桑葉水煎醇沉液對小鼠鎮(zhèn)痛作用的研究

何喆　鮑翠俊

桑樹為桑屬植物桑科多年生落葉小喬木植物，每年可摘3～6次。生命力很強，中國是蠶絲業(yè)的發(fā)源地，栽桑養(yǎng)蠶具有500多年的悠久歷史。本文通過小鼠鎮(zhèn)痛實驗，觀察了桑葉乙醇沉淀物不同劑量組對小鼠的鎮(zhèn)痛作用，為進一步研究桑葉乙醇沉淀物的有效成分及其鎮(zhèn)痛作用奠定了基礎(chǔ)，也為發(fā)現(xiàn)桑葉乙醇沉淀物的類型及其開發(fā)利用提供了實驗依據(jù)。

一、材料與方法

1、動物

昆明種小鼠（普通級）200只。25～30g，由安徽科技學(xué)院實驗動物中心提供（普通級）。

2、儀器

R20-型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海申生科技有限公司）;SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）;FA-1004型電子天平（上海天平儀器廠）;TDL80-IB型臺式離心機（上海安亭科儀器廠）;YP600型電子分析天平（上海精科電子廠）;RB-200型智能熱板儀（成都泰盟科技有限公司）。

3、藥材與試劑

（1）藥材。桑葉：安徽科技學(xué)院中藥園5月份采集，烘干，備用。

（2）試劑。無水乙醇（分析醇，上海建業(yè)化工有限試劑廠）;生理鹽水（安徽環(huán)球藥業(yè)限公司）;安乃近注射液（蕪湖原奇制藥有限公司）;冰乙酸（上?；瘜W(xué)試劑有限公司）。

4、桑葉水煎醇沉液的制備

稱取桑葉200g，置于不銹鋼鍋中，按照藥物與蒸餾水1：8的比例往鍋內(nèi)加入1600mL蒸餾水浸泡30min，用電爐煎煮，先用武火水開后再用文火煮30min，使用8層紗布過濾。藥渣復(fù)煎1次，第二次20min，合并2次煎液，濃縮、離心、定容至200mL，即得含生藥1g/mL桑葉水煎液。取桑葉水煎液200mL，以3：7的比例加無水乙醇，使醇含量達70%，密封于4℃冰箱冷藏24h。濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器回收乙醇（轉(zhuǎn)速100 r/min，50℃），離心10min（轉(zhuǎn)速3800r/min），最后定容為200mL（含生藥1g/mL），即得桑葉水煎醇沉液，裝瓶，備用。

5、試驗方法

（1）熱板法鎮(zhèn)痛試驗。從100只雌鼠中選取合格雌鼠50只，隨機分5組，每組10只。

（2）扭體法鎮(zhèn)痛試驗。從100只小鼠中隨機選取50只合格小鼠（雌雄均可），將選取的50只合格小鼠隨機分5組，每組10只。

6、統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 17.0 統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理，其結(jié)果以（±SD）表示，統(tǒng)計學(xué)處理采用t檢驗。

二、結(jié)果與分析

1、桑葉水煎醇沉液對熱板法所致小鼠鎮(zhèn)痛作用的影響

表1的結(jié)果表明：給藥前各劑量組差異不顯著（p>0.05），給藥后各組的痛閾值都有提高，陽性對照組痛閾值最高，生理鹽水組最低。陽性對照組、高劑量組和中組劑量組與生理鹽水組比較，差異極顯著（p<0.01），低劑量組與生理鹽水組比較，差異顯著（p<0.05）;生理鹽水組與陽性對照組比較，差異極顯著（p<0.01），低劑量組與陽性對照組，比較差異顯著（p<0.05），高劑量組和中劑量組與陽性對照組，比較差異不顯著（p>0.05）;各劑量組之間差異不顯著（p>0.05）。以上結(jié)果表明桑葉水煎醇沉液對小鼠有鎮(zhèn)痛作用，中劑量組效果明顯。

2、桑葉水煎醇沉液對扭體法所致小鼠疼痛的影響

表2結(jié)果表明：在第一次出現(xiàn)扭體反應(yīng)15min內(nèi)的扭體次數(shù)的比較中，陽性對照組與生理鹽水組比較，差異顯著（p<0.05），各劑量組與生理鹽水組比較差異極顯著（p<0.01）;生理鹽水組和高劑量組與陽性對照組比較，差異顯著（p<0.05），中劑量組和低劑量組與陽性對照組比較差異極顯著（p<0.01）;各劑量組之間差異不顯著（p>0.05），各劑量組之間扭體數(shù)降低。上述結(jié)果表明腹腔注射不同劑量的桑葉水煎醇沉液對小鼠有鎮(zhèn)痛作用，其中高劑量、中劑量、低劑量組效果明顯。

（作者單位：1.245702安徽省黃山市黃山區(qū)耿城鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)站;2.245720安徽省黃山市黃山區(qū)永豐鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)站）