,有時(shí)會(huì)有細(xì)菌的并發(fā)感染。雖然對(duì)病毒控制缺乏有效的藥物,但如果能夠充分調(diào)動(dòng)魚(yú)體自身的免疫功能,利用中草藥提取物中有效成分對(duì)魚(yú)體進(jìn)行微調(diào)節(jié),使魚(yú)體維持住自身的平衡狀態(tài),那即使有病毒感染也不一定會(huì)發(fā)病,發(fā)病了也能控制。因此,我們通過(guò)在飼料中添加抗應(yīng)激、增強(qiáng)免疫、保肝膽的中藥,在水體中進(jìn)行抗應(yīng)激和有機(jī)酸解毒,最終控制了病情。3.對(duì)魚(yú)病的防治思考 我們面對(duì)多數(shù)的魚(yú)病時(shí),往往先考慮殺蟲(chóng)消毒,以為把病原殺了,魚(yú)病就會(huì)好。其實(shí)一次魚(yú)病的產(chǎn)生,病毒、細(xì)菌、寄生蟲(chóng)的感染是次發(fā)性的,最主要的病因是魚(yú)類(lèi)機(jī)體的免疫力下降。同時(shí),不合理地殺蟲(chóng)消毒用藥,還是促進(jìn)疾病暴發(fā)的一個(gè)誘因,特別是一些刺激性的殺蟲(chóng)藥物,如養(yǎng)殖戶喜歡用的硫酸銅,經(jīng)常因?yàn)榱蛩徙~藥物自身的刺激導(dǎo)致魚(yú)體黏液脫落、殺藻導(dǎo)致的缺氧等誘發(fā)病毒、細(xì)菌性疾病的發(fā)生。其他如天氣不穩(wěn)定、氣溫變化大,甚至投喂量增加過(guò)快也會(huì)誘發(fā)草魚(yú)出血病的發(fā)生。那么,是什么原因?qū)е卖~(yú)體的抗病力下降?從檢查患病魚(yú)體發(fā)現(xiàn),病魚(yú)幾乎都出現(xiàn)肝臟發(fā)黃變脆或腫大、體內(nèi)油脂堆積出現(xiàn)的油包腸的問(wèn)題,天氣一變化就會(huì)因刺激出現(xiàn)發(fā)病死魚(yú)的現(xiàn)象。究其原因應(yīng)該是與魚(yú)體的營(yíng)養(yǎng)代謝出現(xiàn)問(wèn)題有關(guān),由于草魚(yú)魚(yú)種塘密度高,飼料投喂過(guò)多,部分魚(yú)搶食兇猛,生長(zhǎng)過(guò)快,而表現(xiàn)明顯的肝臟受損、脂肪堆積等病理癥狀,加之缺乏有針對(duì)性開(kāi)展魚(yú)類(lèi)的肝腸保健工作,特別受2019年魚(yú)價(jià)偏低的影響,預(yù)防保健工作都被忽略了,出現(xiàn)正常時(shí)大量投喂、一有發(fā)病死亡又采取長(zhǎng)時(shí)間的停料措施,導(dǎo)致魚(yú)的體質(zhì)下降。當(dāng)環(huán)境出現(xiàn)大的應(yīng)激變化時(shí),魚(yú)體免疫系統(tǒng)出現(xiàn)崩潰,死亡就會(huì)激增。而此時(shí),仍采用單一的外用殺蟲(chóng)消毒,只會(huì)雪上加霜。
因此,在防控魚(yú)病的時(shí)候,首先是緩解魚(yú)的自身體質(zhì)薄弱的一面,適當(dāng)停料,用解毒穩(wěn)水的過(guò)硫酸氫鉀、有機(jī)酸、腐植酸鈉以及使用抗應(yīng)激的藥物如應(yīng)激素、補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)的維生素、修復(fù)肝膽的保肝中草藥等外潑。其次內(nèi)服以促代謝、抗病毒藥物刺五加、柴胡、板藍(lán)根末等。在治療過(guò)程中考慮病毒和細(xì)菌的同時(shí)感染,堅(jiān)持先調(diào)理再處理病毒和細(xì)菌,等魚(yú)有部分恢復(fù)后,適當(dāng)增加投喂抗菌藥物。雖然時(shí)間可能較長(zhǎng),但總體還是可控的。